Krążące komórki nowotworowe w krwi operacyjnej

Plan badań:

Pacjenci śródoperacyjni z gruczolakorakiem przewodowym trzustki (PDAC), którzy uzyskali zgodę i zostali włączeni do badania, zostaną przewiezieni na salę operacyjną (OR) w celu wykonania zaplanowanej wcześniej procedury wycięcia trzustki. Po wywołaniu znieczulenia ogólnego, z zachowaniem uniwersalnych środków ostrożności, próbka krwi (10 ml) zostanie pobrana do probówki z heparyną w celu identyfikacji krążących komórek nowotworowych (CTC) i posłuży jako jedna z dwóch kontroli zaprojektowanych do oceny tła CTC. Gdy uczestnik zostanie poddany eksploracji chirurgicznej zgodnie z planem i zostanie uznany za kandydata do resekcji, normalna sól fizjologiczna zostanie użyta do przemycia jamy brzusznej i zebrana do kanistra ssącego przez prowadzącego chirurga. Płukanie jamy brzusznej jest normalną częścią procedury operacyjnej, zwykle wykonywaną pod koniec operacji w celu wypłukania krwi z jamy brzusznej i jest wykonywane w różnych ilościach w zależności od uznania chirurga. Dla celów kontrolnych do badania ten etap przemywania zostanie przesunięty na początek operacji. Dodatkowe przemycia/irygacje mogą być konieczne na koniec przypadku, według uznania chirurga. Komórki zebrane w tym płynie zostaną odwirowane i zebrane w laboratorium w celu określenia obecności komórek nowotworowych. Będzie to służyć jako druga z dwóch kontrolek. W miarę postępu procedury pankreatektomii krew pacjenta zostanie utracona jako normalna konsekwencja procedury i odessana z pola operacyjnego do nowego pojemnika zawierającego schłodzoną na lodzie heparynę w celu zachowania żywotności komórek. Ta krew jest zwykle odrzucana na końcu przypadku, ale część krwi zostanie zebrana i wykorzystana do dalszych eksperymentów laboratoryjnych w celu wykrycia CTC.

Laboratorium/obróbka końcowa Krew pobrana na sali operacyjnej zgodnie z powyższym opisem zostanie natychmiast dostarczona do laboratorium i odwirowana w celu oddzielenia osocza, kożuszka leukocytarnego i erytrocytów. Kożuszek leukocytarny, który zawiera CTC, krwinki białe i płytki krwi, usuwa się i dodaje do dostępnego w handlu koktajlu zgodnie z protokołem zestawu. Następnie zostanie przeprowadzone wzbogacenie Ficoll i oddzielenie CTC. Wyizolowane CTC zostaną następnie wykorzystane do dalszej charakterystyki i eksperymentów, które będą obejmować między innymi: identyfikację liczby CTC, wzrost CTC in vitro i in vivo oraz identyfikację/charakterystykę cząsteczek adhezyjnych CTC, które umożliwiają wiązanie się z ludzką otrzewną . Każdej niewykorzystanej krwi lub składnikowi krwi, który nie zostanie wykorzystany w eksperymencie, zostanie przypisany unikalny identyfikator i pozbawiona elementów umożliwiających identyfikację pacjenta w celu późniejszego odniesienia i będzie przechowywana w temperaturze -80 stopni Fahrenheita na Uniwersytecie Floryda do potencjalnych przyszłych eksperymentów lub powtórnej izolacji CTC.

Gromadzenie danych uczestnika W przypadku wszystkich zapisanych pacjentów zostaną zebrane następujące dane pozbawione elementów umożliwiających identyfikację: dane demograficzne uczestnika, dane kliniczne i patologiczne oraz dane dotyczące nawrotu raka i całkowitego przeżycia.