Étude prospective sur le rôle pronostique et prédictif des cellules tumorales circulantes chez les patients atteints d'un carcinome épidermoïde oropharyngé : CTCO (Circulating Tumor Cells in the Oropharynx) (CTCO)

Les cancers de la tête et du cou (HNSCC) sont principalement des cancers épidermoïdes représentés par des tumeurs des voies aérodigestives supérieures. Les stades localement avancés (stades III et IV) représentent 50 à 70 % de toutes les présentations. Les trois principaux facteurs de risque sont le tabagisme, l'alcool et l'infection oropharyngée par le virus du papillome humain (VPH).

En dehors du statut HPV, il n'y a pas de biomarqueur pour le pronostic chez les patients HSNCC. Les cellules tumorales circulantes (CTC) peuvent fournir des informations « en temps réel » sur le comportement tumoral et sont déjà utilisées dans divers cancers (côlon, poumon). Leur détection a une sensibilité limitée et les biomarqueurs ne peuvent pas être utilisés pour un diagnostic précoce, mais peuvent être utiles lors du suivi pour évaluer la récidive tumorale précoce locale, régionale ou métastatique.

En utilisant des prélèvements sanguins à différents moments (au diagnostic, après le traitement initial et lors du suivi), nous pourrons mesurer la variation de quantification et établir un rôle prédictif de ces CTC pour la réponse au traitement.

Notre hypothèse est que les CTC pourraient avoir un rôle clé, en plus de l'examen clinique et radiologique, dans la détection précoce des rechutes tumorales.

Nous pensons que la prise en compte conjointe des paramètres cliniques, de la stratégie thérapeutique et de la quantification des CTC pourrait optimiser le suivi et la prise en charge des patients.

Le système d'extraction CTC, ClearCell® FX de Biolidics, est un système d'enrichissement microfluidique automatisé. Il a l'avantage de récupérer des CTC entièrement intacts et viables à partir d'un échantillon de sang standard. Le principe de tri doux permet de préserver l'intégrité cellulaire et donc l'expression des antigènes de surface. Les CTC ainsi isolés peuvent ensuite être remis en culture ou analysés par immunomarquage. Cette technique performante, en opération depuis décembre 2017 dans le service de biochimie du Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), a démontré son utilité dans le cancer du poumon.

L'analyse transcriptomique des CTC peut être réalisée à l'échelle d'une cellule après isolement des CTC. Les CTC peuvent ensuite être séquencés en RNAseq soit en masse (pool de cellules) soit cellule par cellule sur notre séquenceur Illumina (Nextseq), afin de définir l'hétérogénéité de la tumeur. L'analyse du transcriptome renseigne alors sur l'état de la cellule quant à sa position dans la transition épithélio-mésenchymateuse grâce à une signature moléculaire par phénotype. Une caractérisation sans a priori est donc possible grâce au RNAseq single-cell. Cette technique très sensible et innovante permettra l'étude du profil d'expression génique des CTC.