Contribuição da Produção de IgE Nasal para o Aumento de IgE Sistêmica Alérgeno-específica no Contato com o Alérgeno Nasal

O nariz representa um importante e primeiro local de contato do alérgeno, tanto por ser o órgão mais frequentemente afetado pelos sintomas alérgicos, quanto por desempenhar um papel importante na regulação da produção de IgE e inflamação alérgica. A mucosa nasal atua como uma barreira contra os alérgenos intrusos. Essa função de barreira pode ser perturbada por vários fatores, como fumaça de cigarro, infecção por rinovírus ou interferon-γ. A exposição a esses fatores pode levar ao aumento da penetração do alérgeno. O contato com o alérgeno nasal em indivíduos sensibilizados leva a sintomas e inflamação nasal alérgica. Os investigadores deste estudo demonstraram anteriormente que os níveis de IgE específica do alérgeno em indivíduos sensibilizados são fortemente aumentados após o contato nasal do alérgeno durante a estação do alérgeno relevante ou em modelos de provocação de alérgeno intranasal bem controlados. Este aumento induzido por alérgenos nos níveis de IgE, consequentemente, leva a um aumento da sensibilidade de pacientes alérgicos em termos de ativação de mastócitos e basófilos mediada por IgE, bem como apresentação de antígeno facilitada por IgE por meio do receptor de afinidade alta (FcεRI) ou baixa (CD23) para IgE por células apresentadoras de antígeno, para células T. Neste contexto, os investigadores demonstraram recentemente que não apenas os próprios níveis de IgE específica do alergénio, mas também a capacidade de reticulação dos complexos formados entre a IgE e o alergénio ditam a extensão da ativação das células T mediada por CD23.

A observação de que o contato nasal com o alérgeno desencadeia o aumento dos níveis sistêmicos de IgE específica para o alérgeno indica a presença de células produtoras de IgE+ localmente na mucosa nasal, que podem ser estimuladas pelo contato com o alérgeno. Essa hipótese é corroborada pelas seguintes observações: (A) há evidências de que células B e plasmócitos produtoras de IgE estão presentes na mucosa nasal, mas nada foi comprovado ainda. (B) Após desafio ex vivo de biópsias da mucosa nasal de pacientes alérgicos, foi observada a síntese local não apenas da linha germinativa ε, mas também dos transcritos circulares ε como produtos da síntese de IgE madura. No entanto, até que ponto essa produção nasal local de IgE contribui para o aumento sistêmico observado de IgE e a cinética subjacente da produção de IgE é até agora desconhecida e é um objetivo importante desta proposta.

Além disso, embora a produção local de IgE tenha sido observada, a presença das próprias células produtoras de IgE na mucosa nasal não foi confirmada até agora. Uma razão importante para isso é a dificuldade de identificar inequivocamente essas células por citometria de fluxo ou microscopia de fluorescência. No passado, vários protocolos de citometria de fluxo passo a passo foram desenvolvidos com o objetivo de excluir células não relevantes antes do gating para células B IgE+. No entanto, deve-se ter em mente que todos os anticorpos anti-IgE usados ​​atualmente reconhecem não apenas a IgE de superfície presente na forma do receptor da célula B, mas também ligada ao CD23. Como consequência, a maioria dos estudos atuais superestima a presença de células B portadoras de receptor de células B de IgE (BCR). Isso só recentemente foi demonstrado em um estudo de Jimenez-Saiz et al. onde os autores descobriram que apenas cerca de 0,0015% das células B carregam um IgE BCR. Aqui, os autores empregaram uma abordagem de reação em cadeia da polimerase (PCR) aninhada de célula única para validar a natureza do BCR após a classificação de células baseada em citometria de fluxo para células IgE+ B usando protocolos relatados anteriormente. A superestimação é mais provável devido à detecção de células B IgE+ portadoras de IgE ligada a CD23. Uma opção para melhorar a detecção por citometria de fluxo poderia ser a exclusão de células CD23 positivas, mas isso também poderia levar à exclusão de células produtoras de IgE que expressam CD23. Assim, a única alternativa para superar esse obstáculo é usar um anticorpo anti-IgE que possa distinguir entre IgE ligada ao receptor e IgE ancorada na membrana. A este respeito, foi recentemente demonstrado que um anticorpo anti-IgE que preenche estes requisitos identifica com sucesso as células produtoras de IgE. Assim, os investigadores irão empregar esta nova estratégia para identificar células produtoras de IgE tanto na mucosa nasal quanto no sangue de indivíduos alérgicos.

Neste projeto, os pesquisadores pretendem elucidar os locais e as características da produção de IgE específica para alérgenos em um estudo de dois braços abrangendo indivíduos alérgicos ao pólen de bétula submetidos a desafio controlado com pólen de bétula nasal fora da estação (outubro). Para tanto, células produtoras de IgE no sangue serão determinadas por citometria de fluxo e células produtoras de IgE na mucosa nasal serão reveladas em biópsias nasais por microscopia confocal. Compreender as características e localizações das células produtoras de IgE é fundamental para o desenvolvimento de futuras novas abordagens terapêuticas.