Thérapie par cellules souches mésenchymateuses pour le traitement des troubles inflammatoires et/ou auto-immuns graves ou réfractaires

1. Collecte et expansion de MSC La collecte de moelle osseuse et les cultures d'expansion de MSC seront réalisées au Laboratoire de Thérapie Cellulaire et Génique (LTCG) de l'Université de Liège. De la moelle osseuse (50 ml) sera prélevée de donneurs non apparentés sous anesthésie locale, des cellules mononucléaires seront isolées et cultivées pendant un total d'environ 4 semaines. Après un nombre suffisant de passages, les cellules seront récoltées, lavées et congelées.
2. Injections de MSC Les MSC seront décongelés et dilués au Laboratoire de thérapie cellulaire et génique (LTCG), transportés au service hospitalier et injectés par voie intraveineuse dans l'heure suivant la décongélation à travers un cathéter central (si disponible) ou une bonne veine périphérique. Idéalement, une dose de 1,5 à 2,0 x 106/kg de MSC receveur doit être administrée à chaque perfusion. Le MSC sera perfusé même si le nombre de cellules post-décongélation est inférieur à cela. Les patients atteints de la maladie de Crohn recevront deux injections de MSC allogéniques à 4 semaines d'intervalle (semaine 0 et 4).
3. Suivi des patients

3.1. Contrôles de qualité des produits MSC Les contrôles de qualité des produits MSC comprendront la microscopie, le comptage et le différentiel des cellules nucléées, les tests de viabilité cellulaire, les tests de microbiologie (y compris la virologie standard, la culture bactérienne et la détection des enzymes mycoplasmiques par bioluminescence, les tests d'endotoxines, le caryotype et l'analyse FACS (cellules doit être positif pour :CD90 > 70%,CD105 > 70%,CD73 > 70% et négatif pour :CD14 < 5%,CD34 < 5%, CD45 < 5%, CD3 < 1%).

3.2. Toxicités des perfusions de cellules : les toxicités potentielles associées aux perfusions de MSC seront soigneusement surveillées conformément aux normes de l'établissement et documentées sur le rapport de perfusion et/ou le formulaire de rapport SAE. Aucune modification posologique n'est prévue. En cas de réaction sévère à la première perfusion de MSC, la deuxième perfusion ne sera pas effectuée.

3.3. Données cliniques Les paramètres suivants seront suivis au départ ainsi qu'aux semaines 2, 4, 8 et 12 : taux de CDAI, taux de CRP, taux de calprotectine fécale. De plus, la durée de l'hospitalisation, les infections, toute autre complication grave, la mort et la survie seront enregistrées.

3.4. Données immunologiques : la fonction immunitaire du patient sera surveillée au départ et à des intervalles appropriés : nombre de cellules nucléées et différentiel ; Analyse FACS avec détermination du % de cellules (sur WBC total) avec les marqueurs : CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD45RA+, CD45RO+, CD56+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ ; CD3+CD56+ ; CD4+CD45RA+, CD4+CD45RO+ ; CD3-CD56+ ; taux de lymphocytes T régulateurs (Treg); taux d'immunoglobuline, répertoire Vβ des lymphocytes T ; Quantification des TREC dans les lymphocytes T.