Вклад продукции назального IgE в усиление системного аллерген-специфического IgE при контакте с назальным аллергеном

Нос представляет собой важное и первое место контакта с аллергеном как потому, что это орган, наиболее часто поражаемый аллергическими симптомами, так и потому, что он играет важную роль в регуляции продукции IgE и аллергического воспаления. Слизистая оболочка носа действует как барьер против проникновения аллергенов. Эта барьерная функция может быть нарушена различными факторами, такими как сигаретный дым, риновирусная инфекция или интерферон-γ. Воздействие этих факторов может привести к увеличению проникновения аллергена. Назальный контакт с аллергеном у сенсибилизированных субъектов приводит к аллергическому назальному воспалению и симптомам. Исследователи этого исследования ранее продемонстрировали, что уровни аллерген-специфического IgE у сенсибилизированных людей сильно повышаются при назальном контакте с аллергеном в течение соответствующего сезона аллергенов или в хорошо контролируемых моделях интраназального заражения аллергеном. Это вызванное аллергеном повышение уровня IgE, следовательно, приводит к повышенной чувствительности пациентов с аллергией с точки зрения IgE-опосредованной активации тучных клеток и базофилов, а также IgE-облегченной презентации антигена через рецепторы с высокой (FcεRI) или низкой (CD23) аффинностью к IgE. антигенпредставляющими клетками, Т-клетками. В этом контексте исследователи недавно показали, что не только сами уровни аллерген-специфического IgE, но и способность к перекрестному связыванию комплексов, образующихся между IgE и аллергеном, определяют степень CD23-опосредованной активации Т-клеток.

Наблюдение, что назальный контакт с аллергеном вызывает повышение уровней системных аллерген-специфических IgE, указывает на присутствие клеток, продуцирующих IgE+, локально в слизистой оболочке носа, которые могут стимулироваться при контакте с аллергеном. Эта гипотеза подтверждается следующими наблюдениями: (А) есть доказательства того, что IgE-продуцирующие В-клетки и плазматические клетки присутствуют в слизистой оболочке носа, но пока ничего не доказано. (B) При заражении ex vivo биоптатов слизистой оболочки носа у пациентов с аллергией наблюдался локальный синтез не только ε зародышевой линии, но и транскриптов ε круга как продуктов синтеза зрелого IgE. Однако, в какой степени эта локальная назальная продукция IgE способствует наблюдаемому системному усилению IgE, и основная кинетика продукции IgE до сих пор неизвестна и является одной из важных целей этого предложения.

Кроме того, несмотря на локальную продукцию IgE, присутствие самих клеток, продуцирующих IgE, в слизистой оболочке носа до сих пор не подтверждено. Одной из важных причин этого является сложность однозначной идентификации этих клеток с помощью проточной цитометрии или флуоресцентной микроскопии. В прошлом было разработано несколько пошаговых протоколов проточной цитометрии с целью исключения нерелевантных клеток до выделения IgE+ В-клеток. Однако необходимо иметь в виду, что все используемые в настоящее время анти-IgE-антитела распознают не только поверхностный IgE, присутствующий в форме В-клеточного рецептора, но и связанный с CD23. Как следствие, большинство современных исследований переоценивают наличие В-клеток, несущих IgE В-клеточный рецептор (BCR). Это только недавно было продемонстрировано в исследовании Jimenez-Saiz et al. где авторы обнаружили, что только около 0,0015% В-клеток несут IgE BCR. Здесь авторы использовали подход вложенной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с одной ячейкой для проверки природы BCR после сортировки клеток на основе проточной цитометрии для IgE + B-клеток с использованием ранее опубликованных протоколов. Завышенная оценка, скорее всего, связана с обнаружением IgE+ B-клеток, несущих CD23-связанный IgE. Одним из вариантов улучшения обнаружения с помощью проточной цитометрии может быть исключение CD23-позитивных клеток, но это также может привести к исключению клеток, продуцирующих IgE, экспрессирующих CD23. Таким образом, единственной альтернативой для преодоления этого препятствия является использование анти-IgE-антитела, которое может различать IgE, связанный с рецептором, и IgE, заякоренный на мембране. В этом отношении недавно было показано, что антитело против IgE, отвечающее этим требованиям, успешно идентифицирует клетки, продуцирующие IgE. Таким образом, исследователи будут использовать эту новую стратегию для выявления клеток, продуцирующих IgE, как в слизистой оболочке носа, так и в крови аллергиков.

В этом проекте исследователи стремятся выяснить места и характеристики продукции аллерген-специфического IgE в двухгрупповом исследовании, охватывающем субъектов с аллергией на пыльцу березы, подвергающихся контролируемой назальной провокации пыльцой березы вне сезона (октябрь). С этой целью клетки, продуцирующие IgE, будут определяться в крови с помощью проточной цитометрии, а клетки, продуцирующие IgE, в слизистой оболочке носа будут выявлены в биоптатах носа с помощью конфокальной микроскопии. Понимание характеристик и локализации клеток, продуцирующих IgE, имеет решающее значение для разработки новых терапевтических подходов в будущем.