Lipoproteïne-omzet op Low- en High-MUFA Portfolio-diëten

Alle proefpersonen ondergaan twee parallelle 2-fasenbehandelingen. Bij één behandeling krijgen de proefpersonen gedurende één maand een vetarm dieet (controle-inloopdieet) en daarna gaan ze gedurende de tweede maand door met het vetarme dieet (d.w.z. low-MUFA) met toevoeging van de portfoliocomponenten. De volgorde van deze twee fasen zal niet willekeurig zijn. De andere behandeling zal vergelijkbaar zijn met de bovenstaande, behalve dat het achtergronddieet van de portfoliofase veel enkelvoudig onverzadigd vet (hoog MUFA) zal bevatten. Onderwerpen worden willekeurig toegewezen aan beide behandelingen. Diëten zullen metabolisch worden gecontroleerd en al het voedsel zal met tussenpozen van een week worden verstrekt.

De proefpersonen zullen na een nachtelijke vastenperiode van 12 uur naar het Risk Factor Modification Centre in het St. Michael's Hospital of het Department of Nutritional Sciences, University of Toronto komen, onmiddellijk voorafgaand aan het begin van elke behandelingsfase en met tussenpozen van een week in de loop van elke studieperiode. Voorafgaand aan de start van het onderzoek zullen de proefpersonen worden geïnstrueerd over details van het onderzoeksdieetprotocol. Ze zullen ook worden gevraagd om gedurende de hele studie een constant niveau van fysieke activiteit te behouden. Bij alle bezoeken wordt het lichaamsgewicht (in kg) gemeten in binnenkleding, zonder schoenen, en wordt tweemaal de bloeddruk gemeten in de dominante arm nadat de proefpersoon ten minste 20 minuten heeft gezeten. Bij het eerste bezoek wordt de lengte (in cm) genoteerd. Gedurende de hele studieperiode zullen proefpersonen het dieet volgen dat bij hun eerste bezoek is voorgeschreven. Bij elk tweede bezoek van elke behandelingsfase zullen proefpersonen een nuchter bloedmonster afgeven. De kinetische tests van het lipoproteïnemetabolisme zullen worden uitgevoerd tijdens de 4e en 8e week van de studie. Bij baseline en tijdens de laatste week van elke studiefase zullen de 24-uurs urineverzameling en de 12-uurs adem-waterstofverzamelingen worden voltooid.

De meting van de in vivo kinetiek van apolipoproteïne zal uitgevoerd worden met behulp van een primed-constant infuus van [D3]L-leucine. Dit protocol zorgt voor de bepaling van de kinetiek van alle apolipoproteïnen tegelijk. Kinetische studies zullen worden uitgevoerd in de constant gevoede toestand, waarbij deelnemers gedurende de hele duur van de test (15 uur) elk half uur 1/30e van hun dagelijkse energiebehoefte ontvangen. Deze methoden worden in detail beschreven in eerdere publicaties van onze groep. In het kort, om 7 uur op de ochtend van het onderzoek, na 12 uur vasten gedurende de nacht, zullen de deelnemers worden opgenomen in de Toronto General Hospital Clinical Investigation Unit en zullen twee intraveneuze katheters (IV's) worden ingebracht, één in elke onderarmader. Eén infuus is voor infusie van de hieronder beschreven stabiele isotoop en één voor het afnemen van bloedmonsters. Na het bereiken van een steady state (3 uur na de kleine maaltijden van een half uur), krijgen proefpersonen eerst een bolusinjectie van 10 µmol/kg lichaamsgewicht [D3]L-leucine ([D3]L-leucine 98%, C/ D/N-isotopen) opgelost in fysiologische zoutoplossing (0,9% NaCl) en vervolgens een constant infuus van 10 µmol/kg/uur [D3]L-leucine gedurende 12 uur via een intraveneuze lijn ingebracht in een linker onderarmader. Bloedmonsters worden op regelmatige tijdstippen afgenomen (0, 1/2, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 11, 12 uur). Alle subfracties van lipoproteïnen worden gescheiden door sequentiële ultracentrifugatie en daarna ingevroren bij -80oC totdat ze worden verwerkt voor analyse.