Cellules tumorales circulantes dans le sang opératoire

Plan de recherche:

Les sujets peropératoires atteints d'adénocarcinome canalaire pancréatique (PDAC) qui ont été consentants et inscrits à l'étude seront emmenés en salle d'opération (OR) pour leur procédure de pancréatectomie précédemment planifiée. Après l'induction de l'anesthésie générale, en utilisant les précautions universelles, un échantillon de sang (10 ml) sera prélevé dans un tube d'héparine pour l'identification des cellules tumorales circulantes (CTC) et servira de l'un des deux contrôles conçus pour évaluer le nombre de CTC de fond. Une fois que le participant a subi l'exploration chirurgicale comme prévu et a été considéré comme un candidat à la résection, une solution saline normale sera utilisée pour laver la cavité abdominale et recueillie dans une cartouche d'aspiration par le chirurgien traitant. Les lavages abdominaux sont une partie normale de la procédure opératoire, généralement effectués à la fin de l'opération pour laver le sang hors de la cavité abdominale et sont effectués avec des quantités variables en fonction de la discrétion du chirurgien. Aux fins d'un contrôle pour l'étude, cette étape de lavage sera déplacée au début de l'opération. Des lavages/irrigations supplémentaires peuvent être nécessaires à la fin du cas à la discrétion du chirurgien. Les cellules recueillies dans ce liquide seront centrifugées et recueillies en laboratoire pour déterminer la présence de cellules malignes. Cela servira de deuxième de deux contrôles. Au cours de la procédure de pancréatectomie, le sang du sujet sera perdu comme une conséquence normale de la procédure et aspiré du champ opératoire dans un nouveau récipient contenant de l'héparine refroidie sur de la glace pour préserver la viabilité cellulaire. Ce sang est normalement jeté à la fin du cas, mais une partie du sang sera collectée et utilisée pour des expériences de laboratoire en aval afin de détecter les CTC.

Laboratoire/post-traitement Le sang prélevé dans la salle d'opération comme décrit ci-dessus sera immédiatement apporté au laboratoire et centrifugé pour séparer le plasma, la couche leucocytaire et les érythrocytes. La couche leucocytaire, qui contient les CTC, les globules blancs et les plaquettes, est retirée et ajoutée au cocktail disponible dans le commerce selon le protocole du kit. L'enrichissement en Ficoll et la séparation des CTC seront ensuite effectués. Les CTC isolés seront ensuite utilisés pour une caractérisation et une expérimentation plus poussées en aval qui comprendront, mais sans s'y limiter : l'identification du numéro de CTC, la croissance des CTC in vitro et in vivo, et l'identification/caractérisation des molécules d'adhésion CTC qui permettent la liaison au péritoine humain . Tout sang inutilisé ou composant de sang non utilisé dans l'expérience se verra attribuer un identifiant unique et anonymisé du patient pour une future référence croisée et stocké à -80 degrés Fahrenheit à l'Université de Floride pour de futures expériences potentielles ou répéter l'isolement CTC.

Collecte de données sur les participants Sur tous les sujets inscrits, les informations anonymisées suivantes seront collectées : données démographiques sur les participants, données cliniques et pathologiques, et données sur la récidive du cancer et la survie globale.