Efectos de la hipoxia y la inflamación en la síntesis de citrulina por ornitina transcarbamilasa en enterocitos humanos (HYPOCITRE)

La citrulina es un aminoácido liberado casi exclusivamente por el intestino delgado después de su síntesis a partir de la glutamina por la OTC en los enterocitos. La citrulina del intestino delgado se libera en la vena porta y, debido a que no ingresa a los hepatocitos, llega a la circulación sistémica para ser metabolizada en arginina por los riñones. De esta manera, es una importante fuente de ARG endógeno. Además, la evidencia sugiere que la citrulina circulante podría tener una acción directa sobre la regulación de la síntesis de proteínas musculares. Por tanto, la administración de citrulina podría ser una estrategia nutricional interesante para preservar o restaurar la masa y función muscular. La masa muscular es un determinante de la función respiratoria y la debilidad muscular explica en gran parte la morbimortalidad de los pacientes que padecen Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC).

La evidencia sugiere que los niveles plasmáticos de citrulina serían más bajos en varios estados que involucran inflamación sistémica e hipoxia. De hecho, se ha observado en ratas que la hipoxia conduce a una fuerte disminución de la concentración de CIT en plasma y también en humanos (se ha observado hipocitrulinemia en pacientes de la Unidad de Cuidados Intensivos y en sujetos que sufren sepsis y traumatismos), pero la causa de la relación aún no está clara. establecido. Por lo tanto, se puede suponer que un nivel de CIT plasmático disminuido podría ser responsable de una disminución en la síntesis de ARG de novo que conduce a un deterioro de la producción de NO (disfunción endotelial) en estas situaciones patológicas.

Dado que tanto la hipoxia crónica como la inflamación sistémica son rasgos sistémicos de los pacientes que padecen EPOC, se considera que la hipoxia y/o la inflamación sistémica pueden afectar directamente a la OCT, disminuyendo la producción intestinal de citrulina que, a su vez, podría contribuir a la disfunción endotelial y la debilidad muscular.

Para explorar esta hipótesis, se determinarán las posibles consecuencias de la hipoxia y la inflamación (solas o asociadas) sobre la síntesis de citrulina por la OCT en enterocitos humanos, gracias a un modelo de cultivo "explante" de tejido duodenal. Las biopsias duodenales se extraerán durante las esófago-gastro-duodenoscopias realizadas en la unidad de Hepato-gastro-enterología del Hospital Universitario de Grenoble, entre los pacientes que se espera que se sometan a una gastroscopia para cualquier propósito de diagnóstico. Se seleccionarán 30 pacientes durante un periodo de 6 meses. Después de la información completa y el acuerdo por escrito, se extraerán 8 muestras de biopsia del duodeno de cada paciente y se procesarán para el cultivo de órganos.

Luego, las biopsias duodenales serán incubadas en presencia o no de citoquinas y expuestas o no a hipoxia. De hecho, se constituirán 4 grupos: un grupo de control (sin estímulo), un grupo expuesto a condiciones hipóxicas, un grupo expuesto a condiciones inflamatorias (citocinas) y un grupo expuesto tanto a condiciones hipóxicas como inflamatorias.

Como variable principal, para cada grupo, se estudiará la actividad OTC y la producción de citrulina en el medio de cultivo.