Caractérisation des cellules Breg (Breg)

Raison : La polyarthrite rhumatoïde (PR), la maladie articulaire inflammatoire la plus courante, est souvent associée à une destruction articulaire irréversible et peut engager le pronostic des patients. Si des traitements pour stabiliser la maladie sont désormais disponibles, les recherches se poursuivent pour tenter de guérir définitivement la maladie. Il est bien établi que les lymphocytes B ont un rôle pathogène dans la PR. Plus récemment, il a été montré que les lymphocytes B pouvaient également avoir des fonctions régulatrices via la sécrétion d'interleukine 10 (IL-10). On les appelle les cellules régulatrices B (Breg). Dans le modèle murin le plus couramment utilisé de la polyarthrite rhumatoïde, l'arthrite induite par le collagène (CIA), le transfert de Breg permet de prévenir le développement de la CIA et de guérir l'arthrite établie. Les chercheurs ont récemment montré que les Breg étaient diminués chez les patients atteints de PR par rapport aux témoins et que le taux de Breg était inversement corrélé à l'activité de la maladie et aux niveaux d'auto-anticorps. Ces résultats suggèrent donc que l'absence de sécrétion d'IL-10 par les lymphocytes B joue un rôle important dans la physiopathologie de la PR. Néanmoins, chez l'homme, le Breg reste mal connu. L'objectif principal du projet est de mieux caractériser les B capables de produire de l'IL-10 tant chez les sujets atteints de PR que chez les témoins. Comprendre ce qui induit la sécrétion d'IL-10 par B pourrait permettre d'envisager de nouvelles approches thérapeutiques dans les maladies auto-immunes, notamment dans la PR.

Objectifs:

Principal : identifier les transporteurs de nutriments et les récepteurs de chimiokines exprimés de manière différentielle entre les lymphocytes Breg et les autres lymphocytes B chez les patients atteints de PR.

Secondaire:

• Identifier les gènes et les protéines de surface différentiellement exprimés entre Breg et les autres lymphocytes B (BL) chez les patients atteints de PR.
• Identifier les transporteurs de nutriments, les récepteurs de chimiokines, les gènes et les protéines de surface exprimés de manière différentielle entre Breg et d'autres BL chez des sujets sains.
• Comparer l'expression des transporteurs de nutriments, des récepteurs de chimiokines, des gènes et des protéines de surface entre les témoins Breg Breg et les sujets atteints de PR.

Méthodes :

Conception : Etude transversale impliquant les services de rhumatologie bicentriques de Montpellier et Nîmes au recrutement ; notre équipe de recherche à l'IGMM Translationnelle de Nîmes et laboratoire d'immunologie pour les analyses biologiques.

Population:

• PR : patient répondant aux critères ACR (American College of Rheumatology) -EULAR (European League Against Rheumatism) 2010, naïf et biothérapie par corticoïdes moins de 10 mg/jour, stable depuis au moins une semaine.
• Témoins : appariés pour l'âge et le sexe à des patients atteints de PR, sans maladie systémique.

Points finaux

• Principaux : l'intensité moyenne de la fluorescence des porteurs de nutriments en cytométrie en flux et le pourcentage de BL exprimant les différents récepteurs de chimiokines
• Secondaire : analyse du transcriptome et de la protéomique de surface avec confirmation cytométrique de l'expression protéique de l'ARN et des protéines identifiées.

Nombre de sujets : 50 témoins et 50 patients PR (10 chacun pour chacune des 3 méthodes de comparaison Breg/B IL10- et 10 chacun pour chacune des deux étapes de validation). Chaque patient aura une visite. La durée prévue des études est de 2 ans.

Analyse statistique : Comparaison des ratios B + IL-10 / IL-10-B entre les patients PR et les témoins par les tests de Student ou de Mann-Whitney.

Résultats attendus et perspectives : Ce projet nous permettra de mieux définir et comprendre le Breg chez les patients atteints de PR et chez les témoins. Si les chercheurs peuvent trouver des marqueurs extracellulaires spécifiques pour Breg, cela simplifiera l'étude ultérieure de ces cellules. La compréhension permettant au BL de devenir régulateur et cela explique le manque d'IL-10 par le BL dans la PR pourrait ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques.