Acides nucléiques circulants sans cellules comme nouveaux diagnostics de tumeurs à partir d'échantillons de plasma humain.

Les acides nucléiques libres circulants sans cellules sont de nouveaux substrats pour les diagnostics de laboratoire dans un certain nombre de domaines médicaux, notamment l'oncologie, la médecine transfusionnelle, la gynécologie/obstétrique, les maladies inflammatoires et auto-immunes, etc. Il existe différentes qualités d'acides nucléiques sans cellules. En oncologie, il a été démontré que la détection précoce d'acides nucléiques acellulaires provenant de la tumeur précède de 6 à 8 mois la détection diagnostique d'une rechute clinique effectuée par des techniques d'imagerie ou des symptômes cliniques.

Les exosomes sont de petites vésicules membranaires bicouches lipidiques (30-100 nm) qui sont libérées de tous les types de cellules dans l'espace extracellulaire. Ces minuscules vésicules membranaires transmettent des signaux médiés par les EV par des protéines, des lipides, des acides nucléiques et des sucres, et le modèle moléculaire unique de cet ensemble dirige le type de signal extracellulaire à transmettre aux cellules cibles. L'intérêt pour les exosomes va de leur mode d'action et de leurs diverses fonctions dans l'organisme à des applications plus pratiques telles que le développement de biomarqueurs basés sur l'analyse de leur contenu en ARN et en protéines et leur utilisation dans les diagnostics cliniques. Il a été proposé que les micro-ARN soient transférés par des exosomes aux cellules réceptrices et puissent y médier la répression de leurs cibles d'ARNm.

L'utilisation de thérapies ciblées très coûteuses (par ex. inhibiteurs de tyrosine kinase ou inhibiteurs de PARP) peuvent devenir obsolètes pendant le traitement en raison de modifications du profil moléculaire mutationnel de la tumeur maligne. En effet, si la détection précoce d'acides nucléiques acellulaires suggère un échec thérapeutique, une nouvelle stratification du patient et des modalités thérapeutiques modifiées pourraient être possibles à l'avenir, contribuant ainsi à prolonger la survie globale des patients atteints de tumeur.

Objectifs de la recherche :

• Isoler les exosomes comme source stable d'acides nucléiques acellulaires.
• Pour effectuer le profilage des protéines sur les exosomes isolés.
• Isoler les acides nucléiques des exosomes pour analyse.
• Définir et développer des normes et des protocoles pour l'analyse des acides nucléiques acellulaires, en particulier en ce qui concerne les altérations épigénétiques en mettant l'accent sur la méthylation de l'ADN.
• Optimisation du processus pré-analytique pour améliorer les aspects pré-analytiques des essais.
• Tester la stabilité de l'ADN circulant méthylé par rapport à l'ADN circulant non méthylé dans diverses conditions pré-analytiques.