Contribution de la production d'IgE nasales à la stimulation des IgE systémiques spécifiques à l'allergène lors du contact nasal avec l'allergène

Le nez représente un important et premier site de contact avec les allergènes, à la fois parce qu'il est l'organe le plus fréquemment touché par les symptômes allergiques et aussi parce qu'il joue un rôle important dans la régulation de la production d'IgE et de l'inflammation allergique. La muqueuse nasale agit comme une barrière contre les allergènes intrusifs. Cette fonction barrière peut être perturbée par divers facteurs tels que la fumée de cigarette, une infection à rhinovirus ou à l'interféron-γ. L'exposition à ces facteurs peut entraîner une augmentation de la pénétration des allergènes. Le contact avec des allergènes nasaux chez des sujets sensibilisés entraîne une inflammation nasale allergique et des symptômes. Les chercheurs de cette étude ont précédemment démontré que les niveaux d'IgE spécifiques à l'allergène chez les individus sensibilisés sont fortement stimulés lors du contact nasal avec l'allergène pendant la saison allergène pertinente ou dans des modèles de provocation intranasale bien contrôlés. Cette augmentation des taux d'IgE induite par les allergènes entraîne par conséquent une sensibilité accrue des patients allergiques en termes d'activation des mastocytes et des basophiles médiés par les IgE ainsi que de la présentation de l'antigène facilitée par les IgE via le récepteur d'affinité élevée (FcεRI) ou faible (CD23) pour les IgE. par les cellules présentatrices d'antigène, aux cellules T. Dans ce contexte, les chercheurs ont récemment montré que non seulement les niveaux d'IgE spécifiques à l'allergène eux-mêmes, mais également la capacité de réticulation des complexes formés entre l'IgE et l'allergène dictent l'étendue de l'activation des lymphocytes T médiée par CD23.

L'observation selon laquelle le contact nasal avec un allergène déclenche une augmentation des niveaux d'IgE systémiques spécifiques à l'allergène indique la présence de cellules productrices d'IgE+ localement dans la muqueuse nasale qui peuvent être stimulées lors d'un contact avec un allergène. Cette hypothèse est étayée par les observations suivantes : (A) il existe une preuve que des lymphocytes B et des plasmocytes producteurs d'IgE sont présents dans la muqueuse nasale, mais rien n'a encore été prouvé. (B) Lors d'une provocation ex vivo de biopsies de la muqueuse nasale de patients allergiques, une synthèse locale non seulement de la lignée germinale ε, mais également des transcrits du cercle ε en tant que produits de la synthèse d'IgE matures a été observée. Cependant, la mesure dans laquelle cette production nasale locale d'IgE contribue à la stimulation systémique observée d'IgE et la cinétique sous-jacente de la production d'IgE sont jusqu'à présent inconnues et constituent un objectif important de cette proposition.

De plus, bien qu'une production locale d'IgE ait été observée, la présence des cellules productrices d'IgE elles-mêmes dans la muqueuse nasale n'a jusqu'à présent pas été confirmée. Une raison importante à cela est la difficulté d'identifier sans ambiguïté ces cellules par cytométrie en flux ou microscopie à fluorescence. Dans le passé, plusieurs protocoles de cytométrie en flux étape par étape ont été développés dans le but d'exclure les cellules non pertinentes avant le déclenchement pour les cellules IgE+ B. Cependant, il faut garder à l'esprit que tous les anticorps anti-IgE actuellement utilisés reconnaissent non seulement les IgE de surface présentes sous la forme du récepteur des lymphocytes B mais également liées au CD23. En conséquence, la plupart des études actuelles surestiment la présence de récepteurs de cellules IgE B (BCR) porteurs de cellules B. Cela n'a été démontré que récemment dans une étude de Jimenez-Saiz et al. où les auteurs ont découvert que seulement environ 0,0015% des cellules B portent un BCR IgE. Ici, les auteurs ont utilisé une approche de réaction en chaîne par polymérase (PCR) nichée dans une seule cellule pour valider la nature du BCR après le tri cellulaire basé sur la cytométrie en flux pour les cellules IgE + B en utilisant des protocoles précédemment rapportés. La surestimation est très probablement due à la détection de cellules IgE+ B porteuses d'IgE liées au CD23. Une option pour améliorer la détection par cytométrie en flux pourrait être d'exclure les cellules CD23 positives, mais cela pourrait également conduire à l'exclusion des cellules productrices d'IgE exprimant CD23. Ainsi, la seule alternative pour surmonter cet obstacle est d'utiliser un anticorps anti-IgE qui peut faire la distinction entre les IgE liées au récepteur et les IgE ancrées à la membrane. A cet égard, un anticorps anti-IgE remplissant ces exigences s'est récemment révélé capable d'identifier avec succès les cellules productrices d'IgE. Ainsi, les chercheurs emploieront cette nouvelle stratégie pour identifier les cellules productrices d'IgE aussi bien dans la muqueuse nasale que dans le sang des sujets allergiques.

Dans ce projet, les chercheurs visent à élucider les sites et les caractéristiques de la production d'IgE spécifiques à l'allergène dans une étude à deux bras couvrant un sujet allergique au pollen de bouleau subissant une provocation nasale contrôlée au pollen de bouleau en dehors de la saison (octobre). Dans ce but, les cellules productrices d'IgE dans le sang seront déterminées par cytométrie en flux et les cellules productrices d'IgE dans la muqueuse nasale seront révélées dans des biopsies nasales en utilisant la microscopie confocale. Comprendre les caractéristiques et les emplacements des cellules productrices d'IgE est essentiel pour le développement de futures nouvelles approches thérapeutiques.