Efeitos da Hipóxia e Inflamação na Síntese de Citrulina pela Ornitina Transcarbamilase em Enterócitos Humanos (HYPOCITRE)

A citrulina é um aminoácido quase exclusivamente liberado pelo intestino delgado após sua síntese a partir da glutamina pela OTC nos enterócitos. A citrulina do intestino delgado é liberada na veia porta e, por não entrar nos hepatócitos, chega à circulação sistêmica para ser metabolizada em arginina pelos rins. Desta forma, é uma importante fonte de ARG endógeno. Além disso, evidências sugerem que a citrulina circulante poderia ter uma ação direta na regulação da síntese de proteínas musculares. Portanto, a administração de citrulina pode ser uma estratégia nutricional interessante para preservar ou restaurar a massa e a função muscular. A massa muscular é um determinante da função respiratória e a fraqueza muscular explica grande parte da morbimortalidade em pacientes com Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC).

Evidências sugerem que os níveis plasmáticos de citrulina estariam mais baixos em vários estados envolvendo inflamação sistêmica e hipóxia. De fato, foi observado em ratos que a hipóxia leva a um declínio acentuado na concentração plasmática de CIT e também em humanos (hipocitrulinemia foi observada em pacientes de Unidade de Terapia Intensiva e em indivíduos que sofrem de sepse e trauma), mas a causa da relação ainda não é estabelecida. Portanto, pode-se supor que um nível plasmático diminuído de CIT possa ser responsável por uma diminuição na síntese de ARG de novo levando a um comprometimento da produção de NO (disfunção endotelial) nessas situações patológicas.

Como a hipóxia crônica e a inflamação sistêmica são características sistêmicas de pacientes com DPOC, considera-se o fato de que a hipóxia e/ou a inflamação sistêmica possam afetar diretamente a OCT, diminuindo a produção intestinal de citrulina que, por sua vez, poderia contribuir para a disfunção endotelial e fraqueza muscular.

Para explorar esta hipótese, serão determinadas as potenciais consequências da hipóxia e da inflamação (isoladamente ou em associação) na síntese de citrulina pela OCT em enterócitos humanos, graças a um modelo de cultura "explante" de tecido duodenal. Biópsias duodenais serão removidas durante esôfago-gastro-duodenoscopias realizadas na unidade de Hepato-gastro-enterologia do Grenoble University Hospital, entre os pacientes que devem ser submetidos a uma gastroscopia para qualquer finalidade diagnóstica. Serão selecionados 30 pacientes durante um período de 6 meses. Após informações completas e concordância por escrito, 8 espécimes de biópsia serão removidos do duodeno de cada paciente e processados ​​para cultura de órgãos.

Em seguida, biópsias duodenais serão incubadas na presença ou não de citocinas e expostas ou não à hipóxia. Com efeito, serão constituídos 4 grupos: um grupo de controlo (sem estímulo), um grupo exposto a condições hipóxicas, um grupo exposto a condições inflamatórias (citocinas) e um grupo exposto tanto a condições hipóxicas como inflamatórias.

Como endpoint primário, para cada grupo, serão estudadas a atividade OTC e a produção de citrulina no meio de cultura.