Prospektiv studie for den prognostiske og prediktive rollen til sirkulerende tumorceller hos pasienter med orofarynx plateepitelkarsinom: CTCO (sirkulerende tumorceller i orofarynx) (CTCO)

Hode- og nakkekreft (HNSCC) er primært plateepitelkreft representert av svulster i den øvre luftveien. Lokalt avanserte trinn (trinn III og IV) står for 50 til 70 % av alle presentasjoner. De tre hovedrisikofaktorene er røyking, alkohol og orofaryngeal infeksjon med humant papillomavirus (HPV).

Bortsett fra HPV-status er det ingen biomarkør for prognosen hos HSNCC-pasienter. Sirkulerende tumorceller (CTCs) kan gi "sanntids" informasjon om tumoratferd og brukes allerede i ulike kreftformer (tykktarm, lunge). Deteksjonen deres har begrenset sensitivitet og biomarkører kan ikke brukes for tidlig diagnose, men kan være nyttige under oppfølging for å vurdere lokal, regional eller metastatisk tidlig tumorresidiv.

Ved å bruke blodprøver på ulike tidspunkt (ved diagnose, etter førstegangsbehandling og under oppfølging), vil vi kunne måle variasjonen i kvantifisering og etablere en prediktiv rolle for disse CTC-ene for respons på behandling.

Vår hypotese er at CTC kan ha en nøkkelrolle, i tillegg til klinisk og radiologisk undersøkelse, for å oppdage tidlig tumortilbakefall.

Vi tror at felles vurdering av kliniske parametere, behandlingsstrategi og kvantifisering av CTC kan optimalisere pasientoppfølging og -behandling.

CTC-ekstraksjonssystemet, ClearCell® FX fra Biolidics, er et automatisert mikrofluidisk anrikningssystem. Den har fordelen av å gjenopprette fullstendig intakte og levedyktige CTC fra en standard blodprøve. Det skånsomme sorteringsprinsippet gjør det mulig å bevare celleintegriteten og dermed uttrykket av overflateantigener. CTC-ene som er isolert på denne måten kan deretter dyrkes på nytt eller analyseres ved immunfarging. Denne høyytelsesteknikken, som har vært i drift siden desember 2017 i biokjemiavdelingen til Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), har vist sin nytte ved lungekreft.

Transkriptomisk analyse av CTC-er kan utføres i skalaen til en celle etter isolering av CTC-ene. CTC-er kan deretter sekvenseres i RNAseq enten i bulk (pool av celler) eller celle for celle på vår Illumina (Nextseq) sekvenser, for å definere heterogeniteten til svulsten. Transkriptomanalyse gir deretter informasjon om tilstanden til cellen med hensyn til dens posisjon i epitel-mesenkymal overgangen takket være en molekylær signatur etter fenotype. En priori-fri karakterisering er derfor mulig takket være RNAseq enkeltcelle. Denne svært sensitive og innovative teknikken vil tillate studiet av genekspresjonsprofilen til CTC-er.