Behandling av aggressiv periodontitt med gjentatt tilleggs antimikrobiell fotodynamisk terapi

Ikke-kirurgisk periodontal terapi

Syv dager før den ikke-kirurgiske periodontale terapien vil det bli tatt periapikale røntgenbilder fra hele munnen til alle pasienter. De vil bli satt i et munnhygieneprogram (OHP) i henhold til deres spesifikke behov. I dette programmet vil pasienter bli instruert om en effektiv selvutført plakkkontroll, inkludert informasjon om Bass Technique (Bass, 1954) og interproksimal rengjøring med tanntråd og interdentale børster. De vil også bli motivert til å børste den dorsale overflaten av tungen en gang om dagen og vil motta et tannpleiemiddel som skal brukes gjennom hele forsøksperioden (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brasils Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brasil). Etter OHP vil forsøkspersonene gjennomgå vurdering av kliniske periodontale parametere tidligere beskrevet og innsamling av subgingival plakk og GCF på utvalgte steder (baseline) vil bli utført. Om kort tid vil pasienter få supragingival avskalling og koronal polering med prophy cup på alle tennene i munnhulen. Den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen vil starte 7 dager etter OHP og initial supragingival skalering. Innen 24 timer vil en spesialist i periodonti utføre supra og subgingival skalering og rotplaning av alle tenner med periodontal involvering, ved hjelp av hånd (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) og ultralydinstrumenter. Instrumenteringen vil bli utført på hver kvadrant inntil en tilstrekkelig rengjøring og rotplaning er oppnådd, som vil bli verifisert med en dental explorer. Enkeltpersoner vil motta profesjonell profylakse annenhver uke i løpet av tre måneder etter slutten av den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen. Ved oppfølgingsbesøk annenhver uke vil pasientens samarbeid overvåkes ved å verifisere status for munnhygiene.

Antimikrobiell fotodynamisk terapi

Etter en full-munn-skalering og rotplanlegging (SRP), vil periodontale lommer av tenner som er valgt for å motta antimikrobiell fotodynamisk terapi (aPDT) vannes med destillert vann. Kort tid etterpå påføres fargestoffet (fenotiazinhydroklorid-10 mg/ml) fra bunnen av lommen. Etter 1 minutt vil vanning utføres med destillert vann for å fjerne overskudd av fargestoff. Det fargede området vil bli bestrålt med en diodelaser (660 nm og en 60 mW/cm²). Seks steder per tann under behandling vil bli bestrålt (10 sekunder/sted). Applikasjonene av aPDT vil bli gjentatt på samme måte frem til den andre uken (dager: 2, 7,14). Før påføringen vil supragingival plakk fjernes.

Hver pasient vil bli imponert over alginat for å få modeller av tannbuene og utarbeide en styreplate laget av acetat. Denne platen vil presentere spor som vil bli brukt som referanser for å standardisere innsetting og tilt av den automatiserte periodontale proben (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, USA). Den synlige plakkindeksen for hver pasient, vurdert dikotomisk (O'Leary et al. 1972), vil bli bestemt av prosentandelen av tannoverflater med avleiringer av plakk farget med avslørende løsning.

Klinisk overvåking

Følgende kliniske periodontale parametere vil bli vurdert på 6 steder av hver tann (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual og disto-lingual): (i) sonderingslommedybde (PPD): den vil bli målt fra tannkjøttkanten til bunnen av lommen; (ii) gingival resesjon (GR): den vil bli målt fra emaljeringskrysset til bunnen av lommen; (iii) klinisk tilknytningsnivå (CAL): det vil bli målt som PPD + GR (GR vil være lik 0 når sementenamelkrysset er dekket); (iv) blødning ved sondering (BOP): det vil bli evaluert dikotomt: tilstedeværelsen av blødningen vil bli ansett som positiv når den oppstår innen 30 sekunder fra innsettingen av sonden for sonderingsdybde; (v) Plakkindeks (PI): den vil bli evaluert dikotomisk. BOP, PPD, CAL og GR vil bli målt på seks steder per tann (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, disto-lingual, lingual og mesio-lingual). Alle sonderingsmålinger vil bli utført ved hjelp av en automatisert periodontalsonde.

De kliniske periodontale parametrene og plakkindeksen til hver pasient vil bli registrert ved baseline (pre-intervensjon), samt +30 og +90 dager etter den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen. Kappa-indeksen vil bli brukt til å evaluere undersøkerens kalibrering på innsamling av kliniske periodontale parametere for å beregne intra-eksaminatoravtalen. I henhold til Verdens helseorganisasjons (WHO) kriterier for diagnose, må den akseptable Kappa-indeksen for enighet være større enn eller lik 0,85 (WHO, 1997). Dette samsvarsnivået vil bli brukt for kalibrering av sensor i dette prosjektet. Ti pasienter, som hver viser minst to par kontralaterale enkeltrotede tenner med PD ≥ 5 mm på interproksimale steder, vil bli valgt til å kalibrere undersøkeren. Hver pasient vil bli evaluert ved to separate anledninger med 48 timers mellomrom for å oppnå intra-undersøkerens pålitelighet gjennom Kappa-indeksen.

Immunologisk overvåking

Ved baseline og +14 og +30 og +90 dager etter den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen, vil GCF-prøver bli tatt fra åtte interproksimale steder for hver pasient. Den supragingivale plakk fra utvalgte tenner vil bli fjernet og stedene vil bli forsiktig tørket med luftstråler, og deretter isolert med sterile bomullsruller. Prøver av GCF vil bli oppnådd med papirstrimler (Periopaper® -Oralflow Inc., Amityville, NY, USA). Papirstrimlene føres forsiktig inn i åpningen av den periodontale lommen, gjenværende 30 sekunder subgingivalt. Mengden GCF som absorberes vil bli bestemt av en elektronisk måler for fuktig masse (Periotron® -Oralflow Inc., Amityville, NY, USA). Prøver vil bli plassert i sterile Eppendorf-rør lagret ved -80°C for cytokiner (IL-1β, IL-10 og TNF-a) kvantifisering (pg/μl) ved Genese Laboratory (Genese Produtos Diagnosticos LTDA, Sao Paulo, SP, Brasil ). Cytokinnivåer vil bli bestemt ved å bruke et tre-pleks Millipore-sett (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) og Luminex 100TM-systemet (Luminex, MiraiBio, Alameda, CA, USA).

Mikrobiologisk overvåking

Ved baseline og +30 og +90 dager etter den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen, vil prøver av subgingival plakk bli tatt fra åtte interproksimale steder for hver pasient. Prøver vil bli individuelt analysert for deres innhold av 40 subgingivale bakteriearter ved bruk av sjakkbrett DNA-DNA hybridiseringsteknikk (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). De valgte tennene vil bli isolert med sterile bomullsruller og tørket med luftstråler. Deretter vil supragingival plakk fjernes forsiktig med en steril kyrett. En annen steril kyrett vil bli brukt til å samle den subgingivale plakk, fra bunnen av periodontallommen til dens koronale del. Prøvene vil bli lagret i steriliserte Eppendorf-rør og vil bli behandlet ved Microbiology Laboratory ved Guarulhos University (UNG, Guarulhos, SP, Brasil).

Statistisk analyse

Normaliteten og homoskedastisiteten til de innhentede dataene vil bli kontrollert. Sammenligninger innen grupper og mellom grupper ved forskjellige tidsintervaller vil bli utført gjennom parametriske eller ikke-parametriske passende tester. Signifikansnivået vil bli satt til 5 % i alle tester. Alle beregninger vil bli utført av SPSS programvare (SPSS, Chicago IL, USA).