Traitement de la parodontite agressive avec thérapie photodynamique antimicrobienne d'appoint répétée

Thérapie parodontale non chirurgicale

Sept jours avant le traitement parodontal non chirurgical, des radiographies périapicales seront prises de toute la bouche de tous les patients. Ils seront placés dans un programme d'hygiène bucco-dentaire (OHP) en fonction de leurs besoins spécifiques. Dans ce programme, les patients recevront des instructions sur un contrôle efficace de la plaque dentaire, y compris des informations sur la technique Bass (Bass, 1954) et le nettoyage interproximal avec du fil dentaire et des brossettes interdentaires. Ils seront également motivés à brosser la surface dorsale de la langue une fois par jour et recevront un dentifrice qui sera utilisé tout au long de la période expérimentale (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brazil's Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brésil). Après l'OHP, les sujets subiront l'évaluation des paramètres parodontaux cliniques précédemment décrits et la collecte de la plaque sous-gingivale et du GCF dans des sites sélectionnés (baseline) sera effectuée. Prochainement, les patients recevront un détartrage supragingival et un polissage coronal avec cupule prophylactique sur toutes les dents présentes dans la cavité buccale. La thérapie parodontale non chirurgicale débutera 7 jours après l'OHP et le détartrage supragingival initial. Dans les 24 heures, un spécialiste en parodontie effectuera un détartrage supra et sous-gingival et un surfaçage radiculaire de toutes les dents présentant une atteinte parodontale, à l'aide d'instruments manuels (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) et à ultrasons. L'instrumentation sera effectuée sur chaque quadrant jusqu'à la réalisation d'un nettoyage et d'un surfaçage radiculaire adéquats, qui seront vérifiés avec un explorateur dentaire. Les personnes recevront une prophylaxie professionnelle toutes les deux semaines pendant trois mois après la fin de la thérapie parodontale non chirurgicale. Lors des visites de suivi toutes les deux semaines, la coopération du patient sera surveillée en vérifiant l'état de l'hygiène buccale.

Thérapie photodynamique antimicrobienne

Après un détartrage complet de la bouche et un surfaçage radiculaire (SRP), les poches parodontales des dents sélectionnées pour recevoir une thérapie photodynamique antimicrobienne (aPDT) seront irriguées avec de l'eau distillée. Peu de temps après, le colorant sera appliqué (chlorhydrate de phénothiazine - 10 mg/mL) à partir du fond de la poche. Après 1 minute, une irrigation sera effectuée avec de l'eau distillée pour éliminer l'excès de colorant. La zone colorée sera irradiée avec une diode laser (660 nm et 60 mW/cm²). Six sites par dent sous traitement seront irradiés (10 secondes/site). Les applications d'aPDT seront répétées de la même manière jusqu'à la deuxième semaine (jours : 2, 7, 14). Avant l'application, la plaque supragingivale sera enlevée.

Chaque patient sera impressionné avec de l'alginate afin d'obtenir des modèles d'arcades dentaires et d'élaborer une plaque guide en acétate. Cette plaque présentera des rainures qui serviront de références pour standardiser l'insertion et l'inclinaison de la sonde parodontale automatisée (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, USA). L'indice de plaque visible pour chaque patient, noté de manière dichotomique (O'Leary et al. 1972), sera déterminé par le pourcentage de surfaces dentaires présentant des dépôts de plaque colorés avec la solution révélatrice.

Surveillance clinique

Les paramètres cliniques parodontaux suivants seront évalués sur 6 sites de chaque dent (mésio-buccal, buccal, disto-buccal, mésio-lingual, lingual et disto-lingual) : (i) profondeur de la poche de sondage (PPD) : elle sera mesurée du bord gingival au fond de la poche ; (ii) récession gingivale (RG) : elle sera mesurée de la jonction émail-ciment au fond de la poche ; (iii) niveau d'attache clinique (CAL) : il sera mesuré en PPD + GR (GR sera égal à 0 chaque fois que la jonction cémentémail est couverte) ; (iv) saignement au sondage (BOP) : il sera évalué de manière dichotomique : la présence du saignement sera considérée comme positive lorsqu'il se produit dans les 30 secondes suivant l'insertion de la sonde pour la profondeur de sondage ; (v) Indice de plaque (IP) : il sera évalué de manière dichotomique. BOP, PPD, CAL et GR seront mesurés sur six sites par dent (mésio-buccal, buccal, disto-buccal, disto-lingual, lingual et mésio-lingual). Toutes les mesures de sondage seront effectuées à l'aide d'une sonde parodontale automatisée.

Les paramètres parodontaux cliniques et l'indice de plaque de chaque patient seront enregistrés au départ (pré-intervention), ainsi que +30 et +90 jours après la thérapie parodontale non chirurgicale. L'indice Kappa sera utilisé pour évaluer l'étalonnage de l'examinateur sur la collecte des paramètres cliniques parodontaux afin de calculer l'accord intra-examinateur. Selon les critères de diagnostic de l'Organisation mondiale de la santé (OMS), l'indice de concordance Kappa acceptable doit être supérieur ou égal à 0,85 (OMS, 1997). Ce niveau d'accord sera utilisé pour l'étalonnage de l'examinateur dans ce projet. Dix patients, chacun présentant au moins deux paires de dents à racine unique controlatérale avec PD ≥ 5 mm sur les sites interproximaux, seront sélectionnés pour calibrer l'examinateur. Chaque patient sera évalué à deux reprises à 48 heures d'intervalle afin d'obtenir la fiabilité intra-examinateur grâce à l'indice Kappa.

Surveillance immunologique

Au départ et +14 et +30 et +90 jours après la thérapie parodontale non chirurgicale, des échantillons de GCF seront obtenus à partir de huit sites interproximaux de chaque patient. La plaque supragingivale des dents sélectionnées sera enlevée et les sites seront soigneusement séchés avec des jets d'air, puis isolés avec des rouleaux de coton stériles. Des échantillons de GCF seront obtenus avec des bandes de papiers (Periopaper® -Oralflow Inc., Amityville, NY, USA). Les bandes de papiers seront délicatement insérées dans l'orifice de la poche parodontale en restant 30 secondes sous la gencive. La quantité de GCF absorbée sera déterminée par un mesureur électronique de masse humide (Periotron® -Oralflow Inc., Amityville, NY, USA). Les échantillons seront placés dans des tubes Eppendorf stériles stockés à - 80°C pour la quantification des cytokines (IL-1β, IL-10 et TNF-a) (pg/μl) au Laboratoire Genese (Genese Produtos Diagnosticos LTDA, Sao Paulo, SP, Brésil ). Les niveaux de cytokines seront déterminés à l'aide d'un kit Millipore à trois composants (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) et du système Luminex 100TM (Luminex, MiraiBio, Alameda, CA, USA).

Surveillance microbiologique

Au départ et +30 et +90 jours après la thérapie parodontale non chirurgicale, des échantillons de plaque sous-gingivale seront obtenus à partir de huit sites interproximaux de chaque patient. Les échantillons seront analysés individuellement pour leur teneur en 40 espèces bactériennes sous-gingivales en utilisant la technique d'hybridation ADN-ADN en damier (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). Les dents sélectionnées seront isolées avec des rouleaux de coton stériles et séchées avec des jets d'air. Ensuite, la plaque supragingivale sera soigneusement retirée à l'aide d'une curette stérile. Une autre curette stérile servira à prélever la plaque sous-gingivale, en partant du fond de la poche parodontale jusqu'à sa partie coronaire. Les échantillons seront stockés dans des tubes Eppendorf stérilisés et seront traités au Laboratoire de Microbiologie de l'Université de Guarulhos (UNG, Guarulhos, SP, Brésil).

analyses statistiques

La normalité et l'homoscédasticité des données obtenues seront vérifiées. Les comparaisons au sein des groupes et entre les groupes à différents intervalles de temps seront effectuées au moyen de tests paramétriques ou non paramétriques appropriés. Le seuil de signification sera fixé à 5 % dans tous les tests. Tous les calculs seront effectués par le logiciel SPSS (SPSS, Chicago IL, USA).