Essai pilote d'immunothérapie pour les gliomes malins récurrents

Cet essai sera une adaptation et une continuation d'un essai précédemment publié, reproduisant la taille de l'étude originale de 12 patients. Les modifications par rapport à l'essai précédent incluent une séquence d'oligodésoxynucléotides modifiée et un traitement au moment du diagnostic initial, qui se produirait avec un traitement standard concomitant dans un essai de phase 1 supplémentaire en tant que continuation si aucune toxicité limitant le débit n'est notée dans le bras de phase 1 d'origine. Pour des raisons pratiques, une étude standard d'escalade de dose de phase 1 n'est pas possible avec le paradigme actuel. Bien que nous ayons pu identifier un sous-produit bioactif distinct de l'apoptose des cellules tumorales induite par l'IGF-1R/AS ODN (exosomes), il est difficile d'effectuer une escalade de dose de manière typique. De plus, la concentration d'antigène peut affecter la réponse immunitaire de manière biphasique : trop peu ou trop peut atténuer une réponse immunitaire, donc même si l'antigène ou les antigènes étaient connus, une escalade de dose pharmacologique typique ne suivrait pas la pharmacocinétique typique. Pour ces raisons, nous avons conçu un bras de phase 1 de suivi dans lequel 32 patients recevront un traitement lors de la chirurgie initiale dans 4 cohortes de 8 patients chacune. Nous varierons le nombre de chambres et la durée d'implantation pour chacune des quatre cohortes dans le bras supplémentaire de phase 1. Lorsque nous avons documenté une augmentation des lymphocytes infiltrant la tumeur après le traitement dans notre essai initial, cette observation a fourni des preuves préliminaires à l'appui que ce vaccin thérapeutique déclenchera une réponse immunitaire adaptative. Nous avons conçu le bras de phase 1 pour élucider davantage une réponse immunitaire avec une évaluation quantitative des cellules T spécifiques de la tumeur ainsi que des macrophages M2 en circulation avant et après le traitement. La conception de la phase 1 de l'essai permettra une analyse statistique de la dose d'antigène (nombre de chambres) et du temps d'exposition (temps de séjour dans la chambre), car l'une ou l'autre des variables peut être liée à toute toxicité ou réponse au traitement.

Un résumé du paradigme de traitement comprend : une leucophérèse plasmatique préopératoire, puis une intervention chirurgicale avec prélèvement de tissu et implantation de jusqu'à 10 chambres dans la gaine du muscle droit avec IGF-1R/AS ODN, comme indiqué précédemment dans les 24 heures suivant la craniotomie, plus une chambre contenant uniquement solution saline tamponnée au phosphate. Douze patients traités pour une maladie récurrente seront évalués pour la sécurité du traitement. Si le profil d'innocuité est acceptable, l'essai sera suivi d'un recrutement de 32 patients dans un essai de phase 1 supplémentaire en tant que continuation sur environ 3 ans de manière prospective à partir de l'hôpital universitaire Thomas Jefferson et de l'hôpital Jefferson pour les neurosciences. Tous les patients qui répondent aux critères d'éligibilité et acceptent de participer à cette étude seront des candidats potentiels pour le traitement.

Préparation préopératoire - Les patients consentiront à une leucophérèse plasmatique au moins 3 jours avant la craniotomie élective. Les PBMC seront stockés pour une analyse ultérieure des réponses des lymphocytes T, de la présence de macrophages M2 producteurs d'IL-10 et de la préparation des cellules dendritiques (DC). Des tests ELISPOT seront effectués pour mesurer les réponses des lymphocytes T aux cellules tumorales autologues et aux cellules tumorales allogéniques (lysat tumoral U118) en utilisant des DC à amorçage croisé pour évaluer à la fois l'immunité anti-gliome native et toute immunité acquise après le traitement. Si les cellules de gliome allogéniques U118 provoquent une réponse CTL, cette lignée cellulaire peut servir de source d'antigène pour les futurs protocoles de vaccination en série.

Une TEP préopératoire comme référence par rapport à laquelle nous pouvons comparer les TEP post-traitement comme indiqué.

Chirurgie et récupération des cellules tumorales - Une craniotomie et une résection tumorale guidée par IRM seront effectuées sur tous les patients de l'étude par un neurochirurgien expérimenté. Tous les gliomes malins testés obtenus à partir de craniotomies réalisées à l'Université Thomas Jefferson ont exprimé l'IGF-1R (M. Resnicoff, communication personnelle). Au cours de la résection, le tissu tumoral viable sera confirmé par un examen pathologique des coupes congelées, puis envoyé à une installation BL-2 pour désagrégation et mise en culture. L'analyse de coupe permanente comprendra une immunocoloration IGF-1R pour déterminer la présence d'IGF-1R. Une fois les cellules attachées, les cellules seront immédiatement traitées avec IGF-1R/AS ODN. Les cellules tumorales seront incubées avec IGF-1R/AS ODN pendant un maximum de 6 heures et 106 cellules seront ensuite chargées dans chaque chambre et un maximum cible de 10 chambres préparées. Pour toutes les productions de lots combinés, deux chambres irradiées supplémentaires et 300 ul de cellules tumorales autologues traitées seront envoyés en microbiologie pour évaluation de la stérilité conformément aux exigences de la FDA. Plus de 5 et moins de 10 chambres seront notées comme une violation mineure du protocole. La récupération de cellules non viables constituera un motif de désinscription du protocole. Avant l'implantation, les chambres seront irradiées avec 5 Gy d'irradiation X comme décrit précédemment. Un échantillon de tumeur supplémentaire sera congelé instantanément pour des objectifs de recherche exploratoire. Au moment de la craniotomie, le chirurgien créera un site accepteur abdominal pour l'implantation ultérieure de la chambre de diffusion dans la gaine du muscle droit. Ce site d'implantation a été choisi pour les raisons suivantes : (1) il a donné des réponses biologiques favorables objectives dans l'essai humain de phase 1 antérieur ; (2) ce site accueillera facilement des implantations à chambres multiples ; (3) ce site devrait susciter une forte réponse de l'hôte en raison de l'étendue de la plaie, de l'introduction d'un corps étranger et de son contenu, de la vascularisation de la gaine et du muscle droit et du drainage lymphatique inguinal favorable à partir de ce site ; et (4) l'exposition de la gaine et du muscle droit est familière aux neurochirurgiens qui effectuent tous couramment des shunts ventriculaires-péritonéaux.

Implantation/explantation de la chambre de biodiffusion - La préparation des cellules tumorales autologues, l'encapsulation dans les chambres de biodiffusion, l'irradiation et l'implantation/l'explantation de la chambre sont toutes des procédures détaillées dans le manuel des procédures opérationnelles standard pour IND #14379 (SOP 001). En bref, au chevet du patient dans l'unité de soins intensifs, le patient est sous sédation avec du Midazolam intraveineux (Versed, 0,05 mg/kg répété toutes les 2 à 3 minutes jusqu'à une sédation adéquate jusqu'à une dose maximale de 0,2 mg/kg) et du Fentanyl (Sublimaze, 5 mg qui peut être répété toutes les 5 minutes jusqu'à une dose maximale de 20 mg) et la plaie infiltrée avec jusqu'à 30 cc de bupivicaïne à 0,5 %. Avec une anesthésie locale et une sédation appropriées, la plaie préparée lors de la chirurgie est rouverte à travers la gaine du muscle droit et jusqu'à 10 chambres sont implantées entre la gaine du muscle droit et le muscle droit. La gaine est ensuite rapprochée avec des sutures en vicryl 2-0 et la peau réapprochée avec des sutures en nylon 3-0. La période d'implantation de 24 heures a été choisie en fonction du profil de sécurité favorable et des réponses biologiques prometteuses notées lors de la phase humaine précédente. 1 essai. L'explantation implique le même processus le lendemain avec une explantation de la chambre et une fermeture de plaie à quatre couches.

Calendrier d'imagerie IRM de suivi Les études IRM aux jours 28 et 56 sont reconnues comme n'étant pas effectuées comme norme de soins car elles ne refléteraient pas de données cliniques significatives si les patients ne recevaient qu'un traitement standard. Les premières IRM de surveillance sont généralement obtenues environ 3 mois après la chirurgie ou d'autres interventions telles que la radiothérapie ou la chimiothérapie. Après ce traitement expérimental, cependant, nous prévoyons des réponses radiographiques beaucoup plus tôt, comme documenté dans l'essai humain antérieur. Dans l'essai précédent, des réponses radiographiques partielles ou complètes ont été documentées entre 2 et 27 semaines après le traitement. Nous interprétons ces réponses précoces comme le reflet d'une réponse biologique à médiation immunitaire.

Programme d'imagerie TEP de suivi Des examens TEP sont programmés à la discrétion de l'investigateur pour confirmer la progression de la maladie.

Le retraitement des sujets sera envisagé pour un sous-groupe prévu de sujets participant initialement à ce protocole qui ont démontré des réponses immunocompétentes associées à des améliorations cliniques et radiographiques objectives après la vaccination d'induction. Plus précisément, si les évaluations en série du nombre de cellules T et des cytokines inflammatoires associées, l'interféron, les cytokines sensibles à l'INF CXCL9, CXCL10 et l'interleukine 6 sont significativement élevées et associées à une amélioration clinique et radiographique.

Les sujets entrant dans la phase de retraitement du protocole suivront le même plan de traitement à l'exception de la leucophérèse plasmatique préopératoire. La leucophérèse plasmatique précédemment collectée sera utilisée.