Contributo della produzione di IgE nasali all'incremento delle IgE sistemiche allergene-specifiche al contatto con gli allergeni nasali

Il naso rappresenta un'importante e prima sede di contatto con gli allergeni, sia perché è l'organo più frequentemente colpito dai sintomi allergici, sia perché svolge un ruolo importante nella regolazione della produzione di IgE e dell'infiammazione allergica. La mucosa nasale funge da barriera contro gli allergeni intrusivi. Questa funzione di barriera può essere perturbata da vari fattori come il fumo di sigaretta, l'infezione da rinovirus o l'interferone-γ. L'esposizione a questi fattori può portare ad una maggiore penetrazione degli allergeni. Il contatto con allergeni nasali in soggetti sensibilizzati porta a infiammazione e sintomi nasali allergici. I ricercatori di questo studio hanno precedentemente dimostrato che i livelli di IgE allergene-specifici in individui sensibilizzati sono fortemente aumentati al contatto con allergeni nasali durante la stagione degli allergeni rilevanti o in modelli di stimolazione con allergeni intranasali ben controllati. Questo aumento dei livelli di IgE indotto da allergeni porta di conseguenza ad una maggiore sensibilità dei pazienti allergici in termini di attivazione dei mastociti IgE-mediata e dei basofili, nonché alla presentazione dell'antigene IgE-facilitata attraverso il recettore ad affinità alta (FcεRI) o bassa (CD23) per le IgE dalle cellule presentanti l'antigene, alle cellule T. In questo contesto, i ricercatori hanno recentemente dimostrato che non solo i livelli di IgE allergene-specifici, ma anche la capacità di reticolazione dei complessi formati tra IgE e allergene determinano l'entità dell'attivazione delle cellule T mediata da CD23.

L'osservazione che il contatto con l'allergene nasale innesca l'aumento dei livelli sistemici di IgE allergene-specifiche indica la presenza di cellule produttrici di IgE+ localmente nella mucosa nasale che possono essere stimolate al contatto con l'allergene. Questa ipotesi è supportata dalle seguenti osservazioni: (A) esiste un'evidenza che le cellule B e le plasmacellule produttrici di IgE siano presenti nella mucosa nasale, ma nulla è stato ancora dimostrato. ( B ) Dopo la sfida ex vivo di biopsie dalla mucosa nasale di pazienti allergici, è stata osservata la sintesi locale non solo della linea germinale ε, ma anche delle trascrizioni del cerchio ε come prodotti della sintesi di IgE mature. Tuttavia, in che misura questa produzione nasale locale di IgE contribuisca al boost sistemico osservato di IgE e la cinetica sottostante della produzione di IgE sono finora sconosciute e sono uno scopo importante di questa proposta.

Inoltre, sebbene sia stata osservata la produzione locale di IgE, la presenza delle stesse cellule produttrici di IgE nella mucosa nasale non è stata finora confermata. Una ragione importante di ciò è la difficoltà di identificare in modo inequivocabile quelle cellule mediante citometria a flusso o microscopia a fluorescenza. In passato sono stati sviluppati diversi protocolli di citometria a flusso passo dopo passo con l'obiettivo di escludere le cellule non rilevanti prima del gating per le cellule B IgE+. Tuttavia, è necessario tenere presente che tutti gli anticorpi anti-IgE attualmente utilizzati riconoscono non solo le IgE di superficie presenti sotto forma del recettore delle cellule B, ma anche quelle legate al CD23. Di conseguenza, la maggior parte degli studi attuali sovrastima la presenza del recettore delle cellule B IgE (BCR) che porta cellule B. Ciò è stato dimostrato solo di recente in uno studio di Jimenez-Saiz et al. dove gli autori hanno scoperto che solo lo 0,0015% circa delle cellule B porta un IgE BCR. Qui gli autori hanno utilizzato un approccio di reazione a catena della polimerasi nidificata a singola cellula (PCR) per convalidare la natura del BCR dopo l'ordinamento cellulare basato sulla citometria a flusso per le cellule IgE + B utilizzando protocolli precedentemente riportati. La sovrastima è molto probabilmente dovuta al rilevamento di cellule B IgE+ contenenti IgE legate al CD23. Un'opzione per migliorare il rilevamento citometrico a flusso potrebbe essere l'esclusione delle cellule CD23 positive, ma ciò potrebbe anche portare all'esclusione delle cellule che producono IgE che esprimono CD23. Pertanto, l'unica alternativa per superare questo ostacolo è utilizzare un anticorpo anti-IgE in grado di distinguere tra IgE legate al recettore e ancorate alla membrana. A questo proposito, è stato recentemente dimostrato che un anticorpo anti-IgE che soddisfa questi requisiti identifica con successo le cellule che producono IgE. Pertanto, i ricercatori impiegheranno questa nuova strategia per identificare le cellule produttrici di IgE sia nella mucosa nasale che nel sangue di soggetti allergici.

In questo progetto, i ricercatori mirano a chiarire i siti e le caratteristiche della produzione di IgE allergene-specifiche in uno studio a due bracci che abbraccia soggetti allergici al polline di betulla sottoposti a sfida nasale controllata al polline di betulla al di fuori della stagione (ottobre). A tale scopo, le cellule produttrici di IgE nel sangue saranno determinate mediante citometria a flusso e le cellule produttrici di IgE nella mucosa nasale saranno rivelate in biopsie nasali mediante microscopia confocale. Comprendere le caratteristiche e le posizioni delle cellule produttrici di IgE è fondamentale per lo sviluppo di futuri nuovi approcci terapeutici.