Réduction de la cytotoxicité spécifique des oligodendrocytes et traitement à l'ofatumumab

Contexte et justification:

Le rôle des lymphocytes B dans la pathogenèse de la sclérose en plaques (SEP) n'est pas encore entièrement compris, mais des études ont montré que : 1) la synthèse intrathécale d'immunoglobuline peut être détectée dans le liquide céphalo-rachidien de > 90 % des patients atteints de SEP ; 2) il existe de multiples populations de lymphocytes B à expansion clonale dans les lésions cérébrales chroniques de la SEP ; 3) des follicules lymphoïdes ectopiques contenant des lymphocytes B en prolifération ont été identifiés dans les méninges de patients atteints de SEP progressive secondaire ; et 4) il a été démontré que les thérapies de déplétion anti-cellules B ont des avantages cliniques dans la SEP. En plus de ces découvertes, il a été démontré que les lymphocytes B :

• Sécréter des auto-anticorps.
• Servir de cellules présentatrices d'antigène.
• Faciliter l'activation des lymphocytes T.
• Contribue au micro-environnement par la sécrétion locale de médiateurs immunitaires tels que les cytokines et les chimiokines.

Il est important que les chercheurs non seulement comprennent les effets cliniques de la déplétion des lymphocytes B, mais aussi, et surtout, qu'ils comprennent les mécanismes d'action en cours après le traitement par Ofatumumab. Plus précisément, comment les populations de leucocytes pathogènes restantes, telles que les lymphocytes T, les monocytes, les neutrophiles et les cellules tueuses naturelles (NK) sont modulées indirectement par l'ofatumumab de sorte qu'elles peuvent être moins pathogènes pour la population d'oligodendrocytes myélinisants.

L'ofatumumab est un anticorps monoclonal humain anti-CD20 qui a démontré son efficacité pour réduire les taux de rechute, l'activité de l'imagerie par résonance magnétique (IRM) et les niveaux de lumière des neurofilaments (NF-L), ainsi que des réductions significatives de l'aggravation de l'invalidité confirmée chez les patients atteints de formes récurrentes de SEP. .

Le(s) rôle(s) exact(s) des lymphocytes B dans la pathogenèse de la SEP ne sont pas encore clairs à l'heure actuelle, tout comme les événements qui conduisent à la mort et au dysfonctionnement des oligodendrocytes. Les oligodendrocytes sont les cellules myélinisantes du système nerveux central (SNC), et la démyélinisation et la mort des oligodendrocytes sont des événements critiques dans le processus pathologique de la SEP. À l'heure actuelle, aucun traitement médicamenteux contre la SEP actuellement approuvé ne vise à protéger directement contre la perte et le dysfonctionnement des oligodendrocytes ou à améliorer la réparation du SNC. Les études proposées dans cette demande sont nouvelles dans la mesure où les effets du traitement à l'ofatumumab dans la SEP n'ont pas été étudiés auparavant dans les populations d'oligodendrocytes ou de cellules progénitrices d'oligodendrocytes (OPC). Les résultats de cette étude pourraient identifier un mode d'action supplémentaire du traitement à l'ofatumumab, avec des effets qui pourraient indirectement bénéficier au SNC.

Objectifs spécifiques :

Pour cette étude, les chercheurs proposent que le mécanisme d'action à long terme associé aux résultats cliniques bénéfiques du traitement par l'ofatumumab dans la SEP n'est pas seulement dû à l'effet direct de l'élimination des lymphocytes B circulants, mais également à l'altération ultérieure de l'homéostasie immunitaire avec une réduction accompagnée des produits de sécrétion cytotoxiques des sous-ensembles de leucocytes, y compris les cellules T, les monocytes, les neutrophiles et les cellules NK. L'étude a deux objectifs spécifiques :

Pour l'objectif spécifique 1 (objectif principal), les enquêteurs détermineront si les solutés sécrétés par les lymphocytes T, les monocytes, les neutrophiles ou les cellules NK isolés de patients atteints de formes récurrentes-rémittentes de SEP après 6 mois (M06) de traitement par Ofatumumab sont moins toxiques pour la souris. -dérivés d'oligodendrocytes et de leur descendance (OPC) que de solutés sécrétés par les mêmes sous-populations de leucocytes prélevés avant traitement (M00 naïfs de médicament). Dans cet objectif, le résultat principal sera d'évaluer les mesures de la mort des oligodendrocytes et des OPC, et du dysfonctionnement mitochondrial.

Pour l'objectif spécifique 2 (objectif exploratoire), les enquêteurs identifieront le ou les facteurs responsables de l'induction du stress des oligodendrocytes et des OPC (en comparant les échantillons de surnageant M06 à M00) en utilisant d'abord une approche de réseau de cytokines suivie, si nécessaire, d'une électrophorèse 2D LC -Approche protéomique MS. Les chercheurs effectueront également des analyses supplémentaires qui exploreront les réponses altérées de la microglie et des astrocytes après un traitement avec des solutés sécrétés par des sous-populations de leucocytes à M00 et M06 chez des patients atteints de SEP.

Population étudiée :

Pour cette étude longitudinale prospective, les chercheurs recruteront 20 patients atteints de SEP récurrente-rémittente (RR-MS) cliniquement définie (telle que définie par les critères révisés de McDonald) qui seront traités avec Ofatumumab (Kesimpta). Les enquêteurs recruteront également 20 sujets témoins sains (HC). Pour ces études, les patients RR-MS serviront de leur propre contrôle interne et les investigateurs compareront les changements au fil du temps sous Ofatumumab avec les mesures de pré-traitement. De plus, les échantillons de patients atteints de RR-MS seront comparés aux surnageants de sous-populations de leucocytes témoins sains. Tous les patients RR-MS se verront prescrire et traiter avec Ofatumumab dans le cadre de leur norme de soins de la part de leur fournisseur traitant, à l'exception des sujets HC qui ne reçoivent aucun traitement.

Procédures et collecte de données :

Tous les patients atteints de RR-MS seront sélectionnés parmi ceux actuellement vus par des médecins du Multiple Sclerosis Comprehensive Care Center de l'Université de Californie du Sud (USC) Keck School of Medicine ou du LAC+USC Medical Center, Multiple Sclerosis Clinic, et pour qui le médecin a déjà estimé que l'ofatumumab serait une alternative thérapeutique logique. Les investigateurs n'évalueront pas l'éligibilité au traitement par l'ofatumumab comme critère d'inclusion dans cet essai initié par l'investigateur (IIT). Les enquêteurs s'attendent à recruter des sujets sur une phase de recrutement de 10 à 12 mois. Les enquêteurs s'attendent à ce que le dernier échantillon de patient soit prélevé 18 mois après le début de l'étude avec une analyse finale des données achevée 27 mois après le début de l'étude. Pour la cohorte d'Ofatumumab, les investigateurs prélèveront environ 80 ml de sang des patients inscrits à M00 (ligne de base, naïfs au médicament) et prélèveront 80 ml de sang supplémentaires à M06 (mois 5-6 avant l'injection d'Ofatumumab de 6 mois). Pour la cohorte HC, les enquêteurs prélèveront environ 80 ml de sang des sujets inscrits à un seul moment. Des échantillons de sang seront traités et des sous-populations de leucocytes isolées pour la culture.