Behandeling van agressieve parodontitis met herhaalde aanvullende antimicrobiële fotodynamische therapie

Niet-chirurgische parodontale therapie

Zeven dagen voorafgaand aan de niet-chirurgische parodontale therapie worden periapicale röntgenfoto's gemaakt van de hele mond van alle patiënten. Ze zullen in een mondhygiëneprogramma (OHP) worden geplaatst op basis van hun specifieke behoeften. In dit programma worden patiënten geïnstrueerd over een effectieve zelf uitgevoerde plaquecontrole, inclusief informatie over de Bass-techniek (Bass, 1954) en interproximale reiniging met flosdraad en interdentale ragers. Ze zullen ook worden gemotiveerd om eenmaal per dag het dorsale oppervlak van de tong te poetsen en zullen een tandpasta krijgen die gedurende de hele experimentele periode zal worden gebruikt (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Kolynos in Brazilië - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brazilië). Na de OHP ondergaan de proefpersonen de beoordeling van eerder beschreven klinische parodontale parameters en wordt subgingivale plaque en GCF op geselecteerde locaties (baseline) verzameld. Binnenkort krijgen patiënten supragingivale schilfering en coronale polijsting met profycup op alle tanden in de mondholte. De niet-chirurgische parodontale therapie start 7 dagen na de OHP en de initiële supragingivale schilfering. Binnen 24 uur voert een specialist in parodontologie supra- en subgingivale schalen en wortelplaning uit van alle tanden met parodontale betrokkenheid, met behulp van hand- (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, VS) en ultrasone instrumenten. De instrumentatie zal op elk kwadrant worden uitgevoerd totdat een adequate reiniging en wortelschaafing is bereikt, wat zal worden geverifieerd met een tandheelkundige ontdekkingsreiziger. Individuen krijgen tweewekelijks professionele profylaxe gedurende drie maanden na het einde van de niet-chirurgische parodontale therapie. Bij tweewekelijkse follow-upbezoeken wordt de medewerking van de patiënt gecontroleerd door de status van de mondhygiëne te verifiëren.

Antimicrobiële fotodynamische therapie

Na een full-mouth scaling en root planning (SRP), worden de parodontale pockets van tanden geselecteerd om antimicrobiële fotodynamische therapie (aPDT) te ontvangen, geïrrigeerd met gedestilleerd water. Kort daarna wordt de kleurstof (fenothiazine hydrochloride - 10 mg/ml) vanaf de onderkant van de zak aangebracht. Na 1 minuut wordt irrigatie uitgevoerd met gedestilleerd water om de overtollige kleurstof te verwijderen. Het bevlekte gebied wordt bestraald met een diodelaser (660 nm en 60 mW/cm²). Zes plaatsen per te behandelen tand worden bestraald (10 seconden/plaats). De toepassingen van aPDT worden op dezelfde manier herhaald tot de tweede week (dagen: 2, 7,14). Voor het aanbrengen wordt de supragingivale plaque verwijderd.

Elke patiënt zal onder de indruk zijn van alginaat om modellen van de tandbogen te verkrijgen en een geleideplaat van acetaat uit te werken. Deze plaat bevat groeven die zullen worden gebruikt als referenties om het inbrengen en kantelen van de geautomatiseerde parodontale sonde te standaardiseren (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, VS). De zichtbare plaque-index voor elke patiënt, dichotoom beoordeeld (O'Leary et al. 1972), wordt bepaald door het percentage tandoppervlakken met afzettingen van plaque gekleurd met onthullende oplossing.

Klinische monitoring

De volgende klinische parodontale parameters zullen worden beoordeeld op 6 plaatsen van elke tand (mesiobuccaal, buccaal, distobuccaal, mesiolinguaal, linguaal en distolinguaal): (i) sondeerpocketdiepte (PPD): deze wordt gemeten van de tandvleesrand tot de bodem van de pocket; (ii) tandvleesrecessie (GR): wordt gemeten vanaf de glazuurcementverbinding tot de bodem van de pocket; (iii) klinisch hechtingsniveau (CAL): dit wordt gemeten als PPD + GR (GR is gelijk aan 0 wanneer de cementglazuurverbinding bedekt is); (iv) bloeding bij sonderen (BOP): het zal dichotoom worden beoordeeld: de aanwezigheid van de bloeding wordt als positief beschouwd wanneer deze optreedt binnen 30 seconden na het inbrengen van de sonde voor de sondeerdiepte; (v) Plaque-index (PI): deze wordt dichotoom beoordeeld. BOP, PPD, CAL en GR worden gemeten op zes plaatsen per tand (mesio-buccaal, buccaal, disto-buccaal, disto-linguaal, linguaal en mesio-linguaal). Alle sondemetingen worden uitgevoerd met behulp van een geautomatiseerde parodontale sonde.

De klinische parodontale parameters en de plaque-index van elke patiënt worden geregistreerd bij aanvang (vóór de interventie), evenals +30 en +90 dagen na de niet-chirurgische parodontale therapie. De Kappa-index zal worden gebruikt om de kalibratie van de examinator op de verzameling van klinische parodontale parameters te evalueren om de overeenkomst tussen de examinator te berekenen. Volgens de criteria van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) voor diagnose moet de aanvaardbare Kappa-index van overeenstemming groter zijn dan of gelijk zijn aan 0,85 (WHO, 1997). Dit niveau van overeenstemming zal worden gebruikt voor de kalibratie van de examinator in dit project. Er zullen tien patiënten worden geselecteerd, elk met ten minste twee paar contralaterale enkelwortelige tanden met PD ≥ 5 mm op interproximale plaatsen, om de onderzoeker te kalibreren. Elke patiënt zal bij twee verschillende gelegenheden worden geëvalueerd met een tussenpoos van 48 uur om de intra-onderzoekerbetrouwbaarheid te verkrijgen door middel van de Kappa-index.

Immunologische monitoring

Bij baseline en +14 en +30 en +90 dagen na de niet-chirurgische parodontale therapie, zullen GCF-monsters worden verkregen van acht interproximale locaties van elke patiënt. De supragingivale plaque van geselecteerde tanden wordt verwijderd en de plaatsen worden zorgvuldig gedroogd met luchtstralen en vervolgens geïsoleerd met steriele wattenrollen. Monsters van GCF zullen worden verkregen met papieren stroken (Periopaper® - Oralflow Inc., Amityville, NY, VS). De paperstrips worden voorzichtig in de opening van de parodontale pocket gestoken en blijven 30 seconden subgingivaal. De hoeveelheid geabsorbeerde GCF zal worden bepaald door een elektronische meter van vochtige massa (Periotron® - Oralflow Inc., Amityville, NY, VS). Monsters worden in steriele Eppendorf-buisjes geplaatst die bij -80°C worden bewaard voor cytokines (IL-1β, IL-10 en TNF-a) kwantificering (pg/μl) bij Genese Laboratory (Genese Produtos Diagnosticos LTDA, Sao Paulo, SP, Brazilië ). Cytokineniveaus zullen worden bepaald met behulp van een drie-plex Millipore-kit (Millipore Corporation, Billerica, MA, VS) en het Luminex 100TM-systeem (Luminex, MiraiBio, Alameda, CA, VS).

Microbiologische monitoring

Bij aanvang en +30 en +90 dagen na de niet-chirurgische parodontale therapie zullen monsters van subgingivale plaque worden verkregen van acht interproximale plaatsen van elke patiënt. Monsters zullen individueel worden geanalyseerd op hun gehalte aan 40 subgingivale bacteriesoorten met behulp van de dambord-DNA-DNA-hybridisatietechniek (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). De geselecteerde tanden worden geïsoleerd met steriele wattenrollen en gedroogd met luchtstralen. Vervolgens wordt de supragingivale plaque voorzichtig verwijderd met een steriele curette. Een andere steriele curette zal worden gebruikt om de subgingivale plaque te verzamelen, beginnend vanaf de onderkant van de parodontale pocket tot aan het coronale gedeelte. De monsters worden opgeslagen in gesteriliseerde Eppendorf-buisjes en verwerkt in het Microbiologisch Laboratorium van de Guarulhos Universiteit (UNG, Guarulhos, SP, Brazilië).

statistische analyse

De normaliteit en homoscedasticiteit van de verkregen gegevens zullen worden gecontroleerd. Vergelijkingen binnen groepen en tussen groepen op verschillende tijdsintervallen zullen worden uitgevoerd door middel van parametrische of niet-parametrische geschikte tests. Het significantieniveau wordt bij alle toetsen op 5% gesteld. Alle berekeningen worden uitgevoerd door SPSS-software (SPSS, Chicago IL, VS).