Udział nosowej produkcji IgE we wzroście ogólnoustrojowych swoistych dla alergenów IgE po kontakcie z alergenem nosowym

Nos jest ważnym i pierwszym miejscem kontaktu z alergenem, zarówno dlatego, że jest narządem najczęściej dotkniętym objawami alergii, jak i dlatego, że odgrywa ważną rolę w regulacji produkcji IgE i zapalenia alergicznego. Błona śluzowa nosa działa jak bariera przed wnikającymi alergenami. Ta funkcja bariery może być zaburzona przez różne czynniki, takie jak dym papierosowy, infekcja rinowirusem lub interferon-γ. Ekspozycja na te czynniki może prowadzić do zwiększonej penetracji alergenu. Kontakt alergenów donosowych u osób uczulonych prowadzi do alergicznego zapalenia nosa i objawów. Badacze tego badania wykazali wcześniej, że poziomy swoistych dla alergenu IgE u osób uczulonych są silnie zwiększone po kontakcie z alergenem donosowym podczas odpowiedniego sezonu alergenowego lub w dobrze kontrolowanych modelach prowokacji alergenem donosowym. Ten wywołany alergenem wzrost poziomu IgE w konsekwencji prowadzi do zwiększonej wrażliwości pacjentów z alergią w zakresie zależnej od IgE aktywacji komórek tucznych i bazofilów, jak również prezentacji antygenu wspomaganej przez IgE poprzez receptor o wysokim (FcεRI) lub niskim (CD23) powinowactwie do IgE przez komórki prezentujące antygen do limfocytów T. W tym kontekście badacze niedawno wykazali, że nie tylko same poziomy IgE specyficzne dla alergenu, ale także zdolność sieciowania kompleksów utworzonych między IgE i alergenem dyktuje zakres aktywacji limfocytów T za pośrednictwem CD23.

Obserwacja, że ​​kontakt z alergenem w nosie powoduje zwiększenie ogólnoustrojowych poziomów swoistych dla alergenu IgE, wskazuje na lokalną obecność komórek wytwarzających IgE+ w błonie śluzowej nosa, które mogą być stymulowane w kontakcie z alergenem. Hipoteza ta jest poparta następującymi obserwacjami: (A) istnieją dowody na to, że komórki B i komórki plazmatyczne wytwarzające IgE są obecne w błonie śluzowej nosa, ale nic nie zostało jeszcze udowodnione. (B) Po prowokacji ex vivo biopsji błony śluzowej nosa pacjentów z alergią zaobserwowano miejscową syntezę nie tylko linii zarodkowej ε, ale także transkryptów okręgu ε jako produktów syntezy dojrzałych IgE. Jednak do jakiego stopnia ta miejscowa nosowa produkcja IgE przyczynia się do obserwowanego ogólnoustrojowego wzmocnienia IgE i leżącej u podstaw kinetyki produkcji IgE, jest jak dotąd nieznany i jest jednym z ważnych celów tej propozycji.

Ponadto, chociaż zaobserwowano lokalną produkcję IgE, jak dotąd nie potwierdzono obecności samych komórek wytwarzających IgE w błonie śluzowej nosa. Jednym z ważnych powodów jest trudność w jednoznacznej identyfikacji tych komórek za pomocą cytometrii przepływowej lub mikroskopii fluorescencyjnej. W przeszłości opracowano kilka protokołów cytometrii przepływowej krok po kroku w celu wykluczenia nieistotnych komórek przed bramkowaniem dla komórek B IgE+. Należy jednak pamiętać, że wszystkie obecnie stosowane przeciwciała anty-IgE rozpoznają nie tylko powierzchniowe IgE obecne w postaci receptora limfocytów B, ale także związane z CD23. W rezultacie większość obecnych badań przecenia obecność receptora komórek B IgE (BCR) niosącego komórki B. Dopiero niedawno wykazano to w badaniu Jimeneza-Saiza i in. gdzie autorzy stwierdzili, że tylko około 0,0015% komórek B ma IgE BCR. W tym przypadku autorzy zastosowali metodę reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) zagnieżdżonej w pojedynczej komórce, aby zweryfikować charakter BCR po sortowaniu komórek opartym na cytometrii przepływowej dla komórek B IgE + przy użyciu wcześniej zgłoszonych protokołów. Przeszacowanie jest najprawdopodobniej spowodowane wykryciem komórek B IgE+ niosących IgE związane z CD23. Jedną z opcji poprawy wykrywania metodą cytometrii przepływowej mogłoby być wykluczenie komórek CD23-dodatnich, ale mogłoby to również prowadzić do wykluczenia komórek wytwarzających IgE wykazujących ekspresję CD23. Tak więc jedyną alternatywą do pokonania tej przeszkody jest zastosowanie przeciwciała anty-IgE, które może rozróżnić IgE związane z receptorem i zakotwiczone w błonie. Pod tym względem ostatnio wykazano, że przeciwciało anty-IgE spełniające te wymagania skutecznie identyfikuje komórki wytwarzające IgE. W związku z tym badacze wykorzystają tę nową strategię do identyfikacji komórek wytwarzających IgE zarówno w błonie śluzowej nosa, jak i we krwi osób z alergią.

W ramach tego projektu badacze mają na celu wyjaśnienie miejsc i charakterystyki produkcji swoistych dla alergenów IgE w dwuramiennym badaniu obejmującym osoby uczulone na pyłki brzozy, poddane kontrolowanej prowokacji donosowej pyłkiem brzozy poza sezonem (październik). W tym celu komórki wytwarzające IgE we krwi zostaną określone za pomocą cytometrii przepływowej, a komórki wytwarzające IgE w błonie śluzowej nosa zostaną ujawnione w biopsjach nosa za pomocą mikroskopii konfokalnej. Zrozumienie cech i lokalizacji komórek wytwarzających IgE ma kluczowe znaczenie dla rozwoju przyszłych nowych podejść terapeutycznych.