Reducción de la citotoxicidad específica de oligodendrocitos y tratamiento con ofatumumab

Antecedentes y justificación:

El papel de las células B en la patogenia de la esclerosis múltiple (EM) aún no se comprende por completo; sin embargo, los estudios han demostrado que: 1) la síntesis intratecal de inmunoglobulina puede detectarse en el líquido cefalorraquídeo de >90 % de los pacientes con EM; 2) hay múltiples poblaciones de células B expandidas clonalmente en lesiones cerebrales crónicas de EM; 3) se han identificado folículos linfoides ectópicos que contienen células B en proliferación dentro de las meninges de pacientes con EM progresiva secundaria; y 4) se ha demostrado que las terapias de reducción de células anti-B tienen un beneficio clínico en la EM. Además de estos hallazgos, se ha demostrado que las células B:

• Secretan autoanticuerpos.
• Sirven como células presentadoras de antígenos.
• Facilitar la activación de las células T.
• Contribuye al microambiente mediante la secreción local de mediadores inmunitarios como citocinas y quimiocinas.

Es importante que los investigadores no solo comprendan los efectos clínicos del agotamiento de las células B, sino también, de manera crítica, que los investigadores comprendan los mecanismos de acción en curso después del tratamiento con ofatumumab. Específicamente, cómo las poblaciones restantes de leucocitos patógenos, como las células T, los monocitos, los neutrófilos y las células asesinas naturales (NK), son moduladas indirectamente por Ofatumumab de modo que pueden ser menos patogénicas para la población de oligodendrocitos mielinizantes.

Ofatumumab es un anticuerpo monoclonal humano anti-CD20 que ha demostrado eficacia en la reducción de las tasas de recaída, la actividad de imágenes por resonancia magnética (IRM) y los niveles de neurofilamento de luz (NF-L), así como reducciones significativas en el empeoramiento de la discapacidad confirmada en pacientes con formas recurrentes de EM .

La(s) función(es) exacta(s) de las células B en la patogénesis de la EM aún no están claras en la actualidad, al igual que los eventos que conducen a la muerte y disfunción de los oligodendrocitos. Los oligodendrocitos son las células mielinizantes del sistema nervioso central (SNC), y la desmielinización y la muerte de los oligodendrocitos son eventos críticos en el proceso de la enfermedad de la EM. En la actualidad, ninguna de las terapias farmacológicas para la EM actualmente aprobadas está dirigida a la protección directa contra la pérdida y disfunción de oligodendrocitos o dirigida a mejorar la reparación del SNC. Los estudios propuestos en esta solicitud son novedosos porque los efectos del tratamiento con Ofatumumab en la EM no se han estudiado previamente en poblaciones de oligodendrocitos o de células progenitoras de oligodendrocitos (OPC). Los resultados de este estudio podrían identificar un modo de acción adicional del tratamiento con Ofatumumab, con efectos que podrían beneficiar indirectamente al SNC.

Objetivos específicos:

Para este estudio, los investigadores proponen que el mecanismo de acción a largo plazo asociado con los resultados clínicos beneficiosos de la terapia con Ofatumumab en la EM no solo se debe al efecto directo de eliminar las células B circulantes, sino también a la alteración posterior en homeostasis inmune con una reducción acompañada de productos secretores citotóxicos de subconjuntos de leucocitos que incluyen células T, monocitos, neutrófilos y células NK. El estudio tiene dos objetivos específicos:

Para el objetivo específico 1 (objetivo principal), los investigadores determinarán si los solutos secretados por las células T, los monocitos, los neutrófilos o las células NK aisladas de pacientes con formas de EM remitente-recurrente después de 6 meses (M06) de tratamiento con ofatumumab son menos tóxicos para los ratones. -oligodendrocitos derivados y su progenie (OPC) que solutos secretados por las mismas subpoblaciones de leucocitos recolectados antes del tratamiento (medicamento M00 sin tratamiento previo). En este objetivo, el resultado primario será evaluar las medidas de muerte de oligodendrocitos y OPC, y la disfunción mitocondrial.

Para el objetivo específico 2 (objetivo exploratorio), los investigadores identificarán los factores responsables de inducir el estrés de los oligodendrocitos y OPC (comparando muestras de sobrenadante M06 con M00) utilizando en primer lugar un enfoque de matriz de citoquinas seguido, si es necesario, por una electroforesis LC 2D. -Enfoque proteómico MS. Los investigadores también realizarán análisis adicionales que explorarán las respuestas microgliales y de astrocitos alteradas después del tratamiento con solutos secretados por subpoblaciones de leucocitos en M00 y M06 en pacientes con EM.

Población de estudio:

Para este estudio longitudinal prospectivo, los investigadores reclutarán a 20 pacientes con EM remitente-recurrente (EM-RR) clínicamente definida (según la definición de los criterios revisados ​​de McDonald) que serán tratados con Ofatumumab (Kesimpta). Los investigadores también reclutarán 20 sujetos de control sanos (HC). Para estos estudios, los pacientes con EM-RR servirán como su propio control interno y los investigadores compararán los cambios a lo largo del tiempo con Ofatumumab con las medidas previas al tratamiento. Además, las muestras de pacientes con EM-RR se compararán con sobrenadantes de subpoblaciones de leucocitos de control sanos. A todos los pacientes con EM-RR se les recetará y tratará con Ofatumumab como parte de su estándar de atención por parte de su proveedor tratante, con la excepción de los sujetos HC que no reciben tratamiento.

Procedimientos y Recopilación de Datos:

Todos los pacientes con EM-RR serán seleccionados entre aquellos que están siendo atendidos actualmente por médicos en el Centro de Atención Integral de Esclerosis Múltiple de la Facultad de Medicina Keck de la Universidad del Sur de California (USC) o el Centro Médico LAC+USC, Clínica de Esclerosis Múltiple, y para quienes el El médico ya ha considerado que Ofatumumab sería una alternativa de tratamiento lógica. Los investigadores no evaluarán la elegibilidad para el tratamiento con ofatumumab como criterio de inclusión en este ensayo iniciado por el investigador (IIT). Los investigadores esperan inscribir a los sujetos durante una fase de reclutamiento de 10 a 12 meses. Los investigadores esperan que la muestra del último paciente se recolecte 18 meses después del comienzo del estudio y que el análisis final de los datos se complete 27 meses después del comienzo del estudio. Para la cohorte de Ofatumumab, los investigadores recolectarán ~80 ml de sangre de los pacientes inscritos en M00 (línea de base, sin tratamiento previo con el fármaco), y recolectarán 80 ml más de sangre en M06 (meses 5-6 antes de la inyección de Ofatumumab de 6 meses). Para la cohorte HC, los investigadores recolectarán ~80 ml de sangre de los sujetos inscritos en un solo momento. Se procesarán muestras de sangre y se aislarán subpoblaciones de leucocitos para cultivo.