Pilotti-immunoterapiatutkimus uusiutuvien pahanlaatuisten glioomien varalta

Tämä tutkimus on sovitus ja jatko aiemmin julkaistulle tutkimukselle, joka toistaa alkuperäisen 12 potilaan tutkimuksen koon. Edellisessä tutkimuksessa tehtyjä muutoksia ovat muunnettu oligodeoksinukleotidisekvenssi ja hoito alkudiagnoosissa, mikä tapahtuisi samanaikaisella standardihoidolla lisävaiheen 1 tutkimuksessa jatkona, jos nopeutta rajoittavaa toksisuutta ei havaita alkuperäisessä faasin 1 haarassa. Käytännön syistä standardi vaiheen 1 annos-eskalaatiotutkimus ei ole mahdollista nykyisellä paradigmalla. Vaikka olemme saaneet tunnistaa erillisen bioaktiivisen sivutuotteen IGF-1R/AS ODN:n aiheuttamasta kasvainsoluapoptoosista (eksosomit), on vaikea suorittaa annoksen nostamista tyypillisellä tavalla. Myös antigeenikonsentraatio voi vaikuttaa immuunivasteeseen kaksivaiheisella tavalla: liian vähän tai liian paljon voi vaimentaa immuunivastetta, joten vaikka antigeeni tai antigeenit olisi tiedossa, tyypillinen farmakologinen annoksen nostaminen ei noudattaisi tyypillistä farmakokinetiikkaa. Näistä syistä olemme suunnitelleet jatkohoidon vaiheen 1 ryhmän, jossa 32 potilasta saa hoitoa ensimmäisessä leikkauksessa neljässä 8 potilaan kohortissa. Vaihtelemme kammion lukumäärää ja implantaation kestoa jokaiselle neljästä kohortista vaiheen 1 lisähaarassa. Kun dokumentoimme kasvaimeen tunkeutuvien lymfosyyttien lisääntymisen hoidon jälkeen alkuperäisessä tutkimuksessamme, tämä havainto tarjosi alustavan todisteen siitä, että tämä terapeuttinen rokote saa aikaan adaptiivisen immuunivasteen. Olemme suunnitelleet Faasi 1 -varren selventämään immuunivastetta edelleen kvantitatiivisella arvioinnilla kasvainspesifisiä T-soluja sekä kiertäviä M2-makrofageja ennen hoitoa ja sen jälkeen. Kokeen 1. vaiheen suunnittelu mahdollistaa sekä antigeeniannoksen (kammioiden lukumäärän) että altistusajan (kammioviipymisajan) tilastollisen analyysin, koska kumpi tahansa muuttuja voi liittyä mihin tahansa toksisuuteen tai hoitovasteeseen.

Hoitoparadigman yhteenveto sisältää: Leikkausta edeltävä plasmaleukofereesi, sitten leikkaus, jossa kudoskeräys ja jopa 10 kammion istuttaminen peräsuolen vaippaan IGF-1R/AS ODN:llä, kuten aiemmin on raportoitu 24 tunnin sisällä kraniotomiasta sekä yksi kammio, joka sisältää vain fosfaattipuskuroitua suolaliuosta. Kahdestatoista toistuvan sairauden vuoksi hoidetusta potilaasta arvioidaan hoidon turvallisuus. Jos turvallisuusprofiili on hyväksyttävä, koetta seuraa 32 potilaan kertymä vaiheen 1 lisätutkimuksessa, joka jatkuu noin 3 vuoden ajan Thomas Jefferson University Hospitalista ja Jefferson Hospital for Neurosciencesta. Kaikki potilaat, jotka täyttävät kelpoisuusvaatimukset ja suostuvat osallistumaan tähän tutkimukseen, ovat mahdollisia ehdokkaita hoitoon.

Leikkausta edeltävä valmistelu – Potilaat suostuvat plasmaleukofereesiin vähintään 3 päivää ennen elektiivistä kraniotomiaa. PBMC säilytetään T-soluvasteiden myöhempää analyysiä, IL-10:tä tuottavien M2-makrofagien läsnäoloa ja dendriittisolujen (DC) valmistusta varten. ELISPOT-määritykset suoritetaan T-soluvasteiden mittaamiseksi autologisille kasvainsoluille ja allogeenisille kasvainsoluille (U118-kasvainlysaatti) käyttämällä ristiin pohjustettua DC:tä molempien natiivin glioomavastaisen immuniteetin arvioimiseksi, mikä tahansa hankittu immuniteetti hoidon jälkeen. Jos U118-allogeeniset glioomasolut saavat aikaan CTL-vasteen, tämä solulinja voi toimia antigeenilähteenä tuleville sarjarokotusprotokolleille.

Leikkausta edeltävä PET-skannaus lähtökohtana, johon voimme verrata hoidon jälkeisiä PET-skannauksia osoitetulla tavalla.

Leikkaus ja kasvainsolujen haku - Kokenut neurokirurgi suorittaa kraniotomia ja MRI-pohjainen kuvaohjattu tuumorin resektio kaikille tutkimuspotilaille. Kaikki testatut pahanlaatuiset glioomat, jotka on saatu Thomas Jeffersonin yliopistossa tehdyistä kraniotomiasta, ovat ilmentäneet IGF-1R:ää (M. Resnicoff, henkilökohtainen viestintä). Resektion aikana elinkelpoinen kasvainkudos varmistetaan pakasteleikkeiden patologisella tutkimuksella ja lähetetään sitten BL-2-laitokseen hajottamista ja maljaamista varten. Pysyvä leikkausanalyysi sisältää IGF-1R-immunovärjäyksen IGF-1R:n läsnäolon määrittämiseksi. Kun solut on kiinnitetty, solut käsitellään välittömästi IGF-1R/AS ODN:llä. Kasvainsoluja inkuboidaan IGF-1R/AS ODN:n kanssa enintään 6 tuntia ja sitten 106 solua ladataan kuhunkin kammioon ja valmistetaan enintään 10 kammiota. Kaikkien yhdistelmäerien tuotantojen osalta kaksi ylimääräistä säteilytettyä kammiota ja 300 ul käsiteltyjä autologisia kasvainsoluja lähetetään mikrobiologiaan steriiliyden arvioimiseksi FDA:n vaatimusten mukaisesti. Yli 5 ja alle 10 kammiota pisteytetään vähäisenä protokollarikkomuksena. Elävien solujen elpyminen on syy protokollasta poistamiselle. Ennen istutusta kammiot säteilytetään 5 Gy:llä röntgensäteilyllä, kuten aiemmin on kuvattu. Ylimääräinen kasvainnäyte pikapakastetaan tutkivaa tutkimusta varten. Kraniotomian aikana kirurgi luo vatsan akseptorikohdan myöhempää diffuusiokammion implantointia varten peräsuolen vaippaan. Tämä implantaatiokohta valittiin seuraavista syistä: (1) se tuotti objektiivisia edullisia biologisia vasteita aikaisemmassa ihmisvaiheen 1 kokeessa; (2) tälle paikalle mahtuu helposti useiden kammioiden implantaatiot; (3) tämän kohdan tulisi saada aikaan voimakas isäntäreaktio haavan laajuuden, vieraan kappaleen ja sen sisällön johdosta, peräsuolen tupen ja lihaksen verisuoniston sekä nivussolmukkeen suotuisan imusolmukkeen imusolmukkeen poistumisen vuoksi; ja (4) peräsuolen tupen ja lihaksen altistaminen on tuttua neurokirurgeille, jotka kaikki tekevät tavallisesti kammio-vatsakalvon shuntteja.

Biodiffuusiokammion istutus/eksplantaatio – Autologisten kasvainsolujen valmistus, kapselointi biodiffuusiokammioihin, säteilytys ja kammion implantointi/eksplantaatio ovat kaikki toimenpiteitä, jotka on kuvattu IND #14379:n (SOP 001) standardikäyttöohjeissa. Lyhyesti sanottuna, tehohoitoyksikön sängyn vieressä potilas rauhoitetaan suonensisäisellä midatsolaamilla (Versed, 0,05 mg/kg toistetaan 2–3 minuutin välein riittävän sedaatioon 0,2 mg/kg:n enimmäisannokseen asti) ja fentanyylillä (Sublimaze, 5 mg) joka voidaan toistaa 5 minuutin välein maksimiannokseen 20 mg) ja haavaan infiltroitua enintään 30 cm3 0,5 % bupivicaiinia. Asianmukaisella paikallispuudutuksella ja sedaatiolla leikkausvaiheessa valmistettu haava avataan uudelleen peräsuolen tupen kautta ja jopa 10 kammiota istutetaan peräsuolen tupen ja suoralihaksen väliin. Sen jälkeen vaippa likimääräistetään uudelleen 2-0 vikryyliompeleella ja iho 3-0 nailonompeleella. 24 tunnin implantaatiojakso valittiin edellisessä ihmisvaiheessa havaittujen suotuisan turvallisuusprofiilin ja lupaavien biologisten vasteiden perusteella. 1 kokeilu. Eksplantaatio sisältää saman prosessin seuraavana päivänä kammion eksplantaatiolla ja nelikerroksisella haavasulkemisella.

Seuranta MRI-kuvausaikataulu MRI-tutkimuksia päivinä 28 ja 56 ei ole tehty tavanomaisena hoitona, koska ne eivät heijastaisi merkityksellistä kliinistä tietoa, jos potilaat saisivat vain tavanomaista hoitoa. Ensimmäiset magneettikuvaukset otetaan yleensä noin 3 kuukautta leikkauksen tai muiden toimenpiteiden, kuten säteilyn tai kemoterapian, jälkeen. Tämän kokeellisen hoidon jälkeen odotamme kuitenkin radiografisia vasteita paljon aikaisemmin, kuten aikaisemmassa ihmistutkimuksessa dokumentoitiin. Aiemmassa tutkimuksessa osittaiset tai täydelliset radiografiset vasteet dokumentoitiin missä tahansa 2–27 viikon kuluttua hoidon aloittamisesta. Me tulkitsemme nämä varhaiset vasteet heijastukseksi immuunivälitteisestä biologisesta vasteesta.

PET-kuvauksen seurantaohjelma PET-skannaukset ajoitetaan tutkijan harkinnan mukaan taudin etenemisen varmistamiseksi.

Potilaiden uudelleenhoitoa harkitaan odotettavissa olevalle alaryhmälle koehenkilöitä, jotka alun perin osallistuivat tähän protokollaan, ja jotka ovat osoittaneet immunokompetentteja vasteita, jotka liittyvät objektiivisiin kliinisiin ja radiografisiin parannuksiin induktiorokotuksen jälkeen. Erityisesti, jos T-solujen lukumäärän ja niihin liittyvien tulehdussytokiinien, interferonin, INF-responsiivisten sytokiinien CXCL9, CXCL10 ja interleukiini 6 sarjaarvioinnit ovat merkittävästi lisääntyneet ja liittyvät kliiniseen ja radiografiseen parantumiseen.

Protokollan uusintahoitovaiheeseen tulevat koehenkilöt noudattavat samaa hoitosuunnitelmaa, lukuun ottamatta leikkausta edeltävää plasmaleukofereesia. Aiemmin kerättyä plasmaleukofereesiä käytetään hyväksi.