Zellfrei zirkulierende Nukleinsäuren als neue Tumordiagnostik aus menschlichen Plasmaproben.

Zellfrei zirkulierende freie Nukleinsäuren sind neue Substrate für die Labordiagnostik in einer Reihe von medizinischen Bereichen, darunter Onkologie, Transfusionsmedizin, Gynäkologie/Geburtshilfe, Entzündungs- und Autoimmunerkrankungen usw. Es gibt verschiedene Qualitäten zellfreier Nukleinsäuren. In der Onkologie hat sich gezeigt, dass die frühe Erkennung zellfreier Nukleinsäuren, die aus dem Tumor stammen, der diagnostischen Erkennung eines klinischen Rückfalls durch bildgebende Verfahren oder klinische Symptome um 6–8 Monate vorausgeht.

Exosomen sind kleine Vesikel mit Lipiddoppelschichtmembranen (30–100 nm), die von allen Zelltypen in den extrazellulären Raum freigesetzt werden. Diese winzigen Membranvesikel übertragen EV-vermittelte Signale von Proteinen, Lipiden, Nukleinsäuren und Zuckern, und das einzigartige molekulare Muster dieses Pakets steuert die Art des extrazellulären Signals, das an die Zielzellen übertragen werden soll. Das Interesse an Exosomen reicht von ihrer Wirkungsweise und verschiedenen Funktionen im Körper bis hin zu praktischeren Anwendungen wie der Entwicklung von Biomarkern auf der Grundlage der Analyse ihres RNA- und Proteingehalts und ihrer Verwendung in der klinischen Diagnostik. Es wurde vorgeschlagen, dass Mikro-RNAs über Exosomen auf Empfängerzellen übertragen werden und dort die Unterdrückung ihrer mRNA-Ziele vermitteln können.

Der Einsatz sehr teurer zielgerichteter Therapien (z.B. Tyrosinkinaseinhibitoren oder PARP-Inhibitoren) können während der Therapie aufgrund von Veränderungen im mutationsbedingten molekularen Profil des bösartigen Tumors obsolet werden. Wenn der frühe Nachweis zellfreier Nukleinsäuren tatsächlich auf ein Therapieversagen hindeutet, könnten in Zukunft eine neue Stratifizierung des Patienten und geänderte Therapiemodalitäten möglich sein und so dazu beitragen, das Gesamtüberleben von Tumorpatienten zu verlängern.

Ziele der Forschung:

• Isolierung von Exosomen als stabile Quelle zellfreier Nukleinsäuren.
• Durchführung von Proteinprofilen an den isolierten Exosomen.
• Zur Isolierung von Nukleinsäuren aus Exosomen zur Analyse.
• Definition und Entwicklung von Standards und Protokollen für die Analyse zellfreier Nukleinsäuren, insbesondere im Hinblick auf epigenetische Veränderungen mit Schwerpunkt auf DNA-Methylierung.
• Optimierung des voranalytischen Prozesses zur Verbesserung der voranalytischen Aspekte von Tests.
• Ziel ist es, die Stabilität von methylierter im Vergleich zu nicht methylierter zirkulierender DNA unter verschiedenen präanalytischen Bedingungen zu testen.