Cellule tumorali circolanti nel sangue operatorio

Piano di ricerca:

I soggetti intraoperatori con adenocarcinoma duttale pancreatico (PDAC) che sono stati acconsentiti e arruolati nello studio verranno portati in sala operatoria (OR) per la procedura di pancreatectomia pianificata in precedenza. Dopo l'induzione dell'anestesia generale, utilizzando le precauzioni universali, il campione di sangue (10 ml) verrà raccolto in un tubo di eparina per l'identificazione delle cellule tumorali circolanti (CTC) e servirà come uno dei due controlli progettati per valutare i conteggi CTC di fondo. Una volta che il partecipante è stato sottoposto a esplorazione chirurgica come pianificato ed è stato considerato un candidato per la resezione, verrà utilizzata una normale soluzione fisiologica per lavare la cavità addominale e raccolta in un contenitore di aspirazione dal chirurgo curante. I lavaggi addominali sono una parte normale della procedura operativa, tipicamente eseguiti alla fine dell'operazione per lavare il sangue dalla cavità addominale e vengono eseguiti con quantità variabili a seconda della discrezione del chirurgo. Ai fini di un controllo per lo studio, questa fase di lavaggio sarà spostata all'inizio dell'operazione. Ulteriori lavaggi/irrigazioni possono essere necessari alla fine del caso a discrezione del chirurgo. Le cellule raccolte in questo fluido saranno centrifugate e raccolte in laboratorio per la determinazione della presenza di cellule maligne. Questo servirà come il secondo di due controlli. Man mano che la procedura di pancreatectomia procede, il sangue del soggetto verrà perso come normale conseguenza della procedura e aspirato dal campo operatorio in un nuovo contenitore contenente eparina raffreddata su ghiaccio per preservare la vitalità cellulare. Questo sangue viene normalmente scartato alla fine del caso, ma una parte del sangue verrà raccolta e utilizzata per esperimenti di laboratorio a valle per rilevare CTC.

Laboratorio/Post-elaborazione Il sangue raccolto in sala operatoria come descritto sopra verrà immediatamente portato in laboratorio e centrifugato per separare il plasma, il buffy coat e gli eritrociti. Il buffy coat, che contiene CTC, globuli bianchi e piastrine, viene rimosso e aggiunto al cocktail disponibile in commercio secondo il protocollo del kit. Verrà quindi eseguito l'arricchimento Ficoll e la separazione delle CTC. Le CTC isolate verranno quindi utilizzate per un'ulteriore caratterizzazione e sperimentazione a valle che includerà, ma non solo: identificazione del numero di CTC, crescita delle CTC in vitro e in vivo e identificazione/caratterizzazione delle molecole di adesione delle CTC che consentono il legame al peritoneo umano . A qualsiasi sangue inutilizzato o componente del sangue non utilizzato nell'esperimento verrà assegnato un identificatore univoco e anonimizzato del paziente per futuri riferimenti incrociati e conservato a -80 gradi Fahrenheit presso l'Università della Florida per potenziali esperimenti futuri o ripetere l'isolamento CTC.

Raccolta dei dati dei partecipanti Su tutti i soggetti arruolati, verranno raccolte le seguenti informazioni anonime: dati demografici dei partecipanti, dati clinici e patologici e dati sulla recidiva del cancro e sulla sopravvivenza globale.