Células Tumorais Circulantes em Sangue Operatório

Plano de pesquisa:

Indivíduos intraoperatórios com adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) que foram consentidos e inscritos no estudo serão levados para a sala de cirurgia (SO) para o procedimento de pancreatectomia previamente planejado. Após a indução da anestesia geral, usando precauções universais, uma amostra de sangue (10ml) será coletada em um tubo de heparina para identificação de células tumorais circulantes (CTCs) e servirá como um dos dois controles projetados para avaliar as contagens de CTC de fundo. Uma vez que o participante foi submetido à exploração cirúrgica conforme planejado e foi considerado candidato à ressecção, solução salina normal será usada para lavar a cavidade abdominal e coletada em uma vasilha de sucção pelo cirurgião responsável. As lavagens abdominais são uma parte normal do procedimento operatório, normalmente realizadas no final da operação para lavar o sangue da cavidade abdominal e são realizadas com quantidades variáveis, dependendo do critério do cirurgião. Para fins de controle do estudo, esta etapa de lavagem será deslocada para o início da operação. Lavagens/irrigações adicionais podem ser necessárias ao final do caso a critério do cirurgião. As células coletadas neste fluido serão centrifugadas e coletadas em laboratório para determinação da presença de células malignas. Isso servirá como o segundo de dois controles. À medida que o procedimento de pancreatectomia prossegue, o sangue do sujeito será perdido como consequência normal do procedimento e aspirado do campo operatório para um novo recipiente contendo heparina resfriada em gelo para preservar a viabilidade celular. Este sangue é normalmente descartado no final do caso, mas uma parte do sangue será coletada e utilizada para experimentos de laboratório a jusante para detectar CTCs.

Laboratório/Pós-processamento O sangue coletado na sala de cirurgia, conforme descrito acima, será imediatamente levado ao laboratório e centrifugado para separar o plasma, a camada leucocitária e os eritrócitos. A camada leucocitária, que contém CTCs, glóbulos brancos e plaquetas, é removida e adicionada ao coquetel disponível comercialmente de acordo com o protocolo do kit. O enriquecimento em Ficoll e a separação das CTCs serão então realizados. As CTCs isoladas serão então usadas para caracterização e experimentação posteriores a jusante, que incluirão, mas não se limitarão a: identificação do número de CTCs, crescimento de CTCs in vitro e in vivo e identificação/caracterização de moléculas de adesão CTC que permitem a ligação ao peritônio humano . Qualquer sangue não utilizado ou componente de sangue não utilizado no experimento receberá um identificador exclusivo e desidentificado do paciente para futura referência cruzada e armazenado a -80 graus Fahrenheit na Universidade da Flórida para possíveis experimentos futuros ou repetir o isolamento de CTC.

Coleta de dados do participante Em todos os indivíduos inscritos, as seguintes informações não identificadas serão coletadas: dados demográficos do participante, dados clínicos e patológicos e dados sobre recorrência do câncer e sobrevida geral.