Оборот липопротеинов на диетах с низким и высоким содержанием МНЖК

Все субъекты будут проходить два параллельных двухэтапных лечения. Во время одного лечения субъекты будут переведены на диету с низким содержанием жиров в течение одного месяца (контрольная предварительная диета), а затем в течение второго месяца будут продолжать соблюдать диету с низким содержанием жиров (т. low-MUFA) с добавлением компонентов портфеля. Порядок этих двух фаз не будет случайным. Другое лечение будет похоже на описанное выше, за исключением того, что фоновая диета фазы портфолио будет с высоким содержанием мононенасыщенных жиров (с высоким содержанием МНЖК). Субъекты будут случайным образом распределены для любого лечения. Диеты будут метаболически контролироваться, и вся пища будет предоставляться с недельными интервалами.

Субъекты будут приходить после 12-часового ночного голодания в Центр модификации факторов риска в больнице Св. Михаила или в Департамент диетологии Университета Торонто непосредственно перед началом каждой фазы лечения и с недельными интервалами в течение каждого периода исследования. Перед началом исследования испытуемые будут проинструктированы о деталях протокола исследуемой диеты. Их также попросят поддерживать постоянный уровень физической активности на протяжении всего исследования. Во время всех посещений измеряют массу тела (в кг) в домашней одежде, без обуви, а артериальное давление измеряют дважды на ведущей руке после того, как субъекты сидят не менее 20 минут. Рост (в см) будет записан при первом посещении. В течение всего периода исследования испытуемые будут соблюдать диету, предписанную при первом посещении. При каждом втором посещении каждой фазы лечения субъекты будут сдавать образец крови натощак. Кинетические тесты метаболизма липопротеинов будут проводиться на 4-й и 8-й неделе исследования. На исходном уровне и в течение последней недели каждой фазы исследования будут завершены 24-часовой сбор мочи и 12-часовой сбор водорода в выдыхаемом воздухе.

Измерение кинетики аполипопротеина in vivo будет проводиться с использованием первично-константной инфузии [D3]L-лейцина. Этот протокол позволяет одновременно определять кинетику всех аполипопротеинов. Кинетические исследования будут проводиться в состоянии постоянного приема пищи, когда участники получают 1/30 часть своей суточной потребности в энергии каждые полчаса на протяжении всего теста (15 часов). Эти методы подробно описаны в предыдущих публикациях нашей группы. Вкратце, в 7 утра утром в день исследования, после 12-часового ночного голодания, участники будут госпитализированы в отделение клинических исследований больницы общего профиля Торонто, где им будут вставлены два внутривенных катетера (IV), по одному в каждую вену предплечья. Одна капельница предназначена для инфузии стабильного изотопа, описанного ниже, и одна для забора образцов крови. После достижения устойчивого состояния (через 3 часа после получасового небольшого приема пищи) субъекты сначала получают болюсную инъекцию 10 мкмоль/кг массы тела [D3]L-лейцина ([D3]L-лейцин 98%, C/ D/N изотопы), растворенные в физиологическом растворе (0,9% NaCl), а затем постоянная инфузия 10 мкмоль/кг/ч [D3]L-лейцина в течение 12 часов через внутривенный катетер, вставленный в вену левого предплечья. Образцы крови будут собираться через равные промежутки времени (0, 1/2, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 11, 12 часов). Все субфракции липопротеинов будут разделены последовательным ультрацентрифугированием и затем заморожены при -80°C до тех пор, пока они не будут обработаны для анализа.