Citotoxicidade específica de oligodendrócitos reduzida e tratamento com ofatumumabe

Antecedentes e Justificativa:

O papel das células B na patogênese da esclerose múltipla (EM) ainda não é totalmente compreendido, no entanto, estudos mostraram que: 1) a síntese intratecal de imunoglobulina pode ser detectada no líquido cefalorraquidiano de > 90% dos pacientes com EM; 2) existem múltiplas populações de células B clonalmente expandidas em lesões cerebrais crônicas de EM; 3) folículos linfóides ectópicos contendo células B em proliferação foram identificados nas meninges de pacientes com EM progressiva secundária; e 4) as terapias de depleção de células anti-B demonstraram ter benefícios clínicos na EM. Além dessas descobertas, as células B demonstraram:

• Secretam autoanticorpos.
• Servem como células apresentadoras de antígenos.
• Facilita a ativação das células T.
• Contribui para o microambiente pela secreção local de mediadores imunológicos, como citocinas e quimiocinas.

É importante que os investigadores não apenas entendam os efeitos clínicos da depleção de células B, mas também, fundamentalmente, que os investigadores entendam os mecanismos de ação contínuos após o tratamento com Ofatumumabe. Especificamente, como as populações de leucócitos patogênicos remanescentes, como células T, monócitos, neutrófilos e células assassinas naturais (NK) são moduladas indiretamente pelo Ofatumumabe, de modo que possam ser menos patogênicas para a população de oligodendrócitos mielinizantes.

Ofatumumab é um anticorpo monoclonal humano anti-CD20 que demonstrou eficácia na redução das taxas de recaída, atividade de ressonância magnética (MRI) e níveis de neurofilamento leve (NF-L), bem como reduções significativas no agravamento da incapacidade confirmada em pacientes com formas recidivantes de EM .

O(s) papel(is) exato(s) das células B na patogênese da EM ainda não está claro no momento, assim como os eventos que levam à morte e disfunção dos oligodendrócitos. Os oligodendrócitos são as células mielinizantes do sistema nervoso central (SNC), e a desmielinização e a morte dos oligodendrócitos são eventos críticos no processo patológico da EM. No momento, nenhuma terapia medicamentosa para EM atualmente aprovada é direcionada para a proteção direta contra a perda e disfunção de oligodendrócitos ou destinada a melhorar o reparo do SNC. Os estudos propostos neste pedido são novos porque o(s) efeito(s) do tratamento com Ofatumumab na EM não foi(são) previamente estudado(s) em populações de oligodendrócitos ou células progenitoras de oligodendrócitos (OPC). Os resultados deste estudo podem identificar um modo de ação adicional do tratamento com Ofatumumabe, com efeitos que podem beneficiar indiretamente o SNC.

Objetivos Específicos:

Para este estudo, os investigadores propõem que o mecanismo de ação a longo prazo associado aos resultados clínicos benéficos da terapia com Ofatumumab na EM não se deve apenas ao efeito direto da remoção de células B circulantes, mas também à alteração subsequente na homeostase imune com uma redução acompanhada de produtos secretores citotóxicos de subconjuntos de leucócitos, incluindo células T, monócitos, neutrófilos e células NK. O estudo tem dois objetivos específicos:

Para o Objetivo Específico 1 (objetivo primário), os investigadores determinarão se os solutos secretados por células T, monócitos, neutrófilos ou células NK isoladas de pacientes com formas remitentes-recorrentes de EM após 6 meses (M06) de tratamento com Ofatumumabe são menos tóxicos para camundongos -oligodendrócitos derivados e sua progênie (OPC) do que solutos secretados pelas mesmas subpopulações de leucócitos coletados antes do tratamento (M00 droga virgem). Neste objetivo, o desfecho primário será avaliar as medidas de morte de oligodendrócitos e OPC e disfunção mitocondrial.

Para o Objetivo Específico 2 (objetivo exploratório), os investigadores identificarão o(s) fator(es) responsável(is) pela indução de estresse de oligodendrócitos e OPC (comparando amostras de sobrenadante M06 com M00) usando primeiro uma abordagem de matriz de citocinas seguida, se necessário, por uma LC de eletroforese 2D Abordagem proteômica -MS. Os investigadores também realizarão análises adicionais que explorarão as respostas microgliais e astrócitos alteradas após o tratamento com solutos secretados de subpopulações de leucócitos em M00 e M06 em pacientes com EM.

População do estudo:

Para este estudo longitudinal prospectivo, os investigadores recrutarão 20 pacientes com EM remitente-recorrente (RR-MS) clinicamente definida (conforme definido pelos critérios revisados ​​de McDonald) que serão tratados com ofatumumabe (Kesimpta). Os investigadores também recrutarão 20 indivíduos saudáveis ​​de controle (HC). Para esses estudos, os pacientes com EM-RR servirão como seu próprio controle interno e os investigadores compararão as mudanças ao longo do tempo no Ofatumumab com as medidas pré-tratamento. Além disso, amostras de pacientes com RR-MS serão comparadas com sobrenadantes de subpopulações de leucócitos de controle saudáveis. Todos os pacientes com RR-MS serão prescritos e tratados com ofatumumabe como parte do tratamento padrão de seu provedor de tratamento, com exceção dos indivíduos com HC que não recebem tratamento.

Procedimentos e coleta de dados:

Todos os pacientes com EM-RR serão selecionados entre aqueles atualmente sendo atendidos por médicos no Multiple Sclerosis Comprehensive Care Center na University of Southern California (USC) Keck School of Medicine ou no LAC+USC Medical Center, Multiple Sclerosis Clinic, e para quem o O médico já considerou que o ofatumumabe seria uma alternativa lógica de tratamento. Os investigadores não avaliarão a elegibilidade para o tratamento com ofatumumabe como critério de inclusão neste estudo iniciado pelo investigador (IIT). Os investigadores esperam inscrever os participantes durante uma fase de recrutamento de 10 a 12 meses. Os investigadores esperam que a última amostra do paciente seja coletada 18 meses após o início do estudo, com a análise final dos dados concluída 27 meses após o início do estudo. Para a coorte de ofatumumabe, os investigadores coletarão aproximadamente 80 ml de sangue de pacientes inscritos em M00 (linha de base, sem uso do medicamento) e coletarão mais 80 ml de sangue em M06 (meses 5-6 antes da injeção de ofatumumabe de 6 meses). Para a coorte HC, os investigadores coletarão aproximadamente 80 ml de sangue de indivíduos inscritos em apenas um ponto de tempo. Amostras de sangue serão processadas e subpopulações de leucócitos isoladas para cultura.