Obrót lipoproteinami w dietach o niskiej i wysokiej zawartości MUFA

Wszyscy pacjenci zostaną poddani dwóm równoległym dwufazowym zabiegom. W przypadku jednego zabiegu pacjenci zostaną poddani diecie niskotłuszczowej przez jeden miesiąc (kontrolna dieta wstępna), a następnie przez drugi miesiąc będą kontynuować dietę niskotłuszczową (tj. low-MUFA) z dodatkiem składników portfelowych. Kolejność tych dwóch faz nie będzie losowa. Inne leczenie będzie podobne do powyższego, z wyjątkiem tego, że dieta podstawowa fazy portfolio będzie bogata w tłuszcze jednonienasycone (wysoka zawartość MUFA). Osobnicy zostaną losowo przydzieleni do leczenia. Diety będą kontrolowane metabolicznie, a cała żywność będzie dostarczana w odstępach tygodniowych.

Pacjenci będą zgłaszać się po 12-godzinnym nocnym poście do Centrum Modyfikacji Czynników Ryzyka w Szpitalu św. Michała lub na Wydziale Nauk o Żywieniu Uniwersytetu w Toronto bezpośrednio przed rozpoczęciem każdej fazy leczenia iw odstępach tygodniowych w trakcie każdego okresu badania. Przed rozpoczęciem badania uczestnicy zostaną poinstruowani o szczegółach protokołu diety w ramach badania. Zostaną również poproszeni o utrzymanie stałego poziomu aktywności fizycznej przez cały czas trwania badania. Podczas wszystkich wizyt masa ciała (w kg) będzie mierzona w odzieży domowej, bez butów, a ciśnienie krwi będzie mierzone dwukrotnie w ramieniu dominującym po tym, jak badani siedzą przez co najmniej 20 minut. Wzrost (w cm) zostanie zapisany podczas pierwszej wizyty. Przez cały okres badania badani będą przestrzegać diety przepisanej podczas pierwszej wizyty. Podczas co drugiej wizyty w każdej fazie leczenia pacjenci będą dostarczać próbkę krwi na czczo. Testy kinetyczne metabolizmu lipoprotein zostaną wykonane w 4. i 8. tygodniu badania. Na początku iw ostatnim tygodniu każdej fazy badania zakończona zostanie 24-godzinna zbiórka moczu i 12-godzinna zbiórka wodoru z oddechu.

Pomiar kinetyki apolipoproteiny in vivo zostanie przeprowadzony przy użyciu stałej infuzji [D3]L-leucyny. Protokół ten pozwala na określenie kinetyki wszystkich apolipoprotein jednocześnie. Badania kinetyki będą prowadzone w stanie ciągłego pożywienia, gdzie uczestnicy otrzymują 1/30 dziennego zapotrzebowania energetycznego co pół godziny przez cały czas trwania testu (15 godzin). Metody te zostały szczegółowo opisane w poprzednich publikacjach naszego zespołu. W skrócie, o 7 rano w dniu badania, po 12-godzinnym nocnym poście, uczestnicy zostaną przyjęci do Oddziału Badań Klinicznych Szpitala Ogólnego w Toronto i zostaną wprowadzone dwa cewniki dożylne (IV), po jednym do każdej żyły przedramienia. Jedna IV będzie przeznaczona do wlewu stabilnego izotopu opisanego poniżej, a druga do pobierania próbek krwi. Po osiągnięciu stanu stacjonarnego (3 godziny po małych, półgodzinnych posiłkach), badani otrzymają najpierw wstrzyknięcie bolusa 10 µmol/kg masy ciała [D3]L-leucyny ([D3]L-leucyna 98%, C/ D/N Isotopes) rozpuszczone w soli fizjologicznej (0,9% NaCl), a następnie ciągły wlew 10 µmol/kg/h [D3]L-leucyny przez 12 godzin przez linię dożylną wprowadzoną do żyły lewego przedramienia. Próbki krwi będą pobierane w regularnych odstępach czasu (0, 1/2, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 11, 12 godzin). Wszystkie podfrakcje lipoprotein zostaną rozdzielone przez sekwencyjne ultrawirowanie, a następnie zamrożone w temperaturze -80oC do czasu ich przetworzenia do analizy.