Pilot immunterapiforsøg for tilbagevendende maligne gliomer

Dette forsøg vil være en tilpasning og fortsættelse af et tidligere offentliggjort forsøg, der reproducerer den oprindelige undersøgelsesstørrelse på 12 patienter. Ændringer fra det tidligere forsøg omfatter en modificeret oligodeoxynukleotidsekvens og behandling ved indledende diagnose, som ville forekomme med samtidig standardbehandling i et yderligere fase 1-forsøg som en fortsættelse, hvis der ikke er noteret hastighedsbegrænsende toksicitet i den oprindelige fase 1-arm. Af praktiske årsager er et standard fase 1 dosis-eskaleringsstudie ikke muligt med det nuværende paradigme. Selvom vi muligvis har identificeret et særskilt bioaktivt biprodukt af IGF-1R/AS ODN-induceret tumorcelleapoptose (exosomer), er det vanskeligt at udføre en dosiseskalering på en typisk måde. Antigenkoncentrationen kan også påvirke immunrespons på en bifasisk måde: for lidt eller for meget kan dæmpe en immunrespons, så selvom antigenet eller antigenerne var kendt, ville en typisk farmakologisk dosiseskalering ikke følge typisk farmakokinetik. Af disse grunde har vi designet en opfølgende fase 1-arm, hvor 32 patienter vil have behandling ved den indledende operation i 4 kohorter af hver 8 patienter. Vi vil variere kammernummer og implantationsvarighed for hver af de fire kohorter i den ekstra fase 1-arm. Da vi dokumenterede en stigning i tumorinfiltrerende lymfocytter efter behandling i vores oprindelige forsøg, gav denne observation et foreløbigt understøttende bevis på, at denne terapeutiske vaccine vil fremkalde et adaptivt immunrespons. Vi har designet fase 1-armen til yderligere at belyse et immunrespons med en kvantitativ vurdering af tumorspecifikke T-celler samt cirkulerende M2-makrofager før og efter behandling. Udformningen af ​​fase 1-fasen af ​​forsøget vil tillade en statistisk analyse af både antigendosis (antal kamre) og eksponeringstid (kammeropholdstid), da hver variabel kan relatere til enhver toksicitet eller behandlingsrespons.

Et resumé af behandlingsparadigmet omfatter: Præoperativ plasmaleukoferese, derefter kirurgi med vævsindsamling og implantation af op til 10 kamre i rectusskeden med IGF-1R/AS ODN som tidligere rapporteret inden for 24 timer efter kraniotomi plus et kammer, der kun indeholder fosfatbufret saltvand. Tolv patienter behandlet for tilbagevendende sygdom vil blive vurderet for sikkerheden ved behandlingen. Hvis sikkerhedsprofilen er acceptabel, vil forsøget blive fulgt af akkumulering af 32 patienter i et yderligere fase 1 forsøg som en fortsættelse over ca. 3 år prospektivt fra Thomas Jefferson University Hospital og Jefferson Hospital for Neuroscience. Alle patienter, der opfylder berettigelseskriterierne og accepterer at deltage i denne undersøgelse, vil være potentielle kandidater til terapi.

Præ-operativ forberedelse - Patienterne vil give samtykke til en plasmaleukoferese mindst 3 dage før elektiv kraniotomi. PBMC'en vil blive opbevaret til efterfølgende analyse af T-celle-responser, tilstedeværelsen af ​​IL-10-producerende M2-makrofager og dendritiske celle (DC) præparation. ELISPOT-assays vil blive udført for at måle T-celleresponser på autologe tumorceller og allogene tumorceller (U118-tumorlysat) ved at anvende krydsprimet DC til at vurdere både native anti-gliom-immunitet enhver erhvervet immunitet efter behandling. Hvis U118 allogene gliomceller fremkalder et CTL-respons, kan denne cellelinje tjene som en antigenkilde for fremtidige serielle vaccinationsprotokoller.

En præoperativ PET-scanning som baseline, som vi kan sammenligne PET-scanninger efter behandling med som angivet.

Kirurgi og tumorcellehentning - Kraniotomi og MRI-baseret billedstyret tumorresektion vil blive udført på alle undersøgelsespatienter af en erfaren neurokirurg. Alle testede maligne gliomer opnået fra kraniotomier udført på Thomas Jefferson University har udtrykt IGF-1R (M. Resnicoff, personlig kommunikation). Under resektion vil levedygtigt tumorvæv blive bekræftet ved patologisk undersøgelse af frosne snit og derefter sendt til en BL-2-facilitet til disaggregering og udpladning i kultur. Permanent sektionsanalyse vil omfatte en IGF-1R immunfarvning for at bestemme tilstedeværelsen af ​​IGF-1R. Når cellerne er vedhæftet, vil celler straks blive behandlet med IGF-1R/AS ODN. Tumorceller vil blive inkuberet med IGF-1R/AS ODN i maksimalt 6 timer, og 106 celler vil derefter blive indlæst i hvert kammer, og et mål maksimum på 10 kamre forberedes. For alle kombinationslotproduktioner vil yderligere to bestrålede kamre og 300 ul behandlede autologe tumorceller blive sendt til mikrobiologi for vurdering af sterilitet i henhold til FDA-krav. Mere end 5 og mindre end 10 kamre vil blive bedømt som en mindre protokolovertrædelse. Gendannelse af ingen levedygtige celler vil være grund til udmeldelse fra protokollen. Før implantation vil kamrene blive bestrålet med 5 Gy røntgenbestråling som tidligere beskrevet. En yderligere tumorprøve vil blive flash-frosset til udforskende forskningsmål. På tidspunktet for kraniotomi vil kirurgen skabe et abdominalt acceptorsted for efterfølgende diffusionskammerimplantation i rectusskeden. Dette implantationssted blev valgt af følgende årsager: (1) det gav objektive gunstige biologiske responser i det tidligere humane fase 1-forsøg; (2) dette sted vil nemt kunne rumme multiple kammerimplantationer; (3) dette sted bør fremkalde en stærk værtsreaktion på grund af sårets udstrækning, indføringen af ​​et fremmedlegeme og dets indhold, vaskulaturen af ​​rectusskeden og musklen, og den gunstige inguinal node lymfedrænage fra dette sted; og (4) eksponering af rectusskeden og musklen er velkendt for neurokirurger, som alle almindeligvis udfører ventrikulære-peritoneale shunts.

Biodiffusionskammerimplantation/-eksplantation - Autolog tumorcellepræparation, indkapsling i biodiffusionskamrene, bestråling og kammerimplantation/-eksplantation er alle procedurer, der er beskrevet i standardbetjeningsvejledningen for IND #14379 (SOP 001). Kort fortalt, ved sengekanten på intensivafdelingen sederes patienten med intravenøs midazolam (Versed, 0,05 mg/kg gentaget hvert 2. - 3. minut til tilstrækkelig sedation op til en maksimal dosis på 0,2 mg/kg) og og Fentanyl (Sublimaze, 5 mg som kan gentages hvert 5. minut til en maksimal dosis på 20 mg), og såret infiltreres med op til 30 cc 0,5 % bupivicain. Med passende lokalbedøvelse og sedation genåbnes det sår, der er klargjort ved operationen gennem rectusskeden, og op til 10 kamre implanteres mellem rectusskeden og rectusmusklen. Skeden approksimeres derefter igen med 2-0 vicryl suturer, og huden gentilnærmes med 3-0 nylon suturer. 24 timers implantationsperioden blev valgt baseret på den gunstige sikkerhedsprofil og lovende biologiske reaktioner noteret i den tidligere humane fase 1 forsøg. Eksplantation involverer den samme proces den følgende dag med kammereksplantation og en firelags sårlukning.

Opfølgningsplan for MR-billeddannelse MR-undersøgelserne på dag 28 og 56 er anerkendt som værende ikke udført som standardbehandling, fordi de ikke ville afspejle meningsfulde kliniske data, hvis patienterne kun modtog standardbehandling. De første overvågnings-MRI'er opnås normalt omkring 3 måneder efter operation eller andre indgreb såsom stråling eller kemoterapi. Efter denne eksperimentelle behandling forventer vi imidlertid radiografiske reaktioner meget tidligere som dokumenteret i det tidligere menneskelige forsøg. I det tidligere forsøg blev delvise eller fuldstændige radiografiske responser dokumenteret alt fra 2 til 27 uger efter behandlingen. Vi fortolker disse tidlige responser til at være en afspejling af et immunmedieret biologisk respons.

Opfølgende PET-billeddannelsesplan PET-scanninger planlægges efter investigatorens skøn for at bekræfte sygdomsprogression.

Genbehandling af forsøgspersoner vil blive overvejet for en forventet undergruppe af forsøgspersoner, der oprindeligt deltager i denne protokol, og som har demonstreret immunkompetente responser forbundet med objektive kliniske og radiografiske forbedringer efter induktionsvaccination. Specifikt, hvis serielle vurderinger af T-celleantal og associerede inflammatoriske cytokiner, interferon, er de INF-responsive cytokiner CXCL9, CXCL10 og interleukin 6 signifikant forhøjede og forbundet med klinisk og radiografisk forbedring.

Forsøgspersoner, der går ind i genbehandlingsfasen af ​​protokollen, vil følge den samme behandlingsplan med undtagelse af præoperativ plasmaleukoferese. Plasma leukoferese tidligere opsamlet vil blive anvendt.