Zmniejszona cytotoksyczność specyficzna dla oligodendrocytów i leczenie ofatumumabem

Tło i uzasadnienie:

Rola limfocytów B w patogenezie stwardnienia rozsianego (SM) wciąż nie jest w pełni poznana, jednak badania wykazały, że: 1) dokanałową syntezę immunoglobulin można wykryć w płynie mózgowo-rdzeniowym >90% pacjentów z SM; 2) w przewlekłych uszkodzeniach mózgu stwardnienia rozsianego występuje wiele klonalnie namnożonych populacji komórek B; 3) ektopowe pęcherzyki limfoidalne zawierające proliferujące komórki B zostały zidentyfikowane w oponach mózgowych pacjentów z wtórnie postępującym SM; i 4) wykazano, że terapie zmniejszające liczbę limfocytów B przynoszą korzyści kliniczne w SM. Oprócz tych wyników wykazano, że komórki B:

• Wydzielają autoprzeciwciała.
• Służą jako komórki prezentujące antygen.
• Ułatwiają aktywację komórek T.
• Przyczyniają się do mikrośrodowiska poprzez lokalne wydzielanie mediatorów odpornościowych, takich jak cytokiny i chemokiny.

Ważne jest, aby badacze nie tylko rozumieli kliniczne skutki deplecji limfocytów B, ale także, co najważniejsze, aby badacze rozumieli trwające mechanizmy działania po leczeniu Ofatumumabem. W szczególności, w jaki sposób Ofatumumab pośrednio moduluje pozostałe patogenne populacje leukocytów, takie jak komórki T, monocyty, neutrofile i komórki NK, tak że mogą być mniej patogenne dla populacji mielinizujących oligodendrocytów.

Ofatumumab jest ludzkim przeciwciałem monoklonalnym anty-CD20, które wykazało skuteczność w zmniejszaniu częstości nawrotów, aktywności obrazowania metodą rezonansu magnetycznego (MRI) i poziomów światła neurofilamentów (NF-L), a także znacznego zmniejszenia potwierdzonego pogorszenia niesprawności u pacjentów z nawracającymi postaciami stwardnienia rozsianego .

Dokładna rola (role) komórek B w patogenezie stwardnienia rozsianego jest nadal niejasna, podobnie jak zdarzenia, które prowadzą do śmierci i dysfunkcji oligodendrocytów. Oligodendrocyty to komórki mielinizujące ośrodkowego układu nerwowego (OUN), a demielinizacja i śmierć oligodendrocytów to krytyczne zdarzenia w procesie chorobowym SM. Obecnie żadna obecnie zatwierdzona terapia lekowa SM nie jest ukierunkowana na bezpośrednią ochronę przed utratą i dysfunkcją oligodendrocytów ani na poprawę naprawy OUN. Proponowane badania w tym zgłoszeniu są nowatorskie pod tym względem, że efekty leczenia ofatumumabem w SM nie były wcześniej badane w populacjach oligodendrocytów lub komórek progenitorowych oligodendrocytów (OPC). Wyniki tego badania mogą zidentyfikować dodatkowy sposób działania leczenia Ofatumumabem, z efektami, które mogą pośrednio przynieść korzyści OUN.

Cele szczegółowe:

W tym badaniu badacze proponują, że długoterminowy mechanizm działania związany z korzystnymi wynikami klinicznymi terapii Ofatumumabem w SM wynika nie tylko z bezpośredniego efektu usunięcia krążących komórek B, ale także z późniejszej zmiany w homeostazy immunologicznej z towarzyszącą redukcją cytotoksycznych produktów wydzielniczych z podzbiorów leukocytów, w tym limfocytów T, monocytów, neutrofili i komórek NK. Badanie ma dwa szczegółowe cele:

W celu szczegółowym 1 (cel główny) badacze określą, czy substancje rozpuszczone wydzielane przez limfocyty T, monocyty, neutrofile lub komórki NK wyizolowane od pacjentów z rzutowo-remisyjną postacią stwardnienia rozsianego po 6 miesiącach (M06) leczenia Ofatumumabem są mniej toksyczne dla myszy -pochodne oligodendrocytów i ich potomstwa (OPC) niż substancje rozpuszczone wydzielane przez te same subpopulacje leukocytów zebrane przed leczeniem (M00 lek naiwny). W tym celu głównym wynikiem będzie ocena miar śmierci oligodendrocytów i OPC oraz dysfunkcji mitochondriów.

W celu szczegółowym 2 (cel badawczy) badacze zidentyfikują czynnik (czynniki) odpowiedzialny(e) za indukowanie stresu oligodendrocytów i OPC (porównanie próbek supernatantu M06 z M00), najpierw stosując podejście z macierzą cytokin, a następnie, w razie potrzeby, 2D-elektroforeza LC -MS podejście proteomiczne. Badacze przeprowadzą również dodatkowe analizy, które zbadają zmienione odpowiedzi mikrogleju i astrocytów po leczeniu substancjami rozpuszczonymi wydzielanymi z subpopulacji leukocytów w M00 i M06 u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym.

Badana populacja:

Do tego prospektywnego badania podłużnego badacze zrekrutują 20 pacjentów z klinicznie pewnym rzutowo-remisyjnym SM (RR-MS) (zgodnie z definicją poprawionych kryteriów McDonalda), którzy będą leczeni ofatumumabem (Kesimpta). Badacze zwerbują również 20 zdrowych osób z grupy kontrolnej (HC). W tych badaniach pacjenci z RR-MS będą służyć jako ich własna kontrola wewnętrzna, a badacze będą porównywać zmiany w czasie na ofatumumabie z pomiarami przed leczeniem. Ponadto próbki pacjentów z RR-MS zostaną porównane z supernatantami zdrowych kontrolnych subpopulacji leukocytów. Wszystkim pacjentom z RR-MS zostanie przepisany Ofatumumab i będzie on leczony w ramach standardowej opieki zapewnianej przez lekarza, z wyjątkiem pacjentów z HC, którzy nie otrzymują żadnego leczenia.

Procedury i gromadzenie danych:

Wszyscy pacjenci z RR-MS zostaną wybrani spośród tych, którzy są obecnie leczeni przez lekarzy w Centrum Kompleksowej Opieki Ze Stwardnieniem Rozsianym na Uniwersytecie Południowej Kalifornii (USC) Keck School of Medicine lub Centrum Medycznym LAC+USC, Klinice Stwardnienia Rozsianego, i dla których lekarz już uznał Ofatumumab za logiczną alternatywę leczenia. Badacze nie będą oceniać kwalifikowalności do leczenia ofatumumabem jako kryterium włączenia do tego badania zainicjowanego przez badacza (IIT). Badacze spodziewają się zapisów pacjentów w ciągu 10-12 miesięcy fazy rekrutacji. Badacze spodziewają się, że ostatnia próbka pacjenta zostanie pobrana 18 miesięcy po rozpoczęciu badania, a ostateczna analiza danych zostanie zakończona 27 miesięcy po rozpoczęciu badania. W przypadku kohorty Ofatumumabu badacze pobiorą ~80 ml krwi od włączonych pacjentów w M00 (poziom wyjściowy, nieleczony) i pobiorą kolejne 80 ml krwi w M06 (miesiące 5-6 przed 6-miesięcznym wstrzyknięciem Ofatumumabu). W przypadku kohorty HC badacze pobiorą ~80 ml krwi od włączonych pacjentów tylko w jednym punkcie czasowym. Próbki krwi zostaną przetworzone, a subpopulacje leukocytów zostaną wyizolowane do hodowli.