Prospektive Studie zur prognostischen und prädiktiven Rolle zirkulierender Tumorzellen bei Patienten mit Plattenepithelkarzinom des Oropharynx: CTCO (Circulating Tumor Cells in the Oropharynx) (CTCO)

Kopf-Hals-Karzinome (HNSCC) sind in erster Linie Plattenepithelkarzinome, die durch Tumore des oberen Aerodigestivtraktes repräsentiert werden. Lokal fortgeschrittene Stadien (Stadien III und IV) machen 50 bis 70 % aller Präsentationen aus. Die drei Hauptrisikofaktoren sind Rauchen, Alkohol und eine oropharyngeale Infektion mit dem humanen Papillomavirus (HPV).

Abgesehen vom HPV-Status gibt es keinen Biomarker für die Prognose bei HSNCC-Patienten. Zirkulierende Tumorzellen (CTCs) können „Echtzeit“-Informationen über das Tumorverhalten liefern und werden bereits bei verschiedenen Krebsarten (Darm, Lunge) eingesetzt. Ihr Nachweis hat eine begrenzte Sensitivität und Biomarker können nicht für die Frühdiagnose verwendet werden, können aber während der Nachsorge nützlich sein, um lokale, regionale oder metastasierte frühe Tumorrezidive zu beurteilen.

Durch die Verwendung von Blutproben zu unterschiedlichen Zeitpunkten (bei der Diagnose, nach der Erstbehandlung und während der Nachsorge) werden wir in der Lage sein, die Schwankungen in der Quantifizierung zu messen und eine prädiktive Rolle dieser CTCs für das Ansprechen auf die Behandlung zu etablieren.

Unsere Hypothese ist, dass CTCs neben der klinischen und radiologischen Untersuchung eine Schlüsselrolle bei der Erkennung eines frühen Tumorrezidivs spielen könnten.

Wir glauben, dass die gemeinsame Betrachtung von klinischen Parametern, Behandlungsstrategie und Quantifizierung von CTCs die Nachsorge und das Management der Patienten optimieren könnte.

Das CTC-Extraktionssystem ClearCell® FX von Biolidics ist ein automatisiertes mikrofluidisches Anreicherungssystem. Es hat den Vorteil, vollständig intakte und lebensfähige CTCs aus einer Standardblutprobe zu gewinnen. Durch das schonende Sortierprinzip bleibt die Zellintegrität und damit die Expression von Oberflächenantigenen erhalten. Die so isolierten CTCs können dann rekultiviert oder durch Immunfärbung analysiert werden. Diese Hochleistungstechnik, die seit Dezember 2017 in der Biochemie-Abteilung von Pr. Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL) in Betrieb ist, hat ihre Nützlichkeit bei Lungenkrebs bewiesen.

Die transkriptomische Analyse von CTCs kann nach Isolierung der CTCs im Maßstab einer Zelle durchgeführt werden. CTCs können dann in RNAseq entweder in großen Mengen (Pool von Zellen) oder Zelle für Zelle auf unserem Illumina (Nextseq)-Sequenzer sequenziert werden, um die Heterogenität des Tumors zu definieren. Die Transkriptomanalyse liefert dann dank einer molekularen Signatur nach Phänotyp Informationen über den Zustand der Zelle hinsichtlich ihrer Position im epithelio-mesenchymalen Übergang. Dank der RNAseq single cell ist somit eine a priori freie Charakterisierung möglich. Diese hochempfindliche und innovative Technik wird die Untersuchung des Genexpressionsprofils von CTCs ermöglichen.