Caracterización de células Breg (Breg)

Racional: La artritis reumatoide (AR), la enfermedad articular inflamatoria más común, a menudo se asocia con destrucción articular irreversible y puede afectar el pronóstico de los pacientes. Si los tratamientos para estabilizar la enfermedad ya están disponibles, la investigación continúa para tratar de curar la enfermedad de forma permanente. Está bien establecido que las células B tienen un papel patogénico en la AR. Más recientemente, se ha demostrado que las células B también podrían tener funciones reguladoras a través de la secreción de interleucina 10 (IL-10). Se llaman células B reguladoras (Breg). En el modelo de ratón, la artritis reumatoide más utilizada, la artritis inducida por colágeno (CIA), la transferencia Breg ayuda a prevenir el desarrollo de la CIA y curar la artritis establecida. Los investigadores han demostrado recientemente que Breg disminuyó en pacientes con AR en comparación con los controles y que la tasa de Breg se correlacionó inversamente con la actividad de la enfermedad y los niveles de autoanticuerpos. Estos resultados sugieren que la falta de secreción de IL-10 por parte de las células B juega un papel importante en la fisiopatología de la AR. Sin embargo, en humanos, los Breg siguen siendo poco conocidos. El principal objetivo del proyecto es caracterizar mejor la B capaz de producir IL-10 tanto en sujetos con AR como en controles. Comprender qué induce la secreción de IL-10 por B podría permitir considerar nuevos enfoques terapéuticos en enfermedades autoinmunes, incluida la AR.

Objetivos:

Principal: Identificar transportadores de nutrientes y receptores de quimiocinas expresados ​​diferencialmente entre Breg y otras células B en pacientes con AR.

Secundario:

• Identificar genes y proteínas de superficie expresados ​​diferencialmente entre Breg y otros Linfocitos B (BL) en pacientes con AR.
• Identificar transportadores de nutrientes, receptores de quimiocinas, genes y proteínas de superficie expresados ​​diferencialmente entre Breg y otros BL en sujetos sanos.
• Comparar la expresión de transportadores de nutrientes, receptores de quimiocinas, genes y proteínas de superficie entre controles de Breg Breg y sujetos con AR.

Métodos:

Diseño: estudio transversal que involucró servicios de reumatología bicéntricos en Montpellier y Nîmes para el reclutamiento; nuestro equipo de investigación en el Translational IGMM Nîmes y el laboratorio de inmunología para análisis biológicos.

Población:

• AR: paciente cumple con los criterios ACR (American College of Rheumatology) -EULAR (European League Against Rheumatism) 2010, naïve y bioterapia con corticoides menos de 10 mg/día, estable al menos una semana.
• Controles: emparejados por edad y sexo con pacientes con AR, sin enfermedad sistémica.

Puntos finales

• Principal: los portadores de nutrientes de la intensidad de fluorescencia de la citometría de flujo promedio y el porcentaje de BL que expresa los diferentes receptores de quimiocinas
• Secundario: análisis de transcriptoma y superficie de proteómica con confirmación citométrica de expresión de proteína de ARN y proteínas identificadas.

Número de sujetos: 50 controles y 50 pacientes con AR (10 para cada uno de los 3 métodos de comparación Breg/B IL10- y 10 para cada una de las dos etapas de validación). Cada paciente tendrá una visita. La duración prevista del estudio es de 2 años.

Análisis estadístico: Comparación de ratios B + IL-10/IL-10-B entre pacientes con AR y controles mediante test de Student o Mann-Whitney.

Resultados Esperados y Prospectos: Este proyecto nos permitirá definir y entender mejor el Breg en pacientes con AR y en controles. Si los investigadores pueden encontrar marcadores extracelulares específicos para Breg, esto simplificará el estudio adicional de estas células. Entender que permite que el BL se convierta en regulador y que esto explique la falta de IL-10 por parte del BL en la AR podría abrir nuevas perspectivas terapéuticas.