Ridotta citotossicità specifica per gli oligodendrociti e trattamento con Ofatumumab

Contesto e motivazione:

Il ruolo delle cellule B nella patogenesi della sclerosi multipla (SM) non è ancora del tutto chiaro, tuttavia gli studi hanno dimostrato che: 1) la sintesi intratecale di immunoglobuline può essere rilevata nel liquido cerebrospinale di > 90% dei pazienti con SM; 2) ci sono più popolazioni di cellule B espanse clonalmente nelle lesioni cerebrali della SM cronica; 3) follicoli linfoidi ectopici contenenti cellule B proliferanti sono stati identificati all'interno delle meningi di pazienti affetti da SM progressiva secondaria; e 4) le terapie anti-B cell depleting hanno dimostrato di avere benefici clinici nella SM. Oltre a questi risultati, è stato dimostrato che le cellule B:

• Secernono autoanticorpi.
• Fungono da cellule presentanti l'antigene.
• Facilita l'attivazione delle cellule T.
• Contribuire al microambiente attraverso la secrezione locale di mediatori immunitari come citochine e chemochine.

È importante che i ricercatori non solo comprendano gli effetti clinici della deplezione delle cellule B, ma anche, in modo critico, che comprendano i meccanismi d'azione in corso dopo il trattamento con Ofatumumab. In particolare, come le restanti popolazioni leucocitarie patogene, come cellule T, monociti, neutrofili e cellule natural killer (NK) sono modulate indirettamente da Ofatumumab in modo tale che possano essere meno patogene per la popolazione di oligodendrociti mielinizzanti.

Ofatumumab è un anticorpo monoclonale umano anti-CD20 che ha dimostrato efficacia nel ridurre i tassi di recidiva, l'attività di risonanza magnetica (MRI) e i livelli di neurofilamento leggero (NF-L), nonché una significativa riduzione del peggioramento confermato della disabilità nei pazienti con forme recidivanti di SM .

I ruoli esatti delle cellule B nella patogenesi della SM non sono ancora chiari al momento, così come gli eventi che portano alla morte e alla disfunzione degli oligodendrociti. Gli oligodendrociti sono le cellule mielinizzanti del sistema nervoso centrale (SNC) e la demielinizzazione e la morte degli oligodendrociti sono eventi critici nel processo patologico della SM. Al momento nessuna terapia farmacologica per la SM attualmente approvata è mirata alla protezione diretta contro la perdita e la disfunzione degli oligodendrociti o mira a migliorare la riparazione del sistema nervoso centrale. Gli studi proposti in questa domanda sono nuovi in ​​quanto gli effetti del trattamento con Ofatumumab nella SM non sono stati precedentemente studiati nelle popolazioni di oligodendrociti o cellule progenitrici degli oligodendrociti (OPC). I risultati di questo studio potrebbero identificare un'ulteriore modalità di azione del trattamento con Ofatumumab, con effetti che potrebbero indirettamente beneficiare il sistema nervoso centrale.

Obiettivi specifici:

Per questo studio, i ricercatori propongono che il meccanismo d'azione a lungo termine associato agli esiti clinici benefici della terapia con Ofatumumab nella SM non sia dovuto solo all'effetto diretto della rimozione delle cellule B circolanti, ma anche alla successiva alterazione della omeostasi immunitaria con una riduzione accompagnata dei prodotti secretori citotossici da sottoinsiemi di leucociti tra cui cellule T, monociti, neutrofili e cellule NK. Lo studio ha due obiettivi specifici:

Per lo scopo specifico 1 (obiettivo primario) i ricercatori determineranno se i soluti secreti da cellule T, monociti, neutrofili o cellule NK isolati da pazienti con forme recidivanti-remittente di SM dopo 6 mesi (M06) di trattamento con Ofatumumab sono meno tossici per il topo -derivati ​​da oligodendrociti e dalla loro progenie (OPC) rispetto ai soluti secreti dalle stesse sottopopolazioni di leucociti raccolti prima del trattamento (M00 drug naive). A questo scopo, l'esito primario sarà valutare le misure della morte di oligodendrociti e OPC e la disfunzione mitocondriale.

Per l'obiettivo specifico 2 (obiettivo esplorativo) gli investigatori identificheranno i fattori responsabili dell'induzione dello stress da oligodendrociti e OPC (confrontando i campioni di supernatante M06 con M00) utilizzando prima un approccio di array di citochine seguito, se necessario, da un LC di elettroforesi 2D -Approccio proteomico MS. Gli investigatori eseguiranno anche ulteriori analisi che esploreranno le risposte alterate della microglia e degli astrociti in seguito al trattamento con soluti secreti dalle sottopopolazioni di leucociti a M00 e M06 nei pazienti con SM.

Popolazione di studio:

Per questo studio longitudinale prospettico i ricercatori recluteranno 20 pazienti con SM clinicamente definita recidivante-remittente (RR-SM) (come definito dai criteri McDonald rivisti) che saranno trattati con Ofatumumab (Kesimpta). Gli investigatori recluteranno anche 20 soggetti sani di controllo (HC). Per questi studi, i pazienti RR-MS fungeranno da controllo interno e gli investigatori confronteranno i cambiamenti nel tempo su Ofatumumab con le misure pre-trattamento. Inoltre, i campioni di pazienti affetti da RR-MS saranno confrontati con surnatanti di sottopopolazioni di leucociti sani di controllo. A tutti i pazienti con RR-SM verrà prescritto e trattato con Ofatumumab come parte del loro standard di cura dal loro fornitore curante, ad eccezione dei soggetti con HC che non ricevono alcun trattamento.

Procedure e raccolta dati:

Tutti i pazienti con RR-SM saranno selezionati tra quelli attualmente visitati dai medici del Multiple Sclerosis Comprehensive Care Center della Keck School of Medicine della University of Southern California (USC) o del LAC+USC Medical Center, Multiple Sclerosis Clinic, e per i quali il il medico ha già ritenuto che Ofatumumab sarebbe una logica alternativa terapeutica. I ricercatori non valuteranno l'idoneità al trattamento con Ofatumumab come criterio per l'inclusione in questo studio avviato dallo sperimentatore (IIT). Gli investigatori prevedono di arruolare soggetti in una fase di reclutamento di 10-12 mesi. Gli investigatori si aspettano che l'ultimo campione di pazienti venga raccolto 18 mesi dopo l'inizio dello studio con l'analisi finale dei dati completata 27 mesi dopo l'inizio dello studio. Per la coorte Ofatumumab, i ricercatori raccoglieranno ~ 80 ml di sangue dai pazienti arruolati a M00 (basale, naive al farmaco) e raccoglieranno altri 80 ml di sangue a M06 (mesi 5-6 prima dell'iniezione di Ofatumumab di 6 mesi). Per la coorte HC, gli investigatori raccoglieranno ~ 80 ml di sangue dai soggetti arruolati in un solo momento. I campioni di sangue saranno processati e le sottopopolazioni di leucociti saranno isolate per la coltura.