Prospektivní studie prognostické a prediktivní role cirkulujících nádorových buněk u pacientů s orofaryngeálním spinocelulárním karcinomem: CTCO (Circulating Tumor Cells in the Orofaryngu) (CTCO)

Karcinomy hlavy a krku (HNSCC) jsou primárně spinocelulární karcinomy reprezentované nádory horního aerodigestivního traktu. Lokálně pokročilá stádia (stádia III a IV) tvoří 50 až 70 % všech prezentací. Tři hlavní rizikové faktory jsou kouření, alkohol a orofaryngeální infekce lidským papilomavirem (HPV).

Kromě stavu HPV neexistuje žádný biomarker pro prognózu u pacientů s HSNCC. Cirkulující nádorové buňky (CTC) mohou poskytovat informace o chování nádoru „v reálném čase“ a používají se již u různých druhů rakoviny (tlusté střevo, plíce). Jejich detekce má omezenou senzitivitu a biomarkery nelze použít pro časnou diagnostiku, ale mohou být užitečné během sledování k posouzení místní, regionální nebo metastatické časné recidivy nádoru.

Použitím krevních vzorků v různých časech (při diagnóze, po počáteční léčbě a během sledování) budeme schopni měřit variace v kvantifikaci a stanovit prediktivní roli těchto CTC pro odpověď na léčbu.

Naší hypotézou je, že CTC mohou mít klíčovou roli, kromě klinického a radiologického vyšetření, při detekci časného relapsu nádoru.

Věříme, že společné zvážení klinických parametrů, léčebné strategie a kvantifikace CTC by mohlo optimalizovat sledování a léčbu pacientů.

Extrakční systém CTC, ClearCell® FX od Biolidics, je automatizovaný systém mikrofluidního obohacování. Má výhodu v tom, že ze standardního krevního vzorku získává plně intaktní a životaschopné CTC. Jemný princip třídění umožňuje zachovat buněčnou integritu a tím i expresi povrchových antigenů. Takto izolované CTC mohou být poté znovu kultivovány nebo analyzovány imunobarvením. Tato vysoce výkonná technika, která je v provozu od prosince 2017 na Biochemickém oddělení Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), prokázala svou užitečnost u rakoviny plic.

Transkriptomická analýza CTC může být provedena v měřítku buňky po izolaci CTC. CTC pak mohou být sekvenovány v RNAseq buď hromadně (soubor buněk) nebo buňku po buňce na našem sekvenátoru Illumina (Nextseq), aby se definovala heterogenita nádoru. Analýza transkriptomu pak poskytuje informaci o stavu buňky, pokud jde o její pozici v epiteliomezenchymálním přechodu díky molekulárnímu podpisu podle fenotypu. A priori-free charakterizace je tedy možná díky RNAseq jednobuněčné. Tato vysoce citlivá a inovativní technika umožní studium profilu genové exprese CTC.