Prospektiv undersøgelse af den prognostiske og prædiktive rolle af cirkulerende tumorceller hos patienter med oropharyngeal pladecellekarcinom: CTCO (Cirkulerende tumorceller i oropharynx) (CTCO)

Hoved- og halscancer (HNSCC) er primært pladecellekræft, der repræsenteres af tumorer i den øvre luftvejskanal. Lokalt avancerede stadier (trin III og IV) tegner sig for 50 til 70 % af alle præsentationer. De tre vigtigste risikofaktorer er rygning, alkohol og orofaryngeal infektion med humant papillomavirus (HPV).

Udover HPV-status er der ingen biomarkør for prognosen hos HSNCC-patienter. Cirkulerende tumorceller (CTC'er) kan give "realtids" information om tumoradfærd og bruges allerede i forskellige kræftformer (tyktarm, lunge). Deres påvisning har begrænset følsomhed, og biomarkører kan ikke bruges til tidlig diagnose, men kan være nyttige under opfølgning for at vurdere lokalt, regionalt eller metastatisk tidligt tumorgenfald.

Ved at bruge blodprøver på forskellige tidspunkter (ved diagnose, efter indledende behandling og under opfølgning), vil vi være i stand til at måle variationen i kvantificering og etablere en prædiktiv rolle for disse CTC'er for responsen på behandlingen.

Vores hypotese er, at CTC'er kan spille en nøglerolle, udover klinisk og radiologisk undersøgelse, i at påvise tidligt tumortilbagefald.

Vi mener, at den fælles overvejelse af kliniske parametre, behandlingsstrategi og kvantificering af CTC'er kunne optimere patientopfølgning og -styring.

CTC-ekstraktionssystemet, ClearCell® FX fra Biolidics, er et automatiseret mikrofluidisk berigelsessystem. Det har den fordel at genvinde fuldstændigt intakte og levedygtige CTC'er fra en standard blodprøve. Det skånsomme sorteringsprincip gør det muligt at bevare celleintegriteten og dermed ekspressionen af ​​overfladeantigener. De således isolerede CTC'er kan derefter gendyrkes eller analyseres ved immunfarvning. Denne højtydende teknik, der har været i drift siden december 2017 i Biochemistry Department of Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), har vist sin anvendelighed ved lungekræft.

Transkriptomisk analyse af CTC'er kan udføres i skalaen af ​​en celle efter isolering af CTC'erne. CTC'er kan derefter sekventeres i RNAseq enten i bulk (pulje af celler) eller celle for celle på vores Illumina (Nextseq) sequencer for at definere tumorens heterogenitet. Transkriptomanalyse giver derefter information om cellens tilstand med hensyn til dens position i den epitel-mesenkymale overgang takket være en molekylær signatur efter fænotype. En priori-fri karakterisering er derfor mulig takket være RNAseq-enkeltcellen. Denne meget følsomme og innovative teknik vil tillade studiet af genekspressionsprofilen for CTC'er.