Снижение специфичной для олигодендроцитов цитотоксичности и лечение офатумумабом

Предыстория и обоснование:

Роль В-клеток в патогенезе рассеянного склероза (РС) до конца еще не изучена, однако исследования показали, что: 1) интратекальный синтез иммуноглобулина может быть обнаружен в спинномозговой жидкости >90% больных РС; 2) при хронических поражениях головного мозга при рассеянном склерозе имеются множественные клонально разросшиеся популяции В-клеток; 3) в мозговых оболочках больных вторично-прогрессирующим РС выявлены эктопические лимфоидные фолликулы, содержащие пролиферирующие В-клетки; и 4) было показано, что терапия, направленная на истощение В-клеток, имеет клиническую пользу при РС. В дополнение к этим выводам было показано, что В-клетки:

• Секретируют аутоантитела.
• Служат антигенпрезентирующими клетками.
• Способствовать активации Т-клеток.
• Вносят вклад в микроокружение за счет локальной секреции иммунных медиаторов, таких как цитокины и хемокины.

Важно, чтобы исследователи понимали не только клинические эффекты истощения В-клеток, но и, что особенно важно, чтобы исследователи понимали текущие механизмы действия после лечения офатумумабом. В частности, как офатумумаб косвенно модулирует оставшиеся патогенные популяции лейкоцитов, такие как Т-клетки, моноциты, нейтрофилы и естественные клетки-киллеры (NK), так что они могут быть менее патогенными для популяции миелинизирующих олигодендроцитов.

Офатумумаб представляет собой человеческое моноклональное антитело к CD20, которое продемонстрировало эффективность в снижении частоты рецидивов, активности магнитно-резонансной томографии (МРТ) и уровней нейрофиламентного света (NF-L), а также значительное снижение подтвержденного ухудшения инвалидности у пациентов с рецидивирующими формами РС. .

Точная роль (роли) В-клеток в патогенезе РС в настоящее время до сих пор неясна, как и события, которые приводят к гибели и дисфункции олигодендроцитов. Олигодендроциты представляют собой миелинизирующие клетки центральной нервной системы (ЦНС), а демиелинизация и гибель олигодендроцитов являются критическими событиями в патологическом процессе РС. В настоящее время ни один одобренный в настоящее время лекарственный препарат для лечения рассеянного склероза не нацелен на прямую защиту от потери и дисфункции олигодендроцитов или направлен на усиление восстановления ЦНС. Предлагаемые исследования в этой заявке являются новыми в том смысле, что эффект(ы) лечения офатумумабом при РС ранее не изучался в популяциях олигодендроцитов или клеток-предшественников олигодендроцитов (OPC). Результаты этого исследования могут выявить дополнительный механизм действия лечения офатумумабом с эффектами, которые могут косвенно принести пользу ЦНС.

Конкретные цели:

Для этого исследования исследователи предполагают, что долгосрочный механизм действия, связанный с благоприятными клиническими результатами терапии офатумумабом при РС, обусловлен не только прямым эффектом удаления циркулирующих В-клеток, но также обусловлен последующим изменением в иммунный гомеостаз с сопутствующим снижением цитотоксических секреторных продуктов субпопуляций лейкоцитов, включая Т-клетки, моноциты, нейтрофилы и NK-клетки. Исследование преследует две конкретные цели:

Для конкретной цели 1 (основная цель) исследователи определят, являются ли растворенные вещества, секретируемые Т-клетками, моноцитами, нейтрофилами или NK-клетками, выделенными от пациентов с рецидивирующе-ремиттирующими формами РС после 6 месяцев (M06) лечения офатумумабом, менее токсичны для мышей. производные олигодендроцитов и их потомство (OPC), чем растворенные вещества, секретируемые теми же субпопуляциями лейкоцитов, собранными до лечения (M00, не получавшие лекарственного средства). С этой целью первичным результатом будет оценка показателей гибели олигодендроцитов и OPC, а также митохондриальной дисфункции.

Для конкретной цели 2 (исследовательская цель) исследователи определят фактор(ы), ответственный(ые) за индукцию стресса олигодендроцитов и OPC (сравнивая образцы надосадочной жидкости M06 с M00), сначала используя подход с массивом цитокинов, а затем, при необходимости, с помощью 2D-электрофореза ЖХ. -MS протеомный подход. Исследователи также проведут дополнительные анализы, которые изучат измененные реакции микроглии и астроцитов после лечения растворенными веществами, секретируемыми из субпопуляций лейкоцитов на M00 и M06 у пациентов с РС.

Исследуемая популяция:

Для этого проспективного лонгитюдного исследования исследователи наберут 20 пациентов с клинически определенным рецидивирующе-ремиттирующим рассеянным склерозом (RR-MS) (согласно пересмотренным критериям Макдональда), которых будут лечить офатумумабом (кесимпта). Исследователи также наберут 20 здоровых субъектов контроля (HC). Для этих исследований пациенты с РР-РС будут служить их собственным внутренним контролем, и исследователи будут сравнивать изменения во времени на офатумумабе с мерами до лечения. Кроме того, образцы пациентов с РР-РС будут сравниваться с супернатантами здоровой контрольной субпопуляции лейкоцитов. Всем пациентам с РР-РС будет назначаться и лечиться офатумумабом в рамках их стандарта лечения от их лечащего врача, за исключением субъектов HC, которые не получают лечения.

Процедуры и сбор данных:

Все пациенты с РР-РС будут выбраны из тех, кого в настоящее время наблюдают врачи Центра комплексного лечения рассеянного склероза Медицинской школы Кека Университета Южной Калифорнии (USC) или Медицинского центра LAC+USC, Клиники рассеянного склероза, и для которых Врач уже счел, что офатумумаб будет логичной альтернативой лечению. Исследователи не будут оценивать пригодность для лечения офатумумабом в качестве критерия для включения в это исследование, инициированное исследователем (IIT). Исследователи ожидают, что зачисление испытуемых займет 10-12 месяцев. Исследователи ожидают, что последний образец пациента будет собран через 18 месяцев после начала исследования, а окончательный анализ данных будет завершен через 27 месяцев после начала исследования. Для когорты офатумумаба исследователи соберут ~80 мл крови у включенных в исследование пациентов в M00 (исходный уровень, не получавший лекарственного препарата) и соберут еще 80 мл крови в M06 (за 5-6 месяцев до 6-месячной инъекции офатумумаба). Для когорты HC исследователи соберут ~ 80 мл крови у зарегистрированных субъектов только в один момент времени. Образцы крови будут обработаны, а субпопуляции лейкоцитов выделены для посева.