Células tumorales circulantes en sangre operativa

Plan de investigación:

Los sujetos intraoperatorios con adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) que hayan sido autorizados e inscritos en el estudio serán llevados al quirófano (OR) para su procedimiento de pancreatectomía planificado previamente. Después de inducir la anestesia general, utilizando precauciones universales, se recolectará una muestra de sangre (10 ml) en un tubo de heparina para identificar las células tumorales circulantes (CTC) y servirá como uno de los dos controles diseñados para evaluar los recuentos de CTC de fondo. Una vez que el participante se haya sometido a la exploración quirúrgica según lo planeado y se haya considerado candidato para la resección, se usará solución salina normal para lavar la cavidad abdominal y el cirujano a cargo la recogerá en un recipiente de succión. Los lavados abdominales son una parte normal del procedimiento quirúrgico, normalmente se realizan al final de la operación para eliminar la sangre de la cavidad abdominal y se realizan con cantidades variables según el criterio del cirujano. A los efectos de un control para el estudio, este paso de lavado se trasladará al inicio de la operación. Pueden ser necesarios lavados/irrigaciones adicionales al final del caso a discreción del cirujano. Las células recolectadas en este líquido se centrifugarán y recolectarán en el laboratorio para determinar la presencia de células malignas. Esto servirá como el segundo de dos controles. A medida que avanza el procedimiento de pancreatectomía, la sangre del sujeto se perderá como consecuencia normal del procedimiento y se succionará del campo operatorio a un nuevo recipiente que contiene heparina enfriada en hielo para preservar la viabilidad celular. Esta sangre normalmente se descarta al final del caso, pero una parte de la sangre se recolectará y utilizará para experimentos de laboratorio posteriores para detectar CTC.

Laboratorio/Procesamiento posterior La sangre recolectada en el quirófano como se describe anteriormente se llevará inmediatamente al laboratorio y se centrifugará para separar el plasma, la capa leucocitaria y los eritrocitos. La capa leucocitaria, que contiene las CTC, los glóbulos blancos y las plaquetas, se retira y se agrega al cóctel disponible comercialmente según el protocolo del kit. Luego se realizará el enriquecimiento con Ficoll y la separación de los CTC. Luego, las CTC aisladas se utilizarán para una caracterización y experimentación posteriores que incluirán, entre otros: identificación del número de CTC, crecimiento de CTC in vitro e in vivo, e identificación/caracterización de moléculas de adhesión de CTC que permiten la unión al peritoneo humano. . Cualquier sangre no utilizada o componente de sangre no utilizado en el experimento se le asignará un identificador único y se anulará la identificación del paciente para futuras referencias cruzadas y se almacenará a -80 grados Fahrenheit en la Universidad de Florida para posibles experimentos futuros o repetir el aislamiento de CTC.

Recopilación de datos de los participantes En todos los sujetos inscritos, se recopilará la siguiente información anónima: datos demográficos de los participantes, datos clínicos y patológicos, y datos sobre la recurrencia del cáncer y la supervivencia general.