Характеристика клеток Breg (Breg)

Обоснование: Ревматоидный артрит (РА), наиболее распространенное воспалительное заболевание суставов, часто связано с необратимой деструкцией суставов и может влиять на прогноз пациентов. Если в настоящее время доступны методы лечения для стабилизации болезни, исследования продолжают попытки навсегда вылечить болезнь. Хорошо известно, что В-клетки играют патогенную роль при РА. Совсем недавно было показано, что В-клетки также могут выполнять регуляторные функции посредством секреции интерлейкина 10 (ИЛ-10). Их называют В-регуляторными клетками (Breg). В мышиной модели наиболее часто используемого ревматоидного артрита, индуцированного коллагеном артрита (КИА), перенос Breg помогает предотвратить развитие КИА и вылечить установившийся артрит. Исследователи недавно показали, что уровень Breg был снижен у пациентов с РА по сравнению с контрольной группой и что уровень Breg обратно коррелировал с активностью заболевания и уровнями аутоантител. Таким образом, эти результаты позволяют предположить, что отсутствие секреции IL-10 В-клетками играет важную роль в патофизиологии РА. Тем не менее, у людей Breg остаются плохо изученными. Основная цель проекта - лучше охарактеризовать B, способный производить IL-10, как у субъектов с РА, так и у контрольной группы. Понимание того, что индуцирует секрецию ИЛ-10 с помощью В, может позволить рассмотреть новые терапевтические подходы при аутоиммунных заболеваниях, в том числе при РА.

Цели:

Основная задача: идентифицировать переносчики питательных веществ и рецепторы хемокинов, дифференциально экспрессируемые между Breg и другими В-клетками у пациентов с РА.

Вторичный:

• Идентифицировать гены и поверхностные белки, дифференциально экспрессируемые между Breg и другими В-лимфоцитами (ВЛ) у пациентов с РА.
• Чтобы идентифицировать переносчики питательных веществ, рецепторы хемокинов, гены и поверхностные белки, дифференциально экспрессируемые между Breg и другими BL у здоровых субъектов.
• Сравнить экспрессию переносчиков питательных веществ, рецепторов хемокинов, генов и поверхностных белков у контрольной группы Breg Breg и субъектов с ревматоидным артритом.

Методы:

Дизайн: кросс-секционное исследование с участием двухцентровых ревматологических служб в Монпелье и Ниме для набора; наша исследовательская группа в Translational IGMM Nîmes и лаборатория иммунологии для биологических анализов.

Население:

• РА: пациент соответствует критериям ACR (Американский колледж ревматологии)-EULAR (Европейская лига против ревматизма) 2010 г., ранее не получал биотерапию кортикостероидами менее 10 мг/сут, стабилен не менее недели.
• Контрольная группа: сопоставима по возрасту и полу с больными РА, без системного заболевания.

Конечные точки

• Основные: средняя проточная цитометрия, интенсивность флуоресценции питательных носителей и процент БЛ, экспрессирующих разные хемокиновые рецепторы.
• Вторичный: анализ транскриптома и протеомная поверхность с цитометрическим подтверждением белковой экспрессии РНК и идентифицированных белков.

Количество субъектов: 50 контролей и 50 пациентов с РА (по 10 для каждого из 3 методов сравнения Breg/B IL10- и по 10 для каждого из двух этапов проверки). У каждого пациента будет визит. Предполагаемая продолжительность обучения составляет 2 года.

Статистический анализ: сравнение соотношений B + IL-10/IL-10-B между пациентами с РА и контрольной группой с помощью тестов Стьюдента или Манна-Уитни.

Ожидаемые результаты и перспективы: этот проект позволит нам лучше определить и понять Breg у пациентов с РА и в контроле. Если исследователи смогут найти специфические внеклеточные маркеры для Breg, это упростит дальнейшее изучение этих клеток. Понимание того, что BL становится регулятором, и это объясняет отсутствие IL-10 в BL при РА, может открыть новые терапевтические перспективы.