Zirkulierende Tumorzellen im Operationsblut

Forschungsplan:

Intraoperative Probanden mit pankreatischem duktalem Adenokarzinom (PDAC), die in die Studie eingewilligt und aufgenommen wurden, werden für ihr zuvor geplantes Pankreatektomieverfahren in den Operationssaal (OR) gebracht. Nach Einleitung der Vollnarkose wird unter Anwendung universeller Vorsichtsmaßnahmen eine Blutprobe (10 ml) in ein Heparinröhrchen zur Identifizierung zirkulierender Tumorzellen (CTCs) entnommen und dient als eine von zwei Kontrollen zur Beurteilung der CTC-Hintergrundwerte. Sobald der Teilnehmer wie geplant einer chirurgischen Exploration unterzogen wurde und als Kandidat für eine Resektion eingestuft wurde, wird normale Kochsalzlösung zum Waschen der Bauchhöhle verwendet und vom behandelnden Chirurgen in einem Absaugkanister gesammelt. Bauchspülungen sind ein normaler Teil des operativen Eingriffs und werden typischerweise am Ende der Operation durchgeführt, um Blut aus der Bauchhöhle zu waschen, und werden je nach Ermessen des Chirurgen mit unterschiedlichen Mengen durchgeführt. Zur Kontrolle der Studie wird dieser Waschschritt an den Beginn der Operation verschoben. Am Ende des Falls können nach Ermessen des Chirurgen zusätzliche Waschungen/Spülungen erforderlich sein. In dieser Flüssigkeit gesammelte Zellen werden zentrifugiert und im Labor gesammelt, um das Vorhandensein bösartiger Zellen zu bestimmen. Dies dient als zweites von zwei Steuerelementen. Während das Pankreatektomieverfahren fortschreitet, wird dem Patienten Blut als normale Folge des Verfahrens verloren gehen und aus dem Operationsfeld in einen neuen Behälter gesaugt, der auf Eis gekühltes Heparin enthält, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten. Dieses Blut wird normalerweise am Ende des Falls entsorgt, aber ein Teil des Blutes wird gesammelt und für nachgelagerte Laborexperimente zum Nachweis von CTCs verwendet.

Labor/Nachbearbeitung Blut, das wie oben beschrieben im Operationssaal gesammelt wurde, wird sofort ins Labor gebracht und zentrifugiert, um Plasma, Buffy Coat und Erythrozyten abzutrennen. Der Leukozytenfilm, der die CTCs, weißen Blutkörperchen und Blutplättchen enthält, wird entfernt und dem im Handel erhältlichen Cocktail gemäß dem Kit-Protokoll zugesetzt. Anschließend erfolgt eine Ficoll-Anreicherung und Abtrennung der CTCs. Die isolierten CTCs werden dann für weitere nachgelagerte Charakterisierungen und Experimente verwendet, die Folgendes beinhalten, aber nicht beschränkt sind auf: Identifizierung der CTC-Zahl, Wachstum von CTCs in vitro und in vivo und Identifizierung/Charakterisierung von CTC-Adhäsionsmolekülen, die eine Bindung an das menschliche Peritoneum ermöglichen . Jedem unbenutzten Blut oder Blutbestandteil, der nicht im Experiment verwendet wird, wird ein eindeutiger Identifikator zugewiesen und der Patient für zukünftige Querverweise anonymisiert und bei -80 Grad Fahrenheit an der University of Florida für potenzielle zukünftige Experimente oder wiederholte CTC-Isolierung gelagert.

Erfassung von Teilnehmerdaten Von allen eingeschriebenen Probanden werden die folgenden nicht identifizierten Informationen erfasst: demografische Daten der Teilnehmer, klinische und pathologische Daten und Daten über das Wiederauftreten von Krebs und das Gesamtüberleben.