Circulerende tumorcellen in operatief bloed

Onderzoeksplan:

Intraoperatieve proefpersonen met ductaal adenocarcinoom van de pancreas (PDAC) die toestemming hebben gekregen en zijn ingeschreven voor het onderzoek, zullen naar de operatiekamer (OK) worden gebracht voor hun eerder geplande pancreatectomieprocedure. Nadat algemene anesthesie is geïnduceerd, met gebruikmaking van universele voorzorgsmaatregelen, wordt bloedmonster (10 ml) verzameld in een heparinebuis voor identificatie van circulerende tumorcellen (CTC's) en dienen als een van de twee controles die zijn ontworpen om achtergrond-CTC-tellingen te beoordelen. Zodra de deelnemer zoals gepland chirurgische verkenning heeft ondergaan en wordt beschouwd als een kandidaat voor resectie, zal normale zoutoplossing worden gebruikt om de buikholte te wassen en door de behandelend chirurg in een opvangpot worden opgevangen. Abdominale wasbeurten zijn een normaal onderdeel van de operatieve procedure, meestal uitgevoerd aan het einde van de operatie om bloed uit de buikholte te spoelen en worden uitgevoerd met variabele hoeveelheden, afhankelijk van het oordeel van de chirurg. Ter controle voor het onderzoek zal deze wasstap worden verplaatst naar het begin van de bewerking. Extra wasbeurten/irrigaties kunnen nodig zijn aan het einde van de casus, naar goeddunken van de chirurg. Cellen die in deze vloeistof zijn verzameld, worden gecentrifugeerd en in het laboratorium verzameld om de aanwezigheid van kwaadaardige cellen te bepalen. Dit zal dienen als de tweede van twee controles. Naarmate de pancreatectomieprocedure vordert, zal het bloed van de proefpersoon verloren gaan als een normaal gevolg van de procedure en uit het operatieveld worden gezogen in een nieuwe container met heparine gekoeld op ijs om de levensvatbaarheid van de cellen te behouden. Dit bloed wordt normaal gesproken weggegooid aan het einde van de casus, maar een deel van het bloed zal worden verzameld en gebruikt voor latere laboratoriumexperimenten om CTC's te detecteren.

Laboratorium/nabehandeling Bloed dat zoals hierboven beschreven in de operatiekamer is verzameld, wordt onmiddellijk naar het laboratorium gebracht en gecentrifugeerd om het plasma, de buffy coat en de erytrocyten te scheiden. De buffy coat, die de CTC's, witte bloedcellen en bloedplaatjes bevat, wordt verwijderd en toegevoegd aan de in de handel verkrijgbare cocktail volgens het protocol van de kit. Ficoll-verrijking en scheiding van de CTC's zullen dan worden uitgevoerd. De geïsoleerde CTC's zullen vervolgens worden gebruikt voor verdere stroomafwaartse karakterisering en experimenten, waaronder, maar niet beperkt tot: identificatie van CTC-nummer, groei van CTC's in vitro en in vivo, en identificatie/karakterisering van CTC-adhesiemoleculen die binding aan menselijk peritoneum mogelijk maken . Al het ongebruikte bloed of bloedbestanddeel dat niet in het experiment is gebruikt, krijgt een unieke identificatiecode en de-identificatie van de patiënt voor toekomstige kruisverwijzing en wordt opgeslagen bij -80 graden Fahrenheit aan de Universiteit van Florida voor mogelijke toekomstige experimenten of herhaalde CTC-isolatie.

Verzameling van deelnemersgegevens Van alle ingeschreven proefpersonen zal de volgende geanonimiseerde informatie worden verzameld: demografische gegevens van de deelnemers, klinische en pathologische gegevens en gegevens over terugkeer van kanker en algehele overleving.