Prospektiv studie för den prognostiska och prediktiva rollen av cirkulerande tumörceller hos patienter med orofaryngeal skivepitelcancer: CTCO (Cirkulerande tumörceller i orofarynx) (CTCO)

Huvud- och halscancer (HNSCC) är främst skivepitelcancer som representeras av tumörer i den övre matsmältningskanalen. Lokalt avancerade stadier (steg III och IV) står för 50 till 70 % av alla presentationer. De tre huvudsakliga riskfaktorerna är rökning, alkohol och orofaryngeal infektion med humant papillomvirus (HPV).

Förutom HPV-status finns det ingen biomarkör för prognosen hos HSNCC-patienter. Cirkulerande tumörceller (CTC) kan ge "realtids" information om tumörbeteende och används redan i olika cancerformer (tjocktarm, lunga). Deras upptäckt har begränsad känslighet och biomarkörer kan inte användas för tidig diagnos, men kan vara användbara under uppföljning för att bedöma lokal, regional eller metastaserad tidig tumörrecidiv.

Genom att använda blodprover vid olika tidpunkter (vid diagnos, efter initial behandling och under uppföljning) kommer vi att kunna mäta variationen i kvantifiering och fastställa en prediktiv roll för dessa CTC för svaret på behandlingen.

Vår hypotes är att CTC kan ha en nyckelroll, förutom klinisk och radiologisk undersökning, för att upptäcka tidiga tumöråterfall.

Vi tror att ett gemensamt övervägande av kliniska parametrar, behandlingsstrategi och kvantifiering av CTC kan optimera patientuppföljning och hantering.

CTC-extraktionssystemet, ClearCell® FX från Biolidics, är ett automatiserat mikrofluidiskt anrikningssystem. Det har fördelen att återvinna helt intakta och livskraftiga CTC från ett standardblodprov. Den skonsamma sorteringsprincipen gör det möjligt att bevara cellintegriteten och därmed uttrycket av ytantigener. De sålunda isolerade CTC:erna kan sedan återodlas eller analyseras genom immunfärgning. Denna högpresterande teknik, i drift sedan december 2017 i biokemiavdelningen hos Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), har visat sin användbarhet vid lungcancer.

Transkriptomisk analys av CTC kan utföras i en cells skala efter isolering av CTC. CTCs kan sedan sekvenseras i RNAseq antingen i bulk (pool av celler) eller cell för cell på vår Illumina (Nextseq) sekvenserare, för att definiera tumörens heterogenitet. Transkriptomanalys ger sedan information om cellens tillstånd vad gäller dess position i epitel-mesenkymal övergången tack vare en molekylär signatur per fenotyp. En priori-fri karakterisering är därför möjlig tack vare RNAseq-enkelcellen. Denna mycket känsliga och innovativa teknik kommer att möjliggöra studier av genuttrycksprofilen för CTC.