Prospectief onderzoek naar de prognostische en voorspellende rol van circulerende tumorcellen bij patiënten met orofaryngeaal plaveiselcelcarcinoom: CTCO (circulerende tumorcellen in de orofarynx) (CTCO)

Hoofd-halskankers (HNSCC) zijn voornamelijk plaveiselcelkankers die worden vertegenwoordigd door tumoren van het bovenste spijsverteringskanaal. Lokaal gevorderde stadia (stadia III en IV) vertegenwoordigen 50 tot 70% van alle presentaties. De drie belangrijkste risicofactoren zijn roken, alcohol en orofaryngeale infectie met humaan papillomavirus (HPV).

Afgezien van de HPV-status is er geen biomarker voor de prognose bij HSNCC-patiënten. Circulerende tumorcellen (CTC's) kunnen "real-time" informatie geven over het gedrag van tumoren en worden al gebruikt bij verschillende kankers (colon, long). Hun detectie heeft een beperkte gevoeligheid en biomarkers kunnen niet worden gebruikt voor vroege diagnose, maar kunnen nuttig zijn tijdens de follow-up om lokale, regionale of gemetastaseerde vroege tumorrecidief te beoordelen.

Door bloedmonsters op verschillende tijdstippen te gebruiken (bij de diagnose, na de initiële behandeling en tijdens de follow-up), kunnen we de variatie in kwantificering meten en een voorspellende rol van deze CTC's vaststellen voor de respons op de behandeling.

Onze hypothese is dat CTC's, naast klinisch en radiologisch onderzoek, een sleutelrol kunnen spelen bij het opsporen van vroege terugval van tumoren.

Wij zijn van mening dat de gezamenlijke overweging van klinische parameters, behandelingsstrategie en kwantificering van CTC's de follow-up en het beheer van patiënten kan optimaliseren.

Het CTC-extractiesysteem, ClearCell® FX van Biolidics, is een geautomatiseerd microfluïdisch verrijkingssysteem. Het heeft het voordeel dat het volledig intacte en levensvatbare CTC's herstelt uit een standaard bloedmonster. Het zachte sorteerprincipe maakt het mogelijk de celintegriteit en dus de expressie van oppervlakte-antigenen te behouden. De aldus geïsoleerde CTC's kunnen vervolgens opnieuw worden gekweekt of worden geanalyseerd door middel van immunokleuring. Deze hoogwaardige techniek, die sinds december 2017 in gebruik is bij de afdeling Biochemie van Pr. Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), heeft zijn nut bij longkanker bewezen.

Transcriptomische analyse van CTC's kan worden uitgevoerd op de schaal van een cel na isolatie van de CTC's. CTC's kunnen vervolgens in RNAseq worden gesequenced, hetzij in bulk (pool van cellen) of cel voor cel op onze Illumina (Nextseq) sequencer, om de heterogeniteit van de tumor te definiëren. Transcriptoomanalyse geeft vervolgens informatie over de toestand van de cel met betrekking tot zijn positie in de epithelio-mesenchymale overgang dankzij een moleculaire signatuur per fenotype. Een priori-vrije karakterisering is daarom mogelijk dankzij de RNAseq single-cell. Deze zeer gevoelige en innovatieve techniek zal de studie van het genexpressieprofiel van CTC's mogelijk maken.