Snížená cytotoxicita specifická pro oligodendrocyty a léčba ofatumumabem

Pozadí a zdůvodnění:

Úloha B-buněk v patogenezi roztroušené sklerózy (RS) stále není plně objasněna, nicméně studie ukázaly, že: 1) intratekální syntézu imunoglobulinu lze detekovat v mozkomíšním moku > 90 % pacientů s RS; 2) existuje mnohočetné klonálně expandované populace B-buněk v chronických lézích mozku MS; 3) ektopické lymfoidní folikuly obsahující proliferující B-buňky byly identifikovány v mozkových plenách pacientů se sekundární progresivní RS; a 4) anti-B buněčná depleční terapie se ukázala jako klinický přínos u RS. Kromě těchto zjištění bylo prokázáno, že B-buňky:

• Vylučovat autoprotilátky.
• Slouží jako buňky prezentující antigen.
• Usnadněte aktivaci T-buněk.
• Přispívejte k mikroprostředí lokální sekrecí imunitních mediátorů, jako jsou cytokiny a chemokiny.

Je důležité, aby vyšetřovatelé chápali nejen klinické účinky deplece B-buněk, ale také, kriticky, aby vyšetřovatelé chápali probíhající mechanismy účinku po léčbě Ofatumumabem. Konkrétně, jak jsou zbývající patogenní populace leukocytů, jako jsou T-buňky, monocyty, neutrofily a přirozené zabíječské (NK) buňky, nepřímo modulovány Ofatumumabem, takže mohou být méně patogenní pro populaci myelinizačních oligodendrocytů.

Ofatumumab je lidská monoklonální protilátka proti CD20, která prokázala účinnost při snižování četnosti relapsů, aktivity magnetické rezonance (MRI) a hladin neurofilamentového světla (NF-L), jakož i významného snížení potvrzeného zhoršení invalidity u pacientů s recidivujícími formami RS .

Přesná role (úlohy) B lymfocytů v patogenezi RS je v současnosti stále nejasná, stejně jako události, které vedou ke smrti a dysfunkci oligodendrocytů. Oligodendrocyty jsou myelinizační buňky centrálního nervového systému (CNS) a demyelinizace a smrt oligodendrocytů jsou kritickými událostmi v procesu onemocnění RS. V současnosti nejsou žádné současné schválené léky proti RS zaměřeny na přímou ochranu proti ztrátě oligodendrocytů a dysfunkci nebo zaměřené na posílení opravy CNS. Navrhované studie v této přihlášce jsou nové v tom, že účinek(y) léčby Ofatumumabem u RS nebyly dříve studovány v populacích oligodendrocytů nebo oligodendrocytových progenitorových buněk (OPC). Výsledky této studie by mohly identifikovat další způsob účinku léčby ofatumumabem s účinky, které by mohly nepřímo prospívat CNS.

Konkrétní cíle:

Pro tuto studii výzkumníci navrhují, že dlouhodobý mechanismus účinku spojený s prospěšnými klinickými výsledky léčby ofatumumabem u RS není způsoben pouze přímým účinkem odstranění cirkulujících B-buněk, ale je také způsoben následnou změnou imunitní homeostáza s doprovázeným snížením cytotoxických sekrečních produktů z podskupin leukocytů včetně T buněk, monocytů, neutrofilů a NK buněk. Studie má dva konkrétní cíle:

U specifického cíle 1 (primární cíl) vyšetřovatelé určí, zda rozpuštěné látky vylučované T buňkami, monocyty, neutrofily nebo NK buňkami izolovanými od pacientů s relabující-remitující formou RS po 6 měsících (M06) léčby Ofatumumabem jsou pro myši méně toxické. - odvozené oligodendrocyty a jejich potomstvo (OPC) než rozpuštěné látky secernované stejnými subpopulacemi leukocytů odebraných před léčbou (M00 lék naivní). V tomto cíli bude primárním výsledkem posouzení míry smrti oligodendrocytů a OPC a mitochondriální dysfunkce.

Pro Specifický cíl 2 (průzkumný cíl) vyšetřovatelé identifikují faktor (faktory) odpovědný za indukci oligodendrocytového a OPC stresu (porovnání vzorků supernatantu M06 s M00) nejprve použitím přístupu cytokinového pole, po kterém v případě potřeby následuje 2D elektroforéza LC -MS proteomický přístup. Vyšetřovatelé také provedou další analýzy, které budou zkoumat změněné mikrogliální a astrocytové reakce po léčbě soluty vylučovanými z leukocytových subpopulací v M00 a M06 u pacientů s RS.

Studijní populace:

Pro tuto prospektivní longitudinální studii vyšetřovatelé přijmou 20 pacientů s klinicky definitivní relabující-remitující RS (RR-MS) (jak je definováno podle revidovaných McDonaldových kritérií), kteří budou léčeni Ofatumumabem (Kesimpta). Vyšetřovatelé také přijmou 20 zdravých kontrolních (HC) subjektů. V těchto studiích budou pacienti s RR-MS sloužit jako jejich vlastní vnitřní kontrola a zkoušející budou porovnávat změny v průběhu času na Ofatumumab s opatřeními před léčbou. Kromě toho budou vzorky pacientů s RR-MS porovnány se supernatanty subpopulace zdravých kontrolních leukocytů. Všem pacientům s RR-MS bude předepisován a léčen Ofatumumab jako součást jejich standardní péče od jejich ošetřujícího poskytovatele, s výjimkou pacientů s HC, kteří nedostávají žádnou léčbu.

Postupy a sběr dat:

Všichni pacienti s RR-MS budou vybráni z těch, kteří jsou v současné době sledováni lékaři v Centru komplexní péče o roztroušenou sklerózu na University of Southern California (USC) Keck School of Medicine nebo LAC+USC Medical Center, Klinice roztroušené sklerózy, a pro které Lékař již usoudil, že Ofatumumab by byl logickou alternativou léčby. Zkoušející nebudou posuzovat způsobilost pro léčbu ofatumumabem jako kritéria pro zařazení do této studie iniciované zkoušejícím (IIT). Vyšetřovatelé očekávají, že subjekty zapíšou během 10-12měsíční fáze náboru. Vyšetřovatelé očekávají, že poslední vzorek pacientů bude odebrán 18 měsíců po zahájení studie s konečnou analýzou dat dokončenou 27 měsíců po zahájení studie. Pro kohortu s ofatumumabem výzkumníci odeberou ~80 ml krve od zapsaných pacientů v M00 (výchozí stav, naivní vůči léku) a odeberou dalších 80 ml krve v M06 (měsíce 5-6 před 6měsíční injekcí ofatumumabu). U HC kohorty výzkumníci odeberou ~80 ml krve od zapsaných subjektů pouze v jednom časovém bodě. Vzorky krve budou zpracovány a subpopulace leukocytů izolovány pro kultivaci.