Breg-solujen karakterisointi (Breg)

Rational: Nivelreuma (RA), yleisin tulehduksellinen nivelsairaus, liittyy usein peruuttamattomaan niveltuhoon ja voi liittyä potilaiden ennusteeseen. Jos taudin vakauttamiseksi on nyt saatavilla hoitoja, tutkimukset jatkuvat taudin pysyvän parantamisen yrittämisessä. On hyvin todettu, että B-soluilla on patogeeninen rooli RA:ssa. Viime aikoina on osoitettu, että B-soluilla voi olla myös säätelytoimintoja interleukiini 10:n (IL-10) erittymisen kautta. Niitä kutsutaan B-säätelysoluiksi (Breg). Hiirimallissa, joka on yleisimmin käytetyssä nivelreumassa, kollageenin aiheuttamassa niveltulehduksessa (CIA), Breg-siirto auttaa estämään CIA:n kehittymistä ja parantamaan vakiintunutta niveltulehdusta. Tutkijat ovat äskettäin osoittaneet, että Breg-arvot vähenivät nivelreumapotilailla verrokkeihin verrattuna ja että Bregin määrä korreloi käänteisesti sairauden aktiivisuuden ja autovasta-ainetasojen kanssa. Nämä tulokset viittaavat siten siihen, että B-solujen IL-10-erityksen puuttumisella on tärkeä rooli RA:n patofysiologiassa. Siitä huolimatta ihmisillä Breg on edelleen huonosti ymmärretty. Projektin päätavoitteena on karakterisoida paremmin IL-10:tä tuottamaan kykenevää B:tä sekä nivelreumapotilailla että kontrolleilla. Sen ymmärtäminen, mikä indusoi B:n IL-10:n erittymistä, voisi mahdollistaa uusien terapeuttisten lähestymistapojen harkitsemisen autoimmuunisairauksissa, mukaan lukien nivelreuma.

Tavoitteet:

Pääasiallinen: Tunnistaa ravintoaineiden kuljettajat ja kemokiinireseptorit, jotka ilmentyvät eri tavalla Bregin ja muiden B-solujen välillä nivelreumapotilailla.

Toissijainen:

• Bregin ja muiden B-lymfosyyttien (BL) välillä ekspressoituneiden geenien ja pintaproteiinien tunnistaminen nivelreumapotilailla.
• Tunnistetaan ravinteiden kuljettajat, kemokiinireseptorit, geenit ja pintaproteiinit, jotka ilmentyvät eri tavalla Bregin ja muiden BL:n välillä terveillä koehenkilöillä.
• Vertaa ravintoaineiden kuljettajien, kemokiinireseptorien, geenien ja pintaproteiinien ilmentymistä Breg Breg -kontrollien ja RA-potilaiden välillä.

Menetelmät:

Suunnittelu: Poikkileikkaustutkimus, joka sisältää kaksikeskiset reumatologiapalvelut Montpellierissä ja Nîmesissä rekrytointiin asti; tutkimusryhmämme Translational IGMM Nîmesissä ja immunologialaboratoriossa biologisia analyyseja varten.

Väestö:

• RA: potilas täyttää kriteerit ACR (American College of Rheumatology) -EULAR (European League Against Rheumatism) 2010, naiivi ja bioterapia kortikosteroideilla alle 10 mg / vrk, stabiili vähintään viikon.
• Kontrollit: sovitettu iän ja sukupuolen mukaan nivelreumapotilaille, joilla ei ole systeemistä sairautta.

Päätepisteet

• Pääasiallinen: keskimääräiset virtaussytometrian fluoresenssin intensiteetit ravinteiden kantajat ja eri kemokiinireseptoreita ilmentävän BL:n prosenttiosuus
• Toissijainen: transkriptioanalyysi ja proteomiikan pinta sytometrisellä vahvistuksella RNA:n ja tunnistettujen proteiinien ilmentymisestä.

Koehenkilöiden lukumäärä: 50 kontrollia ja 50 nivelreumapotilasta (10 kutakin kolmea Breg/B IL10-vertailumenetelmää kohden ja 10 kutakin kahdesta validointivaiheesta). Jokainen potilas vierailee. Opintojen arvioitu kesto on 2 vuotta.

Tilastollinen analyysi: Verrataan suhteita B + IL-10 / IL-10-B RA-potilaiden ja kontrollien välillä Studentin tai Mann-Whitneyn testeillä.

Odotetut tulokset ja näkymät: Tämän projektin avulla voimme paremmin määritellä ja ymmärtää Bregin nivelreumapotilailla ja kontrolleilla. Jos tutkijat voivat löytää erityisiä ekstrasellulaarisia markkereita Bregille, tämä yksinkertaistaa näiden solujen jatkotutkimusta. Ymmärtäminen, että BL:stä tulee säätelijä, ja tämä selittää IL-10:n puuttumisen BL:stä RA:ssa, voisi avata uusia terapeuttisia näkökulmia.