Charakterizace Bregových buněk (Breg)

Racionální: Revmatoidní artritida (RA), nejběžnější zánětlivé onemocnění kloubů, je často spojeno s nevratnou destrukcí kloubu a může ovlivnit prognózu pacientů. Pokud jsou nyní k dispozici léčby ke stabilizaci onemocnění, výzkum pokračuje ve snaze trvale vyléčit onemocnění. Je dobře známo, že B buňky mají patogenní roli v RA. Nedávno se ukázalo, že B buňky mohou mít také regulační funkce prostřednictvím sekrece interleukinu 10 (IL-10). Říká se jim B regulační buňky (Breg). V myším modelu nejčastěji používaném u revmatoidní artritidy, kolagenem indukované artritidy (CIA), přenos Breg pomáhá předcházet rozvoji CIA a vyléčit zavedenou artritidu. Výzkumníci nedávno prokázali, že Breg byl snížen u pacientů s RA ve srovnání s kontrolami a že míra Breg byla nepřímo korelována s aktivitou onemocnění a hladinami autoprotilátek. Tyto výsledky tedy naznačují, že nedostatek sekrece IL-10 B buňkami hraje důležitou roli v patofyziologii RA. Nicméně u lidí zůstává Breg špatně pochopený. Hlavním cílem projektu je lépe charakterizovat B schopné produkovat IL-10 jak u subjektů s RA, tak u kontrol. Pochopení, které indukuje sekreci IL-10 prostřednictvím B, by mohlo umožnit uvažovat o nových terapeutických přístupech u autoimunitních onemocnění, včetně RA.

Cíle:

Princip: Identifikovat transportéry živin a chemokinové receptory odlišně exprimované mezi Breg a jinými B buňkami u pacientů s RA.

Sekundární:

• Identifikovat geny a povrchové proteiny odlišně exprimované mezi Breg a jinými B lymfocyty (BL) u pacientů s RA.
• Identifikovat transportéry živin, chemokinové receptory, geny a povrchové proteiny odlišně exprimované mezi Breg a jinými BL u zdravých subjektů.
• Porovnat expresi transportérů živin, chemokinových receptorů, genů a povrchových proteinů mezi kontrolami Breg Breg a subjekty s RA.

Metody:

Design: Průřezová studie zahrnující bicentrické revmatologické služby v Montpellier a Nîmes k náboru; náš výzkumný tým v Translační IGMM Nîmes a imunologické laboratoři pro biologické analýzy.

Populace:

• RA: pacient splňuje kritéria ACR (American College of Rheumatology) -EULAR (European League Against Rheumatism) 2010, naivní a bioterapie s kortikosteroidy méně než 10 mg/den, stabilní minimálně týden.
• Kontroly: věk a pohlaví odpovídaly pacientům s RA, bez systémového onemocnění.

Koncové body

• Hlavní: průměrná průtoková cytometrie, intenzita fluorescence nosičů živin a procento BL exprimující různé chemokinové receptory
• Sekundární: transkriptomová analýza a proteomický povrch s cytometrickým potvrzením proteinové exprese RNA a identifikovaných proteinů.

Počet subjektů: 50 kontrol a 50 pacientů s RA (10 každý pro každou ze 3 metod srovnání Breg / B IL10- a 10 každý pro každý ze dvou stupňů validace). Každý pacient bude mít návštěvu. Předpokládaná délka studia jsou 2 roky.

Statistická analýza: Porovnání poměrů B + IL-10 / IL-10-B mezi pacienty s RA a kontrolami pomocí Studentova nebo Mann-Whitneyho testu.

Očekávané výsledky a vyhlídky: Tento projekt nám umožní lépe definovat a porozumět Breg u pacientů s RA au kontrol. Pokud vědci najdou specifické extracelulární markery pro Breg, zjednoduší to další studium těchto buněk. Pochopení, které umožňuje BL stát se regulátorem, a to vysvětluje nedostatek IL-10 BL u RA, by mohlo otevřít nové terapeutické perspektivy.