Effets de l'hypoxie et de l'inflammation sur la synthèse de citrulline par l'ornithine transcarbamylase dans les entérocytes humains (HYPOCITRE)

La citrulline est un acide aminé presque exclusivement libéré par l'intestin grêle après sa synthèse à partir de la glutamine par l'OTC dans les entérocytes. La citrulline de l'intestin grêle est libérée dans la veine porte et, comme elle ne pénètre pas dans les hépatocytes, elle atteint la circulation systémique pour être métabolisée en arginine par les reins. De cette façon, est une source importante d'ARG endogène. De plus, des preuves suggèrent que la citrulline circulante pourrait avoir une action directe sur la régulation de la synthèse des protéines musculaires. Par conséquent, l'administration de citrulline pourrait être une stratégie nutritionnelle intéressante pour préserver ou restaurer la masse et la fonction musculaire. La masse musculaire est un déterminant de la fonction respiratoire et la faiblesse musculaire explique en grande partie la morbidité et la mortalité chez les patients souffrant de Broncho-Pneumopathie Chronique Obstructive (BPCO).

Les preuves suggèrent que les taux plasmatiques de citrulline seraient plus faibles dans plusieurs états impliquant une inflammation systémique et une hypoxie. En effet, il a été observé chez le rat que l'hypoxie entraînait une forte baisse de la concentration plasmatique de CIT et également chez l'homme (une hypocitrullinémie a été observée chez des patients en unité de soins intensifs et chez des sujets souffrant de septicémie et de traumatisme) mais la cause de la relation n'est pas encore connue. établi. On peut donc supposer qu'une diminution du taux plasmatique de CIT pourrait être responsable d'une diminution de la synthèse d'ARG de novo conduisant à une altération de la production de NO (dysfonctionnement endothélial) dans ces situations pathologiques.

Étant donné que l'hypoxie chronique et l'inflammation systémique sont toutes deux des caractéristiques systémiques des patients souffrant de BPCO, le fait que l'hypoxie et/ou l'inflammation systémique pourraient affecter directement l'OCT, diminuant la production intestinale de citrulline qui, à son tour, pourrait contribuer au dysfonctionnement endothélial et à la faiblesse musculaire est pris en compte.

Afin d'explorer cette hypothèse, les conséquences potentielles de l'hypoxie et de l'inflammation (seules ou en association) sur la synthèse de citrulline par l'OCT dans les entérocytes humains seront déterminées, grâce à un modèle de culture « explant » de tissu duodénal. Les biopsies duodénales seront prélevées lors des oesophago-gastro-duodénoscopies réalisées dans le service d'hépato-gastro-entérologie du CHU de Grenoble, chez les patients devant subir une gastroscopie à visée diagnostique. 30 patients seront sélectionnés pendant une période de 6 mois. Après information complète et accord écrit, 8 échantillons de biopsie seront prélevés du duodénum de chaque patient et traités pour la culture d'organes.

Ensuite, les biopsies duodénales seront incubées en présence ou non de cytokines et exposées ou non à l'hypoxie. En effet, 4 groupes seront constitués : un groupe contrôle (pas de stimulus), un groupe exposé à des conditions hypoxiques, un groupe exposé à des conditions inflammatoires (cytokines) et un groupe exposé à la fois à des conditions hypoxiques et inflammatoires.

Comme critère principal, pour chaque groupe, l'activité OTC et la production de citrulline dans le milieu de culture seront étudiées.