Terapia con células madre mesenquimales para el tratamiento de trastornos inflamatorios y/o autoinmunitarios graves o refractarios

1. La recolección y expansión de MSC La recolección de médula ósea y los cultivos de expansión de MSC se llevarán a cabo en el Laboratorio de Terapia Celular y Génica (LTCG) de la Universidad de Lieja. Se recolectará médula ósea (50 ml) de donantes no emparentados bajo anestesia local, se aislarán células mononucleares y se cultivarán durante un total de aproximadamente 4 semanas. Después de un número suficiente de pases, las células se recolectarán, lavarán y congelarán.
2. Inyecciones de MSC Las MSC se descongelarán y diluirán en el Laboratorio de Terapia Celular y Génica (LTCG), se transportarán a la sala del hospital y se inyectarán por vía intravenosa en el plazo de 1 hora desde la descongelación a través de un catéter central (cuando esté disponible) o una buena vena periférica. Lo ideal es administrar una dosis de 1,5 - 2,0 x 106/kg de CMM del receptor en cada infusión. Se infundirá MSC incluso si el número de células posteriores a la descongelación es menor. Los pacientes con enfermedad de Crohn recibirán dos inyecciones de MSC alogénicas con 4 semanas de diferencia (semanas 0 y 4).
3. Seguimiento de pacientes

3.1. Controles de calidad de los productos MSC Los controles de calidad del producto MSC incluirán microscopía, recuento y diferencial de células nucleadas, pruebas de viabilidad celular, pruebas de microbiología (incluida virología estándar, cultivo bacteriano y detección de enzimas micoplasmáticas por bioluminiscencia, pruebas de endotoxinas, cariotipo y análisis FACS (células debe ser positivo para: CD90 > 70 %, CD105 > 70 %, CD73 > 70 % y negativo para: CD14 < 5 %, CD34 < 5 %, CD45 < 5 %, CD3 < 1 %).

3.2. Toxicidades de las infusiones de células: las toxicidades potenciales asociadas con las infusiones de MSC se controlarán cuidadosamente según los estándares de la institución y se documentarán en el informe de infusión y/o en el formulario de informe de SAE. No se prevén modificaciones de dosis. En caso de reacción grave a la primera infusión de MSC, no se realizará la segunda infusión.

3.3. Datos clínicos Se seguirán los siguientes parámetros al inicio, así como en las semanas 2, 4, 8 y 12: nivel de CDAI, niveles de CRP, niveles de calprotectina fecal. Además, se registrará la duración de la hospitalización, las infecciones, cualquier otra complicación grave y la muerte y supervivencia.

3.4. Datos inmunológicos: La función inmunológica del paciente se controlará al inicio ya intervalos apropiados: recuento de células nucleadas y diferencial; Análisis FACS con determinación del % de células (sobre total de WBC) con los marcadores :CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD45RA+, CD45RO+, CD56+, CD3+CD4+, CD3+CD8+; CD3+CD56+; CD4+CD45RA+, CD4+CD45RO+; CD3-CD56+; niveles de células T reguladoras (Treg); niveles de inmunoglobulinas, repertorio Vβ de linfocitos T; Cuantificación de TRECs en linfocitos T.