Biodisponibilité des protéines et des acides aminés des graines oléagineuses chez des volontaires sains (PRODIGE)

4 groupes de volontaires sains sont recrutés (hommes et femmes de 18 à 65 ans), IMC de 18 à 30.

Chaque groupe teste une source de protéines (20g) incorporée dans un biscuit que l'on divise en petites portions pour réaliser un protocole de repas répété. Les sources de protéines (tournesol, colza, lin ou lupin) sont intrinsèquement marquées au 15N et au deutérium (2H).

La veille du repas test, les volontaires sont équipés d'une sonde intestinale qui migre jusqu'à l'iléon. Le jour de l'expérience, la position du tube intestinal est contrôlée par radiographie afin de vérifier sa localisation au niveau de l'iléon terminal. Un cathéter est inséré dans la veine de l'avant-bras pour le prélèvement sanguin. Une solution saline contenant du polyéthylène glycol 4000 (PEG-4000, 20 g/L), utilisé comme marqueur non résorbable du flux intestinal, est perfusée dans l'iléon afin de calculer le débit des effluents intestinaux. Après un prélèvement basal de sang et d'urine, ainsi qu'un recueil basal des effluents iléaux effectué pendant 30 min, le sujet ingère à t=0 la première dose de biscuit. Les petites portions de biscuit sont ingérées toutes les 30 min pendant 4h, pour atteindre un plateau isotopique. Des doses traceurs d'acides aminés de carbone 13 (13C) sont ingérées concomitamment avec les doses de biscuits. Des marqueurs non absorbables sont ajoutés au repas test pour corriger une récupération incomplète au niveau iléal.

La période d'échantillonnage postprandiale dure 8 h après l'ingestion du repas. Le contenu intestinal est recueilli en continu sur de la glace et regroupé toutes les 30 min. Le sang est prélevé toutes les 30 min pendant 4 h, puis toutes les heures. L'urine totale est recueillie toutes les 2 h.

Des mesures:

Dans les effluents, les enquêteurs mesurent le PEG 4000, l'azote (N) et le 15N, le carbone et le 13C, les acides aminés (AA), le 15N et le 13C en acides aminés et les marqueurs non résorbables du repas. Les chercheurs calculent le débit iléal, la digestibilité réelle globale des protéines iléales et la digestibilité iléale réelle des acides aminés individuels.

Dans le plasma, les chercheurs mesurent l'urémie et le 15N dans l'urée, les AA et les protéines pour mesurer le transfert de N alimentaire dans les pools de protéines plasmatiques ; 15N, 2H et 13C dans les acides aminés individuels mesurent également la biodisponibilité relative des acides aminés 15N/2H par rapport aux acides aminés 13C libres.

Dans l'urine, les enquêteurs mesurent l'urée et le 15N dans l'urée ammoniac pour calculer les pertes par désamination postprandiale.

Ces mesures permettront de déterminer la biodisponibilité des protéines et des acides aminés à partir de 4 sources de protéines végétales différentes, en utilisant la méthode classique impliquant un prélèvement iléal et un traceur intrinsèque de protéines alimentaires (15N). De plus, cela permettra de tester une procédure moins invasive utilisant plusieurs traceurs pour évaluer la biodisponibilité des acides aminés.