Behandlung der aggressiven Parodontitis mit wiederholter adjunktiver antimikrobieller photodynamischer Therapie

Nicht-chirurgische Parodontaltherapie

Sieben Tage vor der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie werden periapikale Röntgenaufnahmen vom gesamten Mund aller Patienten gemacht. Sie werden entsprechend ihren spezifischen Bedürfnissen in ein Mundhygieneprogramm (OHP) eingestellt. In diesem Programm werden die Patienten über eine effektive, selbst durchgeführte Plaquekontrolle unterwiesen, einschließlich Informationen über die Bass-Technik (Bass, 1954) und die Reinigung der Zahnzwischenräume mit Zahnseide und Interdentalbürsten. Sie werden außerdem motiviert, einmal täglich die dorsale Oberfläche der Zunge zu putzen, und erhalten eine Zahnpasta, die während des gesamten Versuchszeitraums verwendet werden soll (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brazil's Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brasilien). Nach der OHP werden die Probanden der Bewertung der zuvor beschriebenen klinischen parodontalen Parameter unterzogen und die Sammlung von subgingivaler Plaque und GCF an ausgewählten Stellen (Basislinie) wird durchgeführt. In Kürze erhalten die Patienten ein supragingivales Scaling und eine koronale Politur mit Prophy-Cup auf allen in der Mundhöhle vorhandenen Zähnen. Die nicht-chirurgische Parodontaltherapie beginnt 7 Tage nach der OHP und dem initialen supragingivalen Scaling. Innerhalb von 24 Stunden führt ein Spezialist für Parodontologie ein supra- und subgingivales Scaling und eine Wurzelglättung aller Zähne mit parodontaler Beteiligung mit Hand- (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) und Ultraschallinstrumenten durch. Die Instrumentierung wird an jedem Quadranten durchgeführt, bis eine adäquate Reinigung und Wurzelglättung erreicht ist, die mit einem Dental Explorer überprüft wird. Einzelpersonen erhalten zweiwöchentlich eine professionelle Prophylaxe während drei Monaten nach Ende der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie. Bei zweiwöchentlichen Kontrollbesuchen wird die Mitarbeit des Patienten überwacht, indem der Status der Mundhygiene überprüft wird.

Antimikrobielle photodynamische Therapie

Nach einer vollständigen Zahnsteinentfernung und Wurzelplanung (SRP) werden die Parodontaltaschen der Zähne, die für die antimikrobielle photodynamische Therapie (aPDT) ausgewählt wurden, mit destilliertem Wasser gespült. Kurz danach wird der Farbstoff (Phenothiazinhydrochlorid – 10 mg/ml) vom Boden der Tasche aufgetragen. Nach 1 Minute wird mit destilliertem Wasser gespült, um den Farbstoffüberschuss zu entfernen. Der gefärbte Bereich wird mit einem Diodenlaser (660 nm und 60 mW/cm²) bestrahlt. Sechs Stellen pro behandeltem Zahn werden bestrahlt (10 Sekunden/Stelle). Die Anwendungen der aPDT werden bis zur zweiten Woche (Tage: 2, 7, 14) in gleicher Weise wiederholt. Vor der Anwendung wird die supragingivale Plaque entfernt.

Jeder Patient wird mit Alginat abgeformt, um Modelle der Zahnbögen zu erhalten und eine Führungsplatte aus Acetat anzufertigen. Diese Platte wird Rillen aufweisen, die als Referenzen verwendet werden, um das Einführen und Neigen der automatisierten Parodontalsonde (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, USA) zu standardisieren. Der sichtbare Plaqueindex für jeden Patienten, dichotom bewertet (O'Leary et al. 1972), wird durch den Prozentsatz der Zahnoberflächen mit Plaqueablagerungen bestimmt, die mit der Nachweislösung angefärbt wurden.

Klinische Überwachung

Die folgenden klinischen parodontalen Parameter werden an 6 Stellen jedes Zahns beurteilt (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual und disto-lingual): (i) Sondierungstaschentiefe (PPD): Sie wird gemessen vom Zahnfleischsaum bis zum Taschenboden; (ii) gingivale Rezession (GR): sie wird von der Schmelz-Zement-Verbindung bis zum Boden der Tasche gemessen; (iii) Clinical Attachment Level (CAL): wird als PPD + GR gemessen (GR ist immer dann gleich 0, wenn die Zement-Schmelz-Grenze bedeckt ist); (iv) Blutung beim Sondieren (BOP): wird dichotom bewertet: Das Vorhandensein der Blutung wird als positiv betrachtet, wenn sie innerhalb von 30 Sekunden nach dem Einführen der Sonde für die Sondierungstiefe auftritt; (v) Plaqueindex (PI): wird dichotom ausgewertet. BOP, PPD, CAL und GR werden an sechs Stellen pro Zahn gemessen (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, disto-lingual, lingual und mesio-lingual). Alle Sondierungsmessungen werden mit einer automatisierten Parodontalsonde durchgeführt.

Die klinischen parodontalen Parameter und der Plaqueindex jedes Patienten werden zu Studienbeginn (vor der Intervention) sowie +30 und +90 Tage nach der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie aufgezeichnet. Der Kappa-Index wird verwendet, um die Untersucherkalibrierung bei der Sammlung klinischer parodontaler Parameter zu bewerten, um die Übereinstimmung zwischen den Untersuchern zu berechnen. Gemäß den Diagnosekriterien der Weltgesundheitsorganisation (WHO) muss der akzeptable Kappa-Übereinstimmungsindex größer oder gleich 0,85 sein (WHO, 1997). Dieses Übereinstimmungsniveau wird für die Kalibrierung des Prüfers in diesem Projekt verwendet. Zehn Patienten, von denen jeder mindestens zwei kontralaterale einwurzelige Zahnpaare mit PD ≥ 5 mm an interproximalen Stellen aufweist, werden ausgewählt, um den Untersucher zu kalibrieren. Jeder Patient wird bei zwei verschiedenen Gelegenheiten im Abstand von 48 Stunden bewertet, um die Intra-Untersucher-Zuverlässigkeit durch den Kappa-Index zu erhalten.

Immunologische Überwachung

Zu Studienbeginn und +14 und +30 und +90 Tage nach der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie werden GCF-Proben von acht interproximalen Stellen jedes Patienten entnommen. Die supragingivale Plaque von ausgewählten Zähnen wird entfernt und die Stellen werden sorgfältig mit Luftdüsen getrocknet und anschließend mit sterilen Watterollen isoliert. Proben von GCF werden mit Papierstreifen (Periopaper® - Oralflow Inc., Amityville, NY, USA) erhalten. Die Papierstreifen werden vorsichtig in die Öffnung der Parodontaltasche eingeführt und verbleiben 30 Sekunden subgingival. Die Menge an absorbiertem GCF wird durch ein elektronisches Messgerät für die Feuchtmasse (Periotron ® -Oralflow Inc., Amityville, NY, USA) bestimmt. Die Proben werden zur Quantifizierung der Zytokine (IL-1β, IL-10 und TNF-a) (pg/μl) im Genese Laboratory (Genese Produtos Diagnosticos LTDA, Sao Paulo, SP, Brasilien) in sterile Eppendorf-Röhrchen gegeben, die bei -80 °C gelagert werden ). Zytokinspiegel werden unter Verwendung eines Dreifach-Millipore-Kits (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) und des Luminex 100TM-Systems (Luminex, MiraiBio, Alameda, CA, USA) bestimmt.

Mikrobiologische Überwachung

Zu Studienbeginn und +30 und +90 Tage nach der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie werden Proben der subgingivalen Plaque von acht interproximalen Stellen jedes Patienten entnommen. Die Proben werden einzeln auf ihren Gehalt an 40 subgingivalen Bakterienarten unter Verwendung der Checkerboard-DNA-DNA-Hybridisierungstechnik analysiert (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). Die ausgewählten Zähne werden mit sterilen Watterollen isoliert und mit Luftdüsen getrocknet. Anschließend wird die supragingivale Plaque vorsichtig mit einer sterilen Kürette entfernt. Eine weitere sterile Kürette wird verwendet, um die subgingivale Plaque zu sammeln, beginnend am Boden der parodontalen Tasche bis zu ihrem koronalen Teil. Die Proben werden in sterilisierten Eppendorf-Röhrchen gelagert und im Mikrobiologischen Labor der Guarulhos-Universität (UNG, Guarulhos, SP, Brasilien) verarbeitet.

statistische Analyse

Die Normalität und Homoskedastizität der erhaltenen Daten werden überprüft. Vergleiche innerhalb von Gruppen und zwischen Gruppen in unterschiedlichen Zeitintervallen werden durch parametrische oder nicht-parametrische geeignete Tests durchgeführt. Das Signifikanzniveau wird bei allen Tests auf 5 % festgelegt. Alle Berechnungen werden von der SPSS-Software (SPSS, Chicago IL, USA) durchgeführt.