反復補助的抗菌光線力学療法による進行性歯周炎の治療

非外科的歯周治療

非外科的歯周治療の 7 日前に、すべての患者の口全体から根尖 X 線写真を撮影します。 彼らは、特定のニーズに応じて口腔衛生プログラム（OHP）に設定されます。 このプログラムでは、バス テクニック (Bass、1954) およびデンタル フロスと歯間ブラシを使用した歯間クリーニングに関する情報を含む、効果的なセルフプラーク コントロールについて患者に説明します。 彼らはまた、1 日 1 回舌の背面を磨くように動機づけられ、実験期間中使用される歯磨剤を受け取ります (Colgate Total®、Anakol Ind. Com Ltda - ブラジルの Kolynos - Colgate Palmolive Co.、Sao Bernardo)カンポ、SP、ブラジル）。 OHP後、被験者は前述の臨床歯周パラメータの評価を受け、選択された部位（ベースライン）の歯肉縁下プラークとGCFの収集が行われます。 まもなく、患者は口腔内に存在するすべての歯に歯肉縁上スケーリングとプロフィーカップを使用した冠状研磨を受けます。 非外科的歯周治療は、OHP および最初の歯肉縁上スケーリングの 7 日後に開始されます。 24 時間以内に、歯周病学の専門家が手 (Gracey Curettes、Hu-Friedy、シカゴ、イリノイ州、米国) と超音波器具を使用して、歯周病のあるすべての歯の歯肉縁上および歯肉縁下のスケーリングとルート プレーニングを行います。 インスツルメンテーションは、適切なクリーニングとルートプレーニングが達成されるまで、各象限で実行されます。これは、歯科用エクスプローラーで検証されます。 個人は、非外科的歯周治療の終了後3か月間、隔週で専門的な予防を受けます。 隔週のフォローアップ訪問で、口腔衛生の状態を確認することにより、患者の協力が監視されます。

抗菌光線力学療法

フルマウススケーリングとルートプランニング（SRP）の後、抗菌光線力学療法（aPDT）を受けるために選択された歯の歯周ポケットは、蒸留水で洗浄されます。 その後すぐに、色素がポケットの底から適用されます (フェノチアジン塩酸塩 - 10mg/mL)。 1分後、蒸留水で洗浄して余分な色素を除去します。 染色された領域は、ダイオード レーザー (660 nm および 60 mW/cm²) で照射されます。 治療中の歯 1 本につき 6 箇所に照射します (1 箇所あたり 10 秒)。 aPDT の適用は、2 週目 (日: 2、7、14) まで同じ方法で繰り返されます。 適用前に、歯肉縁上のプラークが除去されます。

各患者は、歯列弓のモデルを取得し、アセテート製のガイド プレートを作成するために、アルギン酸塩で感銘を受けます。 このプレートは、自動化された歯周プローブ (フロリダ プローブ システム、フロリダ プローブ コーポレーション、フロリダ州ゲインズビル) の挿入と傾きを標準化するための基準として使用される溝を提示します。 二分法で評価された各患者の目に見えるプラーク指数 (O'Leary et al. 1972) は、開示溶液で染色されたプラークの堆積物を含む歯の表面のパーセンテージによって決定されます。

臨床モニタリング

次の臨床歯周パラメーターは、各歯の 6 つの部位 (近頬、頬、遠心頬、近舌、舌、離舌) で評価されます。 (i) ポケットの深さ (PPD) のプローブ: 測定されます。歯肉縁からポケットの底まで。 (ii) 歯肉退縮 (GR): エナメル接合部からポケットの底まで測定されます。 (iii) 臨床付着レベル (CAL): PPD + GR として測定されます (セメントテナメル接合部が覆われている場合、GR は常に 0 になります)。 (iv) プロービング時の出血 (BOP): 二分法で評価されます: プロービング深度のプローブの挿入から 30 秒以内に発生した場合、出血の存在は陽性と見なされます。 (v) プラーク指数 (PI): 二分法で評価されます。 BOP、PPD、CAL、および GR は、歯ごとに 6 つの部位 (メシオバッカル、バッカル、ディストバッカル、ディストリンガル、リンガル、およびメシオリンガル) で測定されます。 すべてのプロービング測定は、自動化された歯周プローブを使用して実行されます。

各患者の臨床歯周パラメータとプラーク指数は、ベースライン（介入前）、および非外科的歯周治療の+30日後と+90日後に記録されます。 カッパ指数は、検査者内の一致を計算するために、臨床歯周パラメータ収集に関する検査者のキャリブレーションを評価するために使用されます。 世界保健機関 (WHO) の診断基準によれば、一致の許容カッパ指数は 0.85 以上でなければなりません (WHO、1997 年)。 このレベルの一致は、このプロジェクトの試験官のキャリブレーションに使用されます。 10 人の患者が選択され、各患者は隣接部位で PD ≥ 5 mm の対側の単根歯を少なくとも 2 対示し、検査者を較正するために選択されます。 各患者は、カッパ指数を通じて検査者内の信頼性を得るために、48時間離れた2つの別々の機会に評価されます。

免疫学的モニタリング

非外科的歯周療法のベースラインおよび+14、+30、および+90日後に、各患者の8つの歯間部位からGCFサンプルを取得します。 選択した歯から歯肉縁上のプラークを除去し、その部位をエア ジェットで慎重に乾燥させ、続いて滅菌コットン ロールで分離します。 GCF のサンプルは、紙片 (Periopaper® -Oralflow Inc.、Amityville、NY、USA) で取得されます。 ペーパー ストリップは歯周ポケットの開口部にそっと挿入され、歯肉縁下に 30 秒間残ります。 吸収されたＧＣＦの量は、湿った質量の電子測定器（Ｐｅｒｉｏｔｒｏｎ（登録商標）−Ｏｒａｌｆｌｏｗ Ｉｎｃ．、Ａｍｉｔｙｖｉｌｌｅ、ＮＹ、ＵＳＡ）によって決定される。 サンプルは、Genese Laboratory (Genese Produtos Diagnosticos LTDA、サンパウロ、SP、ブラジル) でのサイトカイン (IL-1β、IL-10、および TNF-α) の定量化 (pg/μl) のために、-80°C で保存された滅菌エッペンドルフチューブに入れられます。 ）。 サイトカインレベルは、3 プレックス Millipore キット (Millipore Corporation、Billerica、MA、USA) および Luminex 100TM システム (Luminex、MiraiBio、Alameda、CA、USA) を使用して決定されます。

微生物学的モニタリング

非外科的歯周療法のベースラインおよび+30日後および+90日後に、歯肉縁下プラークのサンプルを各患者の8つの歯間部位から採取します。 サンプルは、市松模様の DNA-DNA ハイブリダイゼーション技術 (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b) を使用して、40 の歯肉縁下細菌種の含有量について個別に分析されます。 選択された歯は滅菌コットン ロールで分離され、エア ジェットで乾燥されます。 その後、滅菌キュレットを使用して歯肉縁上のプラークを慎重に取り除きます。 別の滅菌キュレットを使用して、歯周ポケットの底から冠状部分まで、歯肉縁下のプラークを収集します。 サンプルは滅菌エッペンドルフチューブに保存され、グアルーリョス大学の微生物学研究所 (UNG、グアルーリョス、SP、ブラジル) で処理されます。

統計分析

得られたデータの正規性と等分散性がチェックされます。 グループ内および異なる時間間隔でのグループ間の比較は、パラメトリックまたはノンパラメトリックの適切なテストを通じて実行されます。 有意水準は、すべてのテストで 5% に設定されます。 すべての計算は、SPSS ソフトウェア (SPSS、Chicago IL、USA) によって実行されます。